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Article de méthode

Un modèle murine de la dengue virus induite par l'encéphalite virale aigue comme la maladie

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DOI :

10.3791/59132

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28 avril 2019

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Dans cet article

Résumé

Ici, nous présentons un protocole pour créer un modèle murine immunocompétent d'IC (Institut de recherche sur le cancer) de l'infection de système nerveux central pour montrer le développement de la neuropathie. La surveillance des désordres encéphalitiques virales aigues par des scores identiques de maladie pourrait être exécutée pour montrer la neuropathie virus-induite de dengue in vivo.

Résumé

Le virus de la dengue (DENV), un virus transmis par les arthropodes transmis par les moustiques, peut causer la maladie grave connue sous le nom de dengue hémorragique, qui se caractérise par des complications mortelles dues à des fuites de plasma, ascites, effusion pleurale, détresse respiratoire, saignements graves et une déficience des organes. Quelques cas d'infection de DENV présentent des manifestations neurologiques ; cependant, les études n'ont pas exploré la neuropathogenèse DENV-induite plus loin. Dans cette étude, nous présentons un protocole pour employer une souris d'IC (Institut de recherche sur le cancer) de surcapacité immunocompétente pour étudier l'induction de l'infection de système nerveux central (CNS) avec DENV, suivie de la progression de l'encéphalite virale aigue-comme maladie.

Introduction

DENV, un virus transmis par les arthropodes de la famille des Flaviviridae, contient un génome d'ARN à sens positif qui code trois protéines structurelles virales (capsid, prémembrane et enveloppe) et sept protéines virales non structurelles (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B , et NS5). Les quatre sérotypes de DENV (DENV1-4), qui infectent environ 390 millions de personnes par an, causent un fardeau mondial, même si les gouvernements ont orienté des efforts substantiels vers les moustiques vecteurs et la lutte contre les maladies1. À l'heure actuelle, des vaccins protecteurs et des médicaments antiviraux thérapeutiques sont en cours de ....

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Protocole

Les protocoles expérimentaux d'étude animale ont été approuvés par le Comité institutionnel de soins aux animaux et d'utilisation du National Defense Medical Center (numéro 16-261 de l'IACUC), selon les lignes directrices établies par le Ministère des sciences et de la technologie de Taïwan.

1. Procédure d'infection

  1. Préparer les stocks non adaptés de DENV2 (souche PL046)9 (obtenus à l'origine auprès des Centers for Disease Control de Taiwan, allant de 2,5 x 107 à 1 x 109 PFU/mL).
  2. Diluer le stock de virus à 1 x 106 PFU avec Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 164....

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Résultats

Des complications neurologiques graves associées à la dengue ont été signalées chez des patients atteints de pathogénie de la dengue4. Bien que ces cas soient rares dans la clinique, la création d'un modèle murine immunocompétent de l'infection de DENV peut être employée non seulement pour étudier l'immunopathogenèse mais également pour explorer l'infection de CNS, la neuroinflammation, la neurotoxicité, et le viral aigu maladie ressemblant à une maladie ressemblan.......

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Discussion

L'infection de DENV a été détectée dansle CNS des patients graves de dengue 3,17,suggérant la possibilité de la manifestation de l'encéphalite virale aigue s'est produite pendant la pathogénie de dengue. Ici, nous rapportons un modèle murine in vivo de l'infection de DENV pour étudier la participation du dysfonctionnement de CNS dans la dengue grave, particulièrement avec un foyer sur DENV-induite maladies virales-comme. Par rapport aux modèles précédents, en par.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Remerciements

Cette étude a été soutenue par des subventions du Ministère des sciences et de la technologie (MOST107-2321-B-038-001) et du financement intra-muros 106TMU-CIT-01-2, Taipei, Taiwan.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Roswell Park Memorial Institute 1640 moyen (RPMI)Gibco11875-085Virus diluant
0,3 mL Seringue à insuline  ;BD Ultra-Fine­ ;II328838Injection intracérébrale et intrapéritonéale
MicrobalanceMETTLER TOLEDO’s LabXAL104Poids
Non adapté DENV2 (souche PL046)Centers for Disease Control of Taiwan-Infectmouse
Institute of Cancer Research (ICR) souris de laitBioLASCO Taiwan Co., Ltd-Ourmurin
souris model

Références

  1. Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. Dengue infection. Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055(2016).
  2. Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities. Lancet Infectious Diseases. 17

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Réimpressions et autorisations

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