Multimodal d’imagerie rétinienne volumétrique Oblique à balayage Laser ophtalmologique (oSLO) et la tomographie en cohérence optique (OCT)

Résumé

Nous présentons ici un protocole pour obtenir un grand champ de vision (FOV) en trois dimensions (3D) fluorescence et l’image rétinienne OCT en utilisant une nouvelle plate-forme multimodale d’imagerie. Nous allons introduire la configuration du système, la méthode de l’alignement et les protocoles opérationnels. L’imagerie in vivo sera démontrée, et recevront les résultats représentatifs.

Résumé

Alors que l’imagerie de fluorescence est largement utilisée en ophtalmologie, une image rétinienne en trois dimensions (3D) fluorescence du grand champ de vision (FOV) est toujours un grand défi avec la rétine state-of-the-art modalités d’imagerie car il leur faudrait z un empilement de Compiler un ensemble de données volumétrique. Plus récente tomographie à cohérence optique (OCT) et systèmes d’angiographie (OCTA) OCT surmonter ces restrictions afin de fournir des images vasculaires et anatomiques en trois dimensions (3D), mais la nature sans colorant, octobre ne peut pas visualiser la fuite indicative de vasculaire dysfonction. Ce protocole décrit une oblique roman analyse technique de laser ophtalmologique (oSLO) qui fournit l’imagerie rétinienne fluorescence volumétrique 3D. Le programme d’installation du système d’imagerie génère l’oblique le balayage par un curseur de queue de colombe et aligne le système d’imagerie final à un angle pour détecter les images fluorescentes en coupe transversale. Le système utilise la méthode de balayage au laser et par conséquent, permet une intégration facile des OCT comme volumétrique modalité d’imagerie structurelle complémentaire. L’imagerie in vivo sur la rétine de rat est démontré ici. Solution de fluorescéine est injectée par voie intraveineuse pour produire l’angiographie à la fluorescéine volumétrique (vFA).

Introduction

Ophtalmologie et vision science bénéficier grandement les techniques modernes d’imagerie optiques, étant donné que la rétine est facilement accessible avec la lumière. Imagerie rétinienne de fluorescence est un outil essentiel dans le diagnostic et la gestion de Chorio-rétinienne de maladies vasculaires comme la rétinopathie diabétique (RD) et de la dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA), qui sont causes principales de cécité aux Etats-Unis.

Toutefois, il est toujours difficile d’acquérir un grand champ de vision (FOV), en trois dimensions rétinienne (3D), imagerie par imagerie de fluorescence. La photographie du fond de œil n’a pas l....

Protocole

Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvés par l’utilisation Comité (ACUC) du centre médical de Boston et animalier.

1. Configuration du système

1. Système d’oSLO
   1. Utiliser une source de laser de supercontinuum comme la source de laser de système.
      1. Séparer la gamme de lumière visible (450-650 nm) des longueurs d’onde plus élevée (650-2000 nm) par un miroir dichroïque (DM1). Élargir le spectre d’une paire de prismes dispersion après la poutre, en passant par un séparateur de faisceau de polarisation (PBS).
      2. Placer une fente pour sélectionner la plage de longueur d’onde d’excitation (475-495 nm). Utilis....

Résultats

Figure 4 a montre une image de OCT transversale de la rétine de rat. Figure 4 b -4 c montrent les mêmes images rétiniennes transversales de vFA OCTA et oSLO acquis en même temps. L’oSLO permet transversale FA analogue à l’OCT B-scan. En comparaison de l’OCTA, l’image coupe transversale d’oSLO vFA identifie clairement les vaisseaux dans la couche de fibres nerveuses (NFL) et de la couche de cellules de ganglion (G.......

Discussion

Ici, nous avons décrit à oSLO, une en vivo volumétrique fluorescent d’imagerie rétinienne technique avec un FOV de plus de 30 °. Par rapport à octobre, un standard actuel méthode en ophtalmologie, d’imagerie oSLO offre un capacité d’imagerie en 3D similaires mais permet de contraste de fluorescence qui OCT n’est pas sensible aux. L’avantage d’oSLO est qu’elle nécessite qu’une seule méthode raster et permet ainsi la combinaison transparente de PTOM, prévoyant deux techniques complémentaires imagerie volumétrique .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Source laser supercontinuum	NKT Photonics	SuperK EXTREME EXU-OCT6
Miroir dichroïque (DM1)	Thorlabs	DMLP650R
Miroir dichroïque (DM2)	Chroma	ZT514/1064RPC
Miroir dichroïque (DM3)	Thorlabs	DMLP900R
Fibre monomode (SMF 1)	Thorlabs	P3-460B-FC-2
Fibre monomode (SMF 2)	Thorlabs	P3-780A-FC-2
Coupleur de fibre optique	Thorlabs	TW850R5A2
Système télescopique 1:1	Thorlabs	AC254-100-A× ;
Système de télescope 3:1	Thorlabs	AC254-150-A& fois ;
Système de télescope 3:1	Thorlabs	AC254-50-A× ;
Miroirs Galvo (GM1,GM2)	Thorlabs	GVS201& fois ;
De-sacn Galvo Mirrors (GM3)	Thorlabs	GVS011
Objectif Objectif	Olympus	UplanSApo 20× ;/0.75
Système d’imagerie finale	Olympus	UplanFL N 10× ;/0.3
Système d’imagerie finale	Computar	12-36mm/1:2.8
Appareil photo	PCO	Pco.pixelfly usb
Filtre	Thorlabs	FEL0800
Filtre ND à variation continue	monté Thorlabs	Caméra à
AO1)Carte de sortie analogique	PCI-6731
(AO2)	National Instrument	PCIe-6351
Filtre passe-long	Thorlabs	FEL0800

2222 balayage linéaire Thorlabs SPL2048-140K (