Method Article

Acquisition de données et analyse dans brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

DOI:

10.3791/59200

⸱

May 10th, 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Experimental Neuropsychopharmacology, Federal Institute for Drugs and Medical Devices, 2KBRwyle GmbH, 3Cognitive Neurophysiology, Department of Psychiatry and Psychotherapy, Faculty of Medicine, University of Cologne, 4Molecular and Cellular Cognition, German Center for Neurodegenerative Diseases (DZNE), 5Institute of Neurophysiology, Faculty of Medicine, University of Cologne, 6Federal Institute for Drugs and Medical Devices (BfArM), 7Thescon GmbH

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L'audiométrie de réponse évoquée de tronc cérébral est un outil important dans la neurophysiologie clinique. De nos jours, l'audiométrie de réponse évoquée par le tronc cérébral est également appliquée dans la science fondamentale et les études précliniques impliquant des modèles d'animaux pharmacologiques et génétiques. Ici, nous fournissons une description détaillée de la façon dont les réponses auditives du tronc cérébral peuvent être enregistrées et analysées avec succès chez les souris.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L'audiométrie de réponse évoquée de tronc cérébral (BERA) est d'importance centrale dans la neurophysiologie clinique. Comme d'autres techniques de potentiel évoqué (EP), telles que les potentiels évoqués visuellement (VEP) ou les potentiels évoqués somatosensoriels (SEP), les potentiels auditifs évoqués (AEP) sont déclenchés par la présentation répétitive de stimuli identiques, le réponse électroencéphalographique (EEG) dont la moyenne est par la suite moyenne ayant pour résultat des déviations positives (p) et négatives (n) distinctes. Chez l'homme, l'amplitude et la latence des pics individuels peuvent être utilisées pour caractériser les altérations de la synchronisation et de la vitesse de conduction dans les circuits neuronaux sous-jacents. Fait important, les PEA sont également appliqués dans la science fondamentale et préclinique pour identifier et caractériser la fonction auditive dans les modèles pharmacologiques et génétiques des animaux. Plus encore, des modèles animaux combinés à des tests pharmacologiques sont utilisés pour étudier les avantages potentiels dans le traitement de la perte auditive neurosensorielle (p. ex., déficits auditifs induits par l'âge ou le bruit). Ici, nous fournissons une description détaillée et intégrative de la façon d'enregistrer les réponses auditives du tronc cérébral (APR) chez les souris à l'aide d'application de clic et de tonalité-éclatement. Ce protocole met l'accent sur le logement pré-expérimental des animaux, l'anesthésie, l'enregistrement ABR, les processus de filtrage ABR, l'analyse automatisée de la fonction de croissance de l'amplitude basée sur les ondes et la détection de la latence.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Un aspect central de la physiologie du cerveau est sa capacité à traiter l'information environnementale résultant en différentes sorties intrinsèques ou extrinsèques, telles que l'apprentissage, la mémoire, les réactions émotionnelles ou les réponses motrices. Diverses approches expérimentales et diagnostiques peuvent être utilisées pour caractériser la réactivité électrophysiologique des différents types de cellules neuronales ou des grappes/ensembles de neurones dans un circuit neuronal lié au stimulus. Ces techniques électrophysiologiques couvrent différentes dimensions spatiotemporales sur le micro-, le méso- et le macroscale1. Le niveau de....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Toutes les procédures animales ont été effectuées conformément aux directives du Conseil allemand des soins aux animaux et tous les protocoles ont été approuvés par le comité institutionnel local et national sur les soins aux animaux (Landesamt f'r Natur, Umwelt, und Verbraucherschutz, État Bureau de La Rhénanie-du-Nord-Westphalie, Département de la nature, de l'environnement et de la consommation [LANUV NRW], Allemagne). Les auteurs certifient en outre que toutes les expérimentations animales ont été menées conformément au National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH Publications No. 80-23) révisé en 1996 ou à la UK Animals (Sci....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les enregistrements ABR évoqués par clic et ton peuvent être utilisés pour évaluer les différences de seuil d'audition, la fonction de croissance de l'amplitude et la comparaison de latence. Les APR évoqués par clic dans le mode d'augmentation SPL sont représentés à la figure 1 pour les contrôles et deux lignes de souris mutantes exemplaires qui sont déficientes pour le canal Cav3.2 T-ty mat à barrière de tension Ca2 (c.-à-d., Cav

