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Article de méthode

Induction de l'échec ventriculaire droit par constriction pulmonaire d'artère et évaluation de la fonction ventriculaire droite chez les souris

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DOI :

10.3791/59431

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13 mai 2019

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Dans cet article

Résumé

Ici, nous fournissons une approche utile pour étudier le mécanisme de l'échec ventriculaire droit. Une approche plus pratique et plus efficace de la constriction d'artère pulmonaire est établie utilisant des instruments chirurgicaux faits en interne. En outre, des méthodes pour évaluer la qualité de cette approche par l'échocardiographie et le cathétérisation sont fournies.

Résumé

Le mécanisme de l'échec ventriculaire droit (RVF) exige la clarification due à l'unicité, à la morbidité élevée, à la mortalité élevée, et à la nature réfractaire de RVF. Des modèles précédents de rat imitant la progression de RVF ont été décrits. Par rapport aux rats, les souris sont plus accessibles, économiques et largement utilisées dans les expériences animales. Nous avons développé une approche de constriction d'artère pulmonaire (PAC) qui est composée de bander le tronc pulmonaire chez les souris pour induire l'hypertrophie ventriculaire droite (RV). Une aiguille de loquet chirurgicale spéciale a été conçue qui permet une séparation plus facile de l'aorte et du tronc pulmonaire. Dans nos expériences, l'utilisation de cette aiguille de loquet fabriquée a réduit le risque d'artériorrhexis et a amélioré le taux de réussite chirurgical à 90%. Nous avons utilisé différents diamètres d'aiguille de rembourrage pour créer précisément la constriction quantitative, qui peut induire différents degrés d'hypertrophie de RV. Nous avons quantifié le degré de constriction en évaluant la vitesse de flux sanguin de l'AP, qui a été mesurée par l'échocardiographie transthoracique non invasive. La fonction de RV a été précisément évaluée par le cathéterization droit de coeur à 8 semaines après chirurgie. Les instruments chirurgicaux fabriqués en interne étaient composés de matériaux communs en utilisant un processus simple qui est facile à maîtriser. Par conséquent, l'approche PAC décrite ici est facile à imiter à l'aide d'instruments fabriqués en laboratoire et peut être largement utilisée dans d'autres laboratoires. Cette étude présente une approche PAC modifiée qui a un taux de réussite plus élevé que les autres modèles et un taux de survie post-chirurgicale de 8 semaines de 97,8 %. Cette approche DE PAC fournit une technique utile pour étudier le mécanisme de la FVR et permettra une meilleure compréhension de la FVR.

Introduction

Le dysfonctionnement de RV (RVD), défini ici comme évidence d'une structure ou d'une fonction anormale de RV, est associé aux résultats cliniques pauvres. RVF, comme l'étape finale de la fonction de RV, est un syndrome clinique avec des signes et des symptômes de l'insuffisance cardiaque qui résultent du RVD progressif1. Avec des différences dans la structure et la fonction physiologique, l'échec ventriculaire gauche (LV) et rVF ont des mécanismes pathophysiologiques différents. Quelques mécanismes pathophysiologiques indépendants dans RVF ont été rapportés, y compris la surexpression du récepteur adrénergique de'2signal....

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Protocole

Toutes les procédures ont été effectuées conformément aux lignes directrices institutionnelles pour la recherche sur les animaux, qui sont conformes au Guide pour les soins et l'utilisation des animaux de laboratoire publié par les National Institutes of Health des États-Unis (PUBLICATION 85-23 des NIH, révisé en 1996). C57BL/6 souris mâles (8-10 semaines, pesant 20-25 g) ont été fournis par le Centre Animal de l'Université Médicale du Sud. Après l'arrivée, les souris ont été logées sous un cycle sombre/léger de 12/12 h, avec suffisamment de nourriture et d'eau.

1. Préparation des instruments chirurgicaux et fabrication des aiguilles

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Résultats

Dans cette étude, des souris ont été aléatoirement assignées au groupe PAC (n ' 9) ou au groupe d'opération fictif (n - 10). L'échocardiographie a été exécutée à 1, 4, et 8 semaines après la chirurgie. Huit semaines après chirurgie, suivant les dernières évaluations d'échocardiographie et de cathétérisme, les souris ont été euthanasiées, et leurs coeurs ont été moissonnés pour une évaluation morphologique et histologique.

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Discussion

Les augmentations pathologiques des pressions de remplissage de RV ont comme conséquence un décalage vers la gauche du septum, qui peut altérer la géométrie de LV21. Ces changements contribuent à la réduction de la production cardiaque et de la fraction d'éjection LV (LVEF), qui peut causer un trouble hémodynamique du système circulatoire22. Par conséquent, un modèle efficace, stable et économique pour étudier le mécanisme de la FVR est précieux.

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Remerciements

Ces travaux ont été soutenus par des subventions de la National Natural Science Foundation of China (81570464, 81770271; à M. Liao) et par les Projets de planification municipale de la technologie scientifique de Guangzhou (201804020083) (au Dr Liao).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Ventilateur ALC-V8SSHANGHAI  ; ALCOTT  ; BIOTECH  ; COALC-V8SVentilation assistée
Mini ventilateur pour animauxHaverdType 845Ventilation assistée
Système d’échographie pour animaux VEVO2100Visual Sonic  ; VEVO2100Échocardiographie
Illuminateur à lumière froideOlympusILD-2
Light Coussin chauffant - système chirurgical thermostatique (ALC-HTP-S1)SHANGHAI  ; ALCOTT  ; BIOTECH  ; COALC-HTP-S1Chauffage
IsofluraneRWD sciences de la vieR510-22Anesthésie par inhalation
Matrx VIP 3000 Vaporisateur d’isofuraneMidmark CorporationVIP 3000Anesthésie Suture
médicale en soie tressée (6-0)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.6-0
Ligation Suture médicale en nylon (5-0)Ningbo Medical Needle Co.5-0Suture
Cathéter Millaire (1.0 F)Instruments AD1.0FPour le cathétérisme cardiaque droit
Sel de sodium pentobarbitalMerck25MGAnesthésie
Système d’enregistrement physiologique multidirectionnel PowerLabInstruments AD4/35Enregistrer le résultat du cathétérisme cardiaque droit
Balance électronique de précisionInstrument DenverTB-114Capteur de pesage
verrouillage faite maisonSéparer l’aorte et le tronc pulmonaire
Aiguille de rembourrage faite maisonConstriction
Intubation trachéale faite maison Intubationtrachéale  ;
Matériel de microchirurgie pour petits animauxNapoxMA-65Instruments chirurgicaux
Transmission GelGuang Gong pai250MLÉchocardiographie
Crème dépilatoire VeetReckitt BenchiserRQ/B 33 Type 2Enlever les poils des souris
Stérilisateur à vapeur à pression électrothermique automatique verticalHefei Huatai Medical Equipment Co.LX-B50LNettoyage automatique des instruments chirurgicaux
Microscope vertical de chirurgie des petits animauxYihua Optical InstrumentY-HX-4APour le cathétérisme cardiaque droit
Aiguille de

Références

  1. Mehra, M. R., et al. Right heart failure: toward a common language. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 33, 123-126 (2014).
  2. Sun, F., et al.

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Réimpressions et autorisations

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