Un protocole en vue d’acquérir la Tenocyte dégénérative de l’homme

Soo-Hong Han; Hyung Kyung Kim; Jong-Ho Ahn; Dong Hyeon Lee; Minjung Baek; Geunhee Ye; Joong-Myung Lee; Kyunghoon Min; Chihoon Oh; Soonchul Lee

doi:10.3791/57634

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Article de méthode

Un protocole en vue d’acquérir la Tenocyte dégénérative de l’homme

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DOI :

10.3791/57634

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9 juin 2018

Soo-Hong Han^*¹ , Hyung Kyung Kim^*² , Jong-Ho Ahn^*¹ , Dong Hyeon Lee³ , Minjung Baek¹ , Geunhee Ye¹ , Joong-Myung Lee¹ , Kyunghoon Min⁴ , Chihoon Oh¹ , Soonchul Lee¹

¹Department of Orthopaedic Surgery, CHA Bundang Medical Center, CHA University School of Medicine, ²Department of Pathology, Kyung Hee University Hospital at Gangdong, Kyung Hee University School of Medicine, ³Department of Physiology, CHA University School of Medicine, ⁴Department of Rehabilitation, CHA Bundang Medical Center, CHA University School of Medicine

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

In vitro utilisation de tenocytes dégénérative est essentielle lors d’enquêtes sur l’efficacité de nouveaux traitements sur tendinopathie. Toutefois, la plupart des études de recherche utilisent uniquement le modèle animal ou un tenocyte sain. Nous proposons le protocole suivant pour isoler tenocytes dégénératives humaines pendant la chirurgie.

Résumé

Tendinopathie, une affection douloureuse qui se développe en réponse à la dégénérescence du tendon, est en hausse dans les pays développés en raison de l’augmentation de l’activité physique et l’espérance de vie. Malgré l’augmentation de la prévalence, la pathogénie sous-jacente reste encore incertaine, et le traitement est généralement symptomatique. Récemment, de nombreuses options thérapeutiques, y compris les facteurs de croissance, les cellules souches et thérapie génique, ont été étudiées dans l’espoir d’améliorer la puissance de guérison du tendon dégénératif. Cependant, la majorité de ces études ont été menée que sur des modèles animaux ou tenocytes humain sain. Malgré certaines études sur le tenocytes pathologique, au meilleur de notre connaissance il n’y a actuellement aucun protocole décrivant comment obtenir tenocytes dégénératives humaines. Le but de cette étude est de décrire un protocole standard pour l’acquisition humaine tenocytes dégénérative. Au départ, le tissu tendineux a été récolté chez un patient présentant l’epicondylitis pendant la chirurgie. Puis biopsies ont été prises depuis le tendon extenseur carpi radialis brevis correspondant aux changements structurels observées au moment de la chirurgie. Tous les tendons récoltés semblent terne, gris et friable, et oedémateux, qui fait visuellement distinctes de celles en bonne santé. Tenocytes ont été cultivés et utilisés pour des expériences. Pendant ce temps, la moitié des tissus récoltés ont été analysée sur le plan histologique, et il a été démontré qu’ils partageaient les mêmes caractéristiques principales de tendinopathie (angiofibroblastic dysplasie ou hyperplasie). Une analyse secondaire par immunocytochimie a confirmé que les cellules cultivées ont été tenocytes avec la majorité des cellules ayant des taches positives pour les protéines mohawk et tenomodulin. Puis, les qualités de la nature dégénérative de tenocytes ont été déterminées en comparant les cellules avec le contrôle sain à l’aide d’une analyse de prolifération ou qRT-PCR. Le tenocyte dégénérative affiche un taux plus élevé de prolifération et similaires modèles d’expression de gène de tendinopathie correspondant à des rapports antérieurs. Dans l’ensemble, ce nouveau protocole pourrait constituer un outil utile pour les études futures de tendinopathie.

Introduction

Tendinopathie est un trouble musculo-squelettique dégénératif chronique qui se développe dans différentes parties du corps. Récemment, le nombre de cas de tendinopathie a augmenté considérablement dans les pays développés en raison de la participation aux sports de loisirs et l’espérance de vie accrue¹^,²de plus en plus. La cause de tendinopathie est considérée comme multifactorielle et ces causes incluent l’ischémie, blessures de radicaux libres d’oxygène, un déséquilibre entre les innervations vasoconstricteur et vasodilatateur, intérieur micro-déchire et modifications neuro-règlement³