Modèle murin Aspiration oropharyngée de pneumonie bactérienne associée à et nosocomiales

Résumé

La pneumonie infectieuse est parmi les infections les plus courantes chez l’homme. Un modèle approprié en vivo est essentiel pour comprendre la pathogenèse de la maladie et de tester l’efficacité de nouveaux médicaments. Avec ce modèle de pneumonie murine aspiration oropharyngée, on peut examiner la pathogénie et nouveaux traitements contre ces infections mortelles.

Résumé

Modèles murins d’infection sont essentielles pour comprendre la pathogenèse de la maladie et de tester l’efficacité de nouveaux médicaments visant à lutter contre les agents pathogènes causatifs. Pneumonies infectieuses est parmi les infections les plus communes présentées par les patients à la clinique et garantit ainsi un modèle approprié en vivo . Les modèles de pneumonie typique utilisent l’inoculation intranasale, qui dépose des organismes excessives en dehors du poumon, provoquant des complications hors cible et symptômes, tels que la sinusite, gastrite, entérite, traumatismes physiques ou au moyen de microparticules brumisation pour imiter les aérosols diffusion plus typique d’une pneumonie virale, tuberculeuse ou fongique. Ces modèles ne reflètent pas exactement la pathogenèse de la pneumonie bactérienne typique ou soins de santé-extra-hospitalière. En revanche, ce modèle murin de pneumonie par aspiration oropharyngée imite l’itinéraire de gouttelettes en pneumonie soins de santé. Inoculant 50 µL de la bactérie suspension dans l’oropharynx de souris anesthésiés entraîne l’aspiration réflexive, qui se traduit par une pneumonie. Avec ce modèle, on peut examiner la pathogenèse des pathogènes qui causent la pneumonie et de nouveaux traitements pour lutter contre ces maladies.

Introduction

Infection des voies respiratoire inférieures est des maladies transmissibles au plus meurtrier du monde et la cause la plus fréquente de décès dans les pays en développement¹. Globalement, ces infections représentent plus de 3,2 millions de décès¹. En outre, la pneumonie nosocomiale est parmi les formes les plus courantes et les plus meurtrières des soins de santé infections contractées et est causée par des agents pathogènes plus résistantes aux antibiotiques^2,3. Le parcours typique d’acquisition de la pneumonie bactérienne pour les deux extra-hospitalière et pn....

Protocole

Toutes les procédures impliquant des animaux doivent être approuvés par le chercheur animalier institutionnel et utilisation Comité (IACUC).

1. préparation de l’Inoculum bactérien

1. Isoler les colonies bactériennes.
   1. Ensemencer une souche bactérienne (par exemple, a. baumannii « HUMC1 ») sur un milieu approprié agar stérile (p. ex., la gélose trypticase soja), en veillant à ne générer des colonies isolées.
   2. Incuber à des conditions appropriées (par exemple, une nuit à 37 ° C).
2. Cultiver la culture pendant la nuit.
   1. Choisir un représentant, une colonie ....

Résultats

En suivant scrupuleusement le protocole, reproductibles et fiable de données peuvent être facilement obtenues. Il est essentiel de se conformer strictement au protocole de préparation inoculum sur mesure pour des expériences à comparer à un autre. Il est également important gérer correctement les souris au cours de la procédure de l’infection. N’oubliez pas de placer la souris dans une chambre d’anesthésie dépourvu isoflurane. Souris vont paniquer si elles sont placées dans une chambre qu.......

Discussion

Pour être sûr, souris ne sont pas les humains miniatures. Résultats obtenus à partir des modèles de souris doivent être pris en considération dans le contexte et interprétés par la suite pour l’applicabilité aux humains, basée sur les différences et les similitudes entre les deux espèces de⁶. Il est également important de choisir la souche de souris approprié comme certains sont plus sensibles à certaines infections que d’autres ; Il en va de même pour la souche pathogène de choix

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Agar	BD	214530	Combiner avec TSB pour fabriquer
billes TSA, du verre borosilicaté	135003		Stériliser par cuisson ou autoclave avant chaque
utilisation Bécher, 250 mL	Pyrex	1003	Utilisé lors de l’aliquotage précis d’inoculums bactériens concentrés
Centrifugeuse	Sorvall	ST 40R	Capable de 4 000&fois ; g à 4° ; Chambre C
pour l’anesthésie	Kent Scientific Corporation	VetFlo-0720	Peut accueillir jusqu’à 5 souris
Cryomold, taille intermédiaire	Sakura Tissue-Tek	4566	Moules à échantillons en vinyle jetables, 15&fois ; 15&fois ; Fil dentaire de 5 mm
	Oral-B	37000469537	Attache au poteau stable à environ 6" au-dessus de la hauteur de la table
Pince	VWR	82027-440	Utilisée pour retirer doucement la langue de la bouche de la souris
Homogénéisateur pour tissu pulmonaire	Omni International	TM125-115	Autoclave avant la première utilisation ; rincer entre les échantillons
Isoflurane pour l’anesthésie	Abbott	10015516	Une drogue alternative peut être utilisée ; modifier la procédure en conséquence
Cartouche iSTAT	Abbott	03P79-25	Diverses cartouches sont disponibles pour répondre à vos besoins
Kétamine, 100 mg/mL	Western Medical Supply	4165	Diluer 1:10 dans du PBS à 1 mg/mL et combiner avec de la xylazine à 1 mg/mL
Pommade pour les yeux	Larmes d’akorn	Renouvelée	Éviter de toucher l’œil avec l’embout du distributeur
Température de coupe optimale (O.C.T.) Composé	Fisher Scientific	23-730-571	Utilisé pour congeler des échantillons de poumons à -80 ° ; C pour préparer la coupe pathologique Boîte de
Pétri	VWR	25384-302	Polystyrène, jetable, stérilisé, 100&fois ; 15 mm
Saline tamponnée au phosphate (PBS)	Corning	21-031-CM	Dulbecco’s PBS sans calcium et magnésium Pointes
pipette, 200-&mu ; L	VWR	10017-044	Autoclave avant utilisation
Pipette, 200-&mu ; L	Gilson	Pipetman P200	Autoclave et calibre avant utilisation
Épandeur, cellule bactérienne	Bel-Art	F377360006	Stériliser par cuisson ou autoclave avant chaque utilisation
Barre d’agitation, magnétique, 7,9 mm Diamètre & fois ; 38,1 mm Longueur	VWR	58948-150	Utilisé pour l’agitation d’inoculums bactériens concentrés lors de l’aliquotage
Plaque d’agitation, Corning magnétique		PC-620D	Utilisé pour l’agitation d’inoculums bactériens concentrés lors de l’aliquotage Bouillon
soja tryptique (TSB)	BD	211822	Combiner avec de la gélose pour fabriquer un flacon TSA
, conique, stérile, 50 mL	Corning	431720	Utilisé pour préparer un inoculum bactérien
Flacon, conique, stérile, 500 mL	Corning	431123	Utilisé pour concentrer l’inocula pour la préparation d’inocula congelé
Flacon, cryogénique, 2,0 mL	Corning	430659	Utilisé pour le stockage cryogénique de l’inoculum bactérien concentré
Xylazine, 20 mg/mL	Akorn	AnaSed Injection	Diluer 1:20 dans du PBS à 1 mg/mL et combiner avec de la kétamine à 1 mg/mL

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