Présenté ici est un protocole à l'aide d'un stade de microscope à température contrôlée qui permet à un récipient d'échantillon d'être monté sur un microscope vertical.
Article de méthode
Présenté ici est un protocole à l'aide d'un stade de microscope à température contrôlée qui permet à un récipient d'échantillon d'être monté sur un microscope vertical.
Les échantillons sont habituellement placés sur un stade de microscope horizontal pour l'observation microscopique. Cependant, pour observer l'influence de la gravité sur un échantillon ou étudier le comportement à flot, il est nécessaire de rendre le stade du microscope vertical. Pour ce faire, un microscope inversé sur le côté incliné par 90 degrés a été conçu. Pour observer les échantillons avec ce microscope, les contenants d'échantillon tels que la vaisselle Petri ou les lames de verre doivent être fixés à la scène verticalement. Un dispositif qui peut fixer des contenants d'échantillon en place sur une étape de microscope vertical a été développé et est décrit ici. L'attachement de ce dispositif à la scène permet l'observation de la dynamique de l'échantillon dans le plan vertical. La capacité de réguler la température à l'aide d'un chauffe-caoutchouc en silicone permet également d'observer les comportements de l'échantillon dépendant de la température. En outre, les données de température sont transférées à un serveur Internet. Les paramètres de température et la surveillance du journal peuvent être contrôlés à distance à partir d'un PC ou d'un smartphone.
La microscopie optique est une technique utilisée pour augmenter les détails observables par grossissement d'un échantillon avec des lentilles et de la lumière visible. Dans la microscopie optique, la lumière est dirigée sur un échantillon, puis transmise, réfléchie ou la lumière fluorescente est capturée par des lentilles grossissantes pour observation. Différents types de microscope sont disponibles qui diffèrent dans la conception pour accueillir différentes utilisations et méthodes d'observation. Les différentes conceptions incluent un microscope droit, qui est structuré pour éclairer un échantillon d'en bas pour l'observation d'en haut, et un microscope inversé, qui éclaire l'échantillon d'en haut pour l'observation d'en bas. Les microscopes droits sont la conception la plus commune et largement utilisée. Les microscopes inversés sont souvent utilisés pour observer des échantillons qui ne peuvent pas permettre à une lentille de se rapprocher à distance du dessus, comme les cellules cultivées adhérentes au fond d'un récipient. De nombreux groupes de recherche ont rapporté des observations dans un large éventail de champs à l'aide de microscopes inversés1,2,3,4,5,6,7. Beaucoup d'appareils supplémentaires ont également été développés qui tirent parti des caractéristiques des microscopes inversés8,9,10,11,12,13 .
Actuellement, dans toutes les conceptions conventionnelles de microscope, l'étape de microscope est horizontale et est donc impropre à l'observation des échantillons produisant le mouvement dans le plan vertical, (en raison de la gravité, de la flottabilité, du mouvement, etc.). Pour rendre ces observations possibles, l'étape du microscope et le chemin de lumière doivent être tournés vers la verticale. L'étape verticale est nécessaire pour monter verticalement des glissières en verre ou des récipients d'échantillon tels qu'un plat De Petri à la scène. Pour remédier à cette situation, un microscope inversé sur le côté incliné par 90 degrés a déjà été conçu. Cependant, attacher des échantillons avec du ruban adhésif ou d'autres adhésifs ne donne pas l'immobilité nécessaire à long terme. Décrit ici est un dispositif qui peut atteindre la stabilité nécessaire. Ce dispositif permet l'observation au fil du temps du mouvement de l'échantillon dans le plan vertical. Le montage d'un chauffe-caoutchouc en silicium a également permis d'observer l'influence de la variation de température sur le comportement de l'échantillon. Les données de température sont transférées sur un serveur Internet par Wi-Fi, et les paramètres de température et la surveillance du journal peuvent être contrôlés à distance à partir d'un PC ou d'un smartphone. À notre connaissance, la scène attachée à un microscope incliné latéralement incliné par 90 n'a pas encore été rapportée dans les études précédentes.
L'étape du microscope est composée de trois plaques d'aluminium. La plaque d'aluminium du milieu est montée sur la plaque inférieure en aluminium qui se fixe à la scène. Le caoutchouc de silicone contenant le capteur de température est fixé entre les plaques d'aluminium du milieu et du haut. Des bandes de caoutchouc sont utilisées pour apposer l'échantillon. Les griffes sont fixées dans les quatre points gauche et droit de la plaque supérieure en aluminium pour fixer les élastiques. Le circuit de commande du régulateur de température reçoit un signal du capteur de température intégré dans le caoutchouc de silicone et module l'énergie électrique par la méthode de modulation de largeur d'impulsion (PWM). La température peut être augmentée progressivement à 50 oC par incréments de 1 oC. Cet appareil est utile pour les applications dans lesquelles les mouvements d'échantillons verticaux peuvent dépendre de la température.
Ce rapport fournit des exemples d'effets de température sur le phénomène flottant des diatomées. À titre d'exemples d'études d'observation de la diatomée, des mesures de la vitesse de sédimentation des amas cellulaires, des analyses de mouvement, des études de structure ultrafine, etc. ont été rapportées14,15,16,17 , 18 ans, états-unis qui , 19 ans, états-unis qui , 20 Ans, états-unis , 21 Ans, états-unis , 22 Ans , 23. La gravité spécifique des diatomées flottant dans l'eau avec des organismes photosynthétiques est légèrement plus élevée que celle de l'eau, de sorte qu'elles ont tendance à couler; cependant, ils augmenteront si même une légère convection se produit. Pour étudier ce phénomène, une glissière de verre est apposée verticalement à un stade de microscope, et les effets de l'augmentation de la température sur le mouvement vertical de la diatomée sont observés.
