Biopsie et vitrification humaines de Blastocyst

Roberta Maggiulli; Adriano Giancani; Danilo Cimadomo; Filippo  M. Ubaldi; Laura Rienzi

doi:10.3791/59625

Article de méthode

Biopsie et vitrification humaines de Blastocyst

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DOI :

10.3791/59625

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26 juillet 2019

Roberta Maggiulli¹ , Adriano Giancani¹^,² , Danilo Cimadomo¹ , Filippo M. Ubaldi¹ , Laura Rienzi¹

¹G.EN.E.R.A. Centers for Reproductive Medicine, ²DAHFMO, Unit of Histology and Medical Embryology, Sapienza University of Rome

Dans cet article

Résumé

La biopsie et la vitrification de Blastocyst sont nécessaires pour mener efficacement le test génétique préimplantatoire. Une approche impliquant l'ouverture séquentielle de la pellucida de zona et la récupération de 7-8 cellules de trophectoderm dans le jour 5-7 post-insémination limite le nombre de manipulations exigées et l'exposition de l'embryon aux conditions environnementales sous-optimales.

Résumé

La biopsie de Blastocyst est effectuée pour obtenir un diagnostic génétique fiable pendant des cycles de FIV avec l'essai génétique préimplantatoire. Ensuite, le flux de travail idéal implique un protocole de vitrification sûr et efficace, en raison du délai d'exécution des techniques de diagnostic et de transférer l'embryon sélectionné sur un endomètre physiologique dans un cycle naturel suivant. Une approche de biopsie englobant l'ouverture séquentielle de la zona pellucida et la récupération de 5-10 cellules de trophectoderm (idéalement 7-8) limite le nombre de manipulations exigées et l'exposition de l'embryon aux conditions environnementales sous-optimales. Après une formation adéquate, la technique a été reproductible entre différents opérateurs en termes de synchronisation de la biopsie (8 min, allant de 3 à 22 min en fonction du nombre d'embryons à la biopsie par plat), diagnostics concluants obtenus (97,5%) et les taux de natalité vivante après le transfert de blastocyste euploïde vitrifié (40 %). Le taux de survie après biopsie, vitrification et réchauffement était aussi élevé que 99,8%. Le taux de réexpansion à 1,5 h du réchauffement était aussi élevé que 97%, en grande partie dépendant du moment entre la biopsie et la vitrification (idéalement 30 min), la qualité morphologique blastocyste et le jour de la biopsie. En général, il est préférable de vitrifier un blastocyste effondré; par conséquent, dans les cycles non-PGT, le rétrécissement artificiel laser-assisté pourrait être exécuté pour induire l'effondrement d'embryon avant la cryoconservation. La perspective future la plus prometteuse est l'analyse non invasive des médias de culture de FIV après la culture blastocyste comme source putative de l'ADN embryonnaire. Toutefois, cette avant-garde potentielle est toujours à l'étude et un protocole fiable doit encore être défini et validé.

Introduction

L'objectif principal de l'embryologie humaine moderne est de maximiser le nombre de naissances vivantes par cycle stimulé et de réduire les coûts, le temps et les efforts pour atteindre une grossesse. Pour atteindre cet objectif, des approches validées pour la sélection des embryons devraient être utilisées pour identifier les embryons compétents en matière de reproduction au sein d'une cohorte obtenue au cours d'un cycle de FIV. Selon les dernières preuves, la culture blastocyste¹ combinée à des tests chromosomiques complets et au transfert d'embryons euploïdes vitrifiés (ET) est le cadre le plus efficace pour augmenter l'efficacité de la FIV<....