Abrasion épithéliale cornéenne avec oculaire Burr comme modèle pour la cornée, la cicatrisation

Solja Kalha; Alison Kuony; Frederic Michon

doi:10.3791/58071

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Article de méthode

Abrasion épithéliale cornéenne avec oculaire Burr comme modèle pour la cornée, la cicatrisation

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DOI :

10.3791/58071

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10 juillet 2018

Solja Kalha¹ , Alison Kuony¹ , Frederic Michon¹^,²

¹Helsinki Institute of Life Science, Institute of Biotechnology, University of Helsinki, ²School of Medicine and Institute for Science and Technology in Medicine, Keele University

Dans cet article

Résumé

Ce protocole décrit une méthode pour infliger une abrasion de la surface oculaire de la souris et de suivre la processus de cicatrisation par la suite. Le protocole profite d’une bavure oculaire pour éliminer partiellement l’épithélium de surface de le œil chez les souris anesthésiés.

Résumé

La cornée murine fournit un excellent modèle pour étudier la cicatrisation des plaies. La cornée est la couche la plus externe de le œil et est donc la première défense des blessures. En fait, le type le plus commun de blessure à l’oeil dans la clinique est une abrasion cornéenne. Ici, nous utilisons une bavure oculaire pour provoquer une usure résultant en retrait de l’épithélium cornéen in vivo sur des souris anesthésiés. Cette méthode permet de perturbation épithéliale ciblée et reproductible, laissant les autres zones intactes. En outre, nous décrire la visualisation de l’épithélium abrasée avec coloration de fluorescéine et fournir des conseils concrets sur la façon de visualiser la cornée abrasée. Puis, nous suivons la chronologie de la cicatrisation 0, 18 et 72 h après abrasion, jusqu'à ce que la plaie est re-epithelialized. Le modèle d’abrasion épithéliales de lésion de la cornée est idéal pour les études sur la prolifération des cellules épithéliales, de migration et de ré-épithélialisation des couches cornéens. Toutefois, cette méthode n’est pas optimale pour étudier l’activation stromale lors de la cicatrisation des plaies, car la bavure oculaire ne pénètre pas dans les couches de cellules stromales. Cette méthode convient également pour des applications cliniques, par exemple, de l’essai préclinique de l’efficacité des médicaments.

Introduction

Les couches épithéliales de nombreux organes sont exposés à des blessures. Toutefois, ils contiennent également de la possibilité de compenser pour la perte de tissu grâce à la cicatrisation des plaies. La cornée offre un excellent modèle pour étudier la cicatrisation des plaies. Il forme la surface externe de le œil et fournit une couche de protection pour les machines sensibles oculaire. Ainsi, la cornée fonctionne comme une barrière physique aux pathogènes et aux pertes d’eau. Elle est composée de trois couches ; épithélium et stroma, endothélium. L’épithélium de la cornée constitue la couche la plus superficielle de la cornée. Cellules épithéliales maintiennent la....