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ce protocole fournit une description détaillée et intégrative de la façon d'enregistrer les réponses auditives évoquées du tronc cérébral chez la souris. Il met l'accent sur le prétraitement des animaux, l'anesthésie et les facteurs de confusion méthodologiques potentiels. Ces derniers comprennent, entre autres, le sexe, la ligne de souris, l'âge et les conditions de logement. Il convient de noter que tous ces facteurs peuvent avoir un impact sur la perte auditive neurosensorielle et les aspects fondamentaux du traitemen.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs tiennent à remercier la Dre Christina Kolb (Centre allemand pour les maladies neurodégénératives (DZNE)) et le Dr Robert Stark (DZNE) pour leur aide dans l'élevage et les soins de santé animale. Ce travail a été soutenu financièrement par l'Institut fédéral des drogues et des dispositifs médicaux (Bundesinstitut f'r Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM, Bonn, Allemagne).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Logiciel AEP/OAE pour RZ6 (logiciel BioSigRZ)Tucker-Davis Technologies (TDT)BioSigRZ
Microscope chirurgical binoculaireZeiss Stemi 20000000001003877, 435540000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000
Cages (Macrolon)Techniplast1264C, 1290D
Carprox vet, 50mg/ mlVirbac Tierarzneimittel GmbHPZN 11149509
Source de lumière froideSchott KL2500 LCD9.705 202
Applicateurs d’embouts en coton (stériles)Carl RothEH12.1
Cage de Faraday en métal grillagé sur mesure (acier inoxydable, épaisseur de 2 mm, taille de maille de 1 cm)Sur
5 % Dexpanthenole (crème pour les yeux et le nez Bepanthen)Bayer Vital GmbHPZN : 01578681
Électrodes sous-cutanées jetables en acier inoxydable Needle
, 27GA, 12mm		Rochester Electro-Medical, Inc.S03366-18
Draps chirurgicaux (stériles)HartmannPZN 0366787
Ethanol, 70 %Carl Roth9065.5
1/4'' Kit de micro d’étalonnage de mesure en champ libreTucker-Davis Technologies (TDT)PCB-378C0
Gants (stériles)Unigloves1570
Graefe Forceps incurvés, dentelésFST11052-10
Logiciel GraphPad Prism 6, V6.07Logiciel GraphPad Prism, Inc.https://www.graphpad.com/
Stérilisateur d’instruments chirurgicaux à base de chaleurFST18000-50
Homeothermic
chauffant		ThermoLux461265 / -67
Ketanest S (Kétamine), 25mg/mlPfizerPZN 08707288
Ringer' (stérile)B.BraunPZN 01471434
logiciel MatlabMathWorks, Inc.
Medusa 4 canaux à faible empêchement. HeadstageTucker-Davis Technologies (TDT)RA4LI
Medusa Préampli/Numériseur 4 canauxTucker-Davis Technologies (TDT)RA4PA
MicrophonePCB Pieztronics378C01
Haut-parleur multi-champs - StéréoTucker-Davis Technologies (TDT)MF1-S
OscilloscopeTektronixDPO3012
Carte optique PC1 express pour interface Optibit)Tucker-Davis Systems (TDT)PO5e
Askina Braucel pads (tampons absorbants en cellulose)B.BraunPZN 8473637
PreamplifierPCB Pieztronics480C02
RZ6 Multi I/O Processor system (BioSigRZ)Tucker-Davis Technologies (TDT)RZ6-A-PI
0,9 % saline (NaCl, stérile)B. BraunPZN :8609255
logiciel SigGenRZTucker-Davis Technologies (TDT)https://www.tdt.com/
Software R (version 3.2.1) + Reshape 2 (version 1.4.1) + ggplot 2 (version 1.0.1) + datatable (version 1.9.4), + gdata (version 2.13.3), + pastecs (version 1.3.18), + waveslim (version 1.7.5), + MassSpecWavelet (version 1.30.0)The R Foundation, R Core Team 2015Open Source Software (distribuable gratuitement)
Cabine insonoriséeMed Associates Inc.ENV-018V
Pince à motif standard, 12cm et 14,5 cm de longueurFST11000-12, 11000-14
Ruban LeukosilkBSN medical GmbH & Co. KGPZN 00397109
Pince à tissus - 1x2 dents 12 cmFST11021-12
Uniprotect Armoire ventiléeBioscapeTHF3378
Armoire ventiléeTecniplast9AV125P
Xylazine (Rompun), 2 %Bayer Vital GmbHPZN 1320422
mesurehttps://de.mathworks.com/products/matlab.html

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Sporns, O., Tononi, G., Kotter, R. The human connectome: A structural description of the human brain. PLOS Computational Biology. 1 (4), e42(2005).
  2. Bebarova, M. Advances in patch clamp technique: towards higher quality and quantity. Ge....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Auditory Brainstem ResponseBrainstem Evoked Response AudiometryClick Tone Burst StimulationAutomated Wavelet AnalysisABR Threshold DetectionABR Latency AnalysisMouse Auditory ProfilingSound Attenuating CubicleSubdermal Electrode PlacementPre amplifier Calibration

Related Articles