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1. Conception
et
,
puis et avec des vis. Fixer
et avec des vis. Fixer
et
,
et
,
et
, et , et , et avec adhésif.2. Caractéristiques de conception de matériel
3. Contour de conception de logiciel
4. Configuration du système
5. Conception du microscope inversé sur le côté
6. Méthode de fonctionnement
REMARQUE : Ici, l'échantillon utilisé est un mélange de culture liquide bold Modified Modified Freshwater Nutrient Solution, de métasilice de sodium, de vitamines et d'eau stérile. 800 l de cet échantillon sont dilués dans 10 ml de milieu d'eau douce.
7. Mesure de la répartition de la température de surface du chauffe-caoutchouc
8. Test de réponse à la température
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La figure 2 montre la répartition de la température du chauffe-caoutchouc. La température de surface du chauffe-caoutchouc était uniforme à chaque température. La figure 3 montre la réactivité de la température mesurée pour définir les changements de température. La ligne orange indique la température de l'ensemble et la ligne bleue indique le changement de la température de l'échantillon. Le dépassement de la valeur mesurée à la...
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L'analyse de trajectoire des cellules de diatomée mobiles est une approche utile pour évaluer la motilité de diatomée. Cependant, bien qu'un microscope inversé normal observe des échantillons horizontalement, il ne convient pas aux observations de l'influence de la gravité ou du mouvement flottant dans la direction verticale. Développé et décrit ici est une étape de microscope vertical avec le contrôle de la température et attaché à un microscope inversé, qui a été tourné par 90 degrés. Cette étape de microscope avec le ...
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Adaptateur secteur 12V2A | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | AD-D120P200 | Tokyo, Japon |
| ADS1015 Substrat | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | adafruit RÉF. DU PRODUIT : 1083 | Tokyo, Japon |
| Plaque d’alminium (plaque latérale arrière) | Inoval Co., Ltd. | W 150mm&fois ; L 200° T 1.5mm | Gifu, Japon |
| Plaque d’alminium (plaque avant) | Inoval Co., Ltd. | W 150mm&fois ; L 200° T 2mm | Gifu, Japon |
| Plaque d’alminium (plaque inférieure centrale) | Inoval Co., Ltd. | W 150mm&fois ; L 200° T 4mm | Gifu, Japon |
| Plaque d’alminium (plaque supérieure centrale) | Inoval Co., Ltd. | W 150mm&fois ; L 200° T 5mm | Gifu, Japon |
| Piédestal en aluminium (plaque inférieure) | Inoval Co., Ltd. | D 100mm&fois ; T 3 mm (30&Phi ;) | Gifu, Japon |
| Piédestal en aluminium (plaque supérieure) | Inoval Co., Ltd. | D 100mm&fois ; T 3 mm (30&Phi ;) | Gifu, Japon |
| Solution nutritive basale d’eau douce modifiée audacieuse | Sigma-Aldrich Co. LLC | B5282-500ML | St. Louis, États-Unis |
| Boîtier de manœuvre | Marutsu Elec Co., Ltd. | pff-13-3-9 | Tokyo, Japon |
| Processeur | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | ESP-WROOM-02D | Tokyo, Japon |
| Microscope inversé | Olympus Corporation | CKX 53 | Tokyo, Japon |
| Adhésif à base de résine époxy durcissant à basse température | ThreeBond Co., Ltd. | TB2086M | Tokyo, Japon |
| Volume semi-fixe multitours Vertical type 500 & Omega ; | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | 3296W-1-501LF | Tokyo, Japon |
| Module OLED | Akihabara Inc. | M096P4W | Tokyo, Japon |
| Liège pressé (pour l’électrode de support) | Tera Co., Ltd. | W 42mm&fois ; L 30 ? | Ishikawa, Japon |
| Liège pressé (disque inférieur) | Tera Co., Ltd. | D 100mm&fois ; T 0,5 mm (20&Phi ;) | Ishikawa, Japon |
| Liège pressé (disque supérieur) | Tera Co., Ltd. | D 100mm&fois ; T 2,5 mm (20&Phi ;) | Ishikawa, Japon |
| Codeur rotatif avec interrupteur avec LED 2 couleurs | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | P-05772 | Tokyo, Japon |
| Chauffage en caoutchouc de silicone | Three High Co., Ltd. | D 100mm&fois ; T 2,5 mm (20&Phi ;) | Kanagawa, Japon |
| Substrat | Seeed Technology Co., Ltd. | mh5.0 | Shenzhen, Chine |
| Capteur de température | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | NXFT15XH103FA2B050 | Tokyo, Japon |
| Régulateur DC / DC à trois bornes 3,3 V | Marutsu Elec Co., Ltd. | BR301 | Tokyo, Japon |
| Bras flexible universel | Banggood Technology Co., Ltd. | YP-003-2 | Hong Kong, Chine |
| Câble USB USB-A - MicroUSB | Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd. | CÂBLE USB A-MICROB | Tokyo, Japon |
| Vidéo Canera | Sony Corporation | HDR-CX590 | Tokyo, Japon |
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