Modèle de Rabat Ostéomyocutané Hétérootopique modifié dans le rat pour la recherche d’allotransplantation composite vascularisée translationnelle

Résumé

L’allogreffe composite vascularisée offre des bienfaits qui altèrent la vie aux receveurs de greffe, mais les causes biologiques du rejet du greffon et de la vasculopathie demeurent mal comprises. Le modèle chirurgical des rongeurs présenté ici offre un modèle de transplantation reproductible, cliniquement pertinent, permettant aux chercheurs d’évaluer les événements de rejet et les stratégies thérapeutiques potentielles pour prévenir leur apparition.

Résumé

L’allotransplantation composite vascularisée (VCA) est un domaine relativement nouveau dans la chirurgie reconstructive. Les réalisations cliniques dans le VCA humain comprennent les greffes de la main et du visage et, plus récemment, la paroi abdominale, l’utérus et les greffes urogénitales. Les résultats fonctionnels ont dépassé les attentes initiales, et la plupart des bénéficiaires bénéficient d’une meilleure qualité de vie. Cependant, comme l’expérience clinique s’accumule, le rejet chronique et les complications de l’immunosuppression doivent être abordées. Dans de nombreux cas où les greffés ont échoué, la pathologie causal a été la vasculopathie ischémique. Les mécanismes biologiques du rejet aigu et chronique associés à l’evt, en particulier la vasculopathie ischémique, sont des domaines importants de la recherche. Cependant, en raison du très petit nombre de patients VCA, l’évaluation des mécanismes proposés est mieux abordée dans un modèle expérimental. Plusieurs groupes ont utilisé des modèles animaux pour répondre à certaines des questions non résolues pertinentes dans le rejet VCA et la vasculopathie. Plusieurs conceptions de modèles impliquant une variété d’espèces sont décrites dans la littérature. Nous présentons ici un modèle reproductible du volet ostéomyocutané du membre postérieur de VCA hétérootopique dans le rat qui peut être utilisé pour la recherche translationnelle de VCA. Ce modèle permet l’évaluation en série de la greffe, y compris les biopsies et les différentes modalités d’imagerie, tout en conservant un faible niveau de morbidité.

Introduction

La chirurgie reconstructive pour la perte de tissu catastrophique causée par l’amputation, les blessures par explosion, les tumeurs malignes et les malformations congénitales est limitée par la disponibilité des tissus du patient et la morbidité additionnelle provoquée sur le site du donneur. Dans certains cas, comme les victimes de brûlures ou les amputés quadrilatéraux, les tissus viables pour la reconstruction ne sont pas disponibles chez le patient. En 1964, la première transplantation de main moderne a été réalisée en Équateur. Bien qu’il s’agissait d’un succès technique, l’immunosuppression disponible à l’époque était insuffisante pour prévenir le rejet, et la g....

Protocole

Toutes les chirurgies animales ont été effectuées conformément aux protocoles approuvés par le Comité de soins et d’utilisation des animaux institutionnels de l’Université de Louisville (protocole 18198 approuvé par l’IACUC) et le guide des instituts nationaux de santé (NIH) pour le soin et l’utilisation des Animaux de laboratoire¹⁰. Mâle brun-Norvège de quatre mois (RT1. Aⁿ) et le mâle de 4 mois Lewis (RT1. A^l) les rats ont été utilisés comme donneurs et receveurs de VCA, respectivement.

1. récolte des allogreffes des donateurs

1. Séchez l’animal donneur à l’aide d’un isoflurane....

Résultats

Le modèle de Rabat ostéomyocutané du membre postérieur hétérootopique du rat VCA permet une survie à long terme de l’allogreffe sous immunosuppression. Le modèle est fiable, reproductible et simple à réaliser. Le rabat est bien caché dans la zone de l’aine et constitue une morbidité et un inconfort minimes pour l’animal. La présentation cutanée est une manifestation clinique de la survie et du rejet de l’allogreffe (figure 1). La conception des volets permet une surveillance clinique brute e.......

Discussion

Dans l’élaboration de ce modèle d’EVC, plusieurs questions clés ont été examinées. Premièrement, il était important d’inclure l’OS intact (tibia et péroné), la moelle osseuse et la peau dans la greffe. Bien que les greffes cliniques de mains de donneurs adultes ne transfèrent pas de quantités significatives de moelle hématopoïétique active, les études du rôle de la niche de la moelle osseuse sont mieux reflétées à l’aide d’un OS intact, vascularisé plutôt que d’un os long coupé, ce qui se traduit par fibrose de la moelle.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Acépromazine	Henry Schein	5700850
Adventitia Ciseaux	ASSI
Pince d’approximation (double)	ASSI	ABB2V, ABB22V
Pince d’approximation (simple)	FST	00398-02
Pince d’application	de pince ASSI  ;	CAF4
Ciseaux de dissection	ASSI	SDS18R8
Aiguille émoussée de rinçage 27 G	SAI
Héparine Sagent Sodique		25021-400-30
Isoflurane	Patterson Vétérinaire	14043-704-06
Bijoutiers Bipolaire	ASSI	103000BPS03
Pince de bijoutier #3	FST	11231-30
Kétamine HCl 100 mg/mL	Zoetis	043-304	Licence DEA requise
Solution de sonnerie lactée	Hospira	0409-7953-03
Solution de sonnerie lactée + 5 % de dextrose	Hospira	0409-7953-09
Meloxicam	Henry Schein	11695-6925-2
Micro-pince	ASSI  ;	JFAL3
Micro porte-aiguille	ASSI	B138
Prograf (Tacrolimus) 5 mg/mL	Suture Astellas	0469-3016-01
10-0 Prolene	Ethicon	W2790	ou 10-0 Ethilon (2830)
Suture, 4-0 Enduit Vicryl	Ethicon	J714D
Pince dilatatrice de vaisseau	ASSI	D5AZ
Xylazine	VetOne	13985-612-50

SAS15R8,