Étude du remodelage inverse ventriculaire gauche par débandage aortique chez les rongeurs

Résumé

Ici nous décrivons un protocole étape par étape d’aorte chirurgicale débandant dans le modèle bien établi de souris de l’aortique-constriction. Ce procédé permet non seulement d’étudier les mécanismes à la base de la retouche et de la régression inverses ventriculaires gauches de l’hypertrophie mais également d’essayer les options thérapeutiques originales qui pourraient accélérer le rétablissement myocardique.

Résumé

Pour mieux comprendre le remodelage inverse ventriculaire gauche (BT) (RR), nous décrivons un modèle de rongeur dans lequel, après le remodelage causé par bande aortique de BT, les souris subissent le RR sur le déplacement de la constriction aortique. En ce document, nous décrivons un procédé étape par étape pour exécuter un debanding aortique chirurgical d’une façon minimum invahissant chez les souris. L’échocardiographie a été plus tard employée pour évaluer le degré d’hypertrophie et de dysfonctionnement cardiaques pendant la retouche de LV et le rr et pour déterminer le meilleur moment pour le debanding aortique. À la fin du protocole, l’évaluation hémodynamique terminale de la fonction cardiaque a été conduite, et des échantillons ont été rassemblés pour des études histologiques. Nous avons prouvé que le debanding est associé aux taux de survie chirurgicaux de 70-80%. De plus, deux semaines après le débandage, la réduction significative de l’afterload ventriculaire déclenche la régression de l’hypertrophie ventriculaire (~20%) et la fibrose (~ 26%), la récupération du dysfonctionnement diastolique tel qu’évalué par la normalisation du remplissage ventriculaire gauche et des pressions fin-diastoliques (E / e ' et LVEDP). La débandage aortique est un modèle expérimental utile pour étudier le LV RR chez les rongeurs. L’ampleur du rétablissement myocardique est variable entre les sujets, donc, imitant la diversité du RR qui se produit dans le contexte clinique, tel que le remplacement de valve aortique. Nous concluons que le modèle aortique de bande/debanding représente un outil valable pour démêler les perspicacités originales dans les mécanismes du rr, à savoir la régression de l’hypertrophie cardiaque et le rétablissement du dysfonctionnement diastolique.

Introduction

La constriction de l’aorte transversale ou ascendante chez la souris est un modèle expérimental largement utilisé pour l’hypertrophie cardiaque induite par la surcharge de pression, le dysfonctionnement diastolique et systolique et l’insuffisance cardiaque^1,2,3,4. L’aortique-constriction conduit initialement à une hypertrophie concentrique compensée du ventricule gauche (LY) pour normaliser le stress mural^1. Cependant, dans certaines circonstances, telles qu’une surcharge cardiaque prolongée, cette hypertrophie est in....

Protocole

Toutes les expérimentations animales sont conformes au Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire (publication des NIH n° 85–23, révisée en 2011) et à la loi portugaise sur le bien-être des animaux (DL 129/92, DL 197/96; P 1131/97). Les autorités locales compétentes ont approuvé ce protocole expérimental (018833). Des souris mâles C57B1/J6 âgées de sept semaines ont été maintenues dans des cages appropriées, avec un environnement régulier de cycle clair-foncé de 12/12 h, une température de 22 °C et une humidité de 60 % avec accès à l’eau et un régime alimentaire standard ad libitum.

1. Préparation du champ chirurgical

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Résultats

Survie postopératoire et tardive
La survie perioperative du procédé de bande est de 80% et la mortalité pendant le premier mois est typiquement <20%. Comme mentionné précédemment, le succès de la chirurgie de debanding dépend fortement de la façon dont la chirurgie précédente était invahissante. Après une courbe d’apprentissage, le taux de mortalité pendant les procédures de débandage est d’environ 25%. Pour cela, la mortalité explique principalement les décès au cours de la procédure chirurgicale,.......

Discussion

Le modèle proposé ici imite le processus de remodelage LV et rr après bande aortique et debanding, respectivement. Par conséquent, il représente un excellent modèle expérimental pour avancer notre connaissance sur les mécanismes moléculaires impliqués dans le remodelage défavorable de LV et pour tester des stratégies thérapeutiques originales capables d’induire le rétablissement myocardique de ces patients. Ce protocole détaille des étapes sur la façon dont créer un modèle animal de rongeur de bande et de débanding aorti.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Lances d’absorption	F.S.T	18105-03	Pour absorber les fluides pendant la chirurgie
Lames	F.S.T	10011-00	Pour effectuer l’incision cutanée
Buprénorphine	Buprelieve		Analgésie
médicament Catutery	F.S.T	18010-00	Pour prévenir l’exsanguination
Embouts Catuter	F.S.T	18010-01	Pour prévenir exsanguination
coton-tige	Johnson’s		Pour absorber les fluides pendant l’intervention
Crème dépilatoire	Veet		Pour déliper l’animal
Housse de table jetable pour salle	d’opération MEDKINE	DYND4030SB	Pour couvrir la zone chirurgicale
Sonde d’écho	Siemens	Sequoia 15L8W	Acquisition du signal échographique
Échocardiographe	Siemens	Acuson Sequoia C512	Acquisition du signal par ultrasons Moniteur
CO2 de fin d’expiration	Kent Scientific	CapnoStat	Pour contrôler la saturation des gaz d’expiration
Forcep/Pince à épiler	F.S.T	11255-20	Pour disséquer les tissus et l’aorte
Pince/Pince à épiler	F.S.T	11272-30	Pour disséquer les tissus et l’aorte
Pince/Pince à épiler	F.S.T	11151-10	Pour disséquer les tissus et l’aorte
Pinces/Pinces à épiler	F.S.T	11152-10	Pour disséquer les tissus et l’aorte
Système gazeux	Penlon Sigma Delta		Pour l’anesthésie et la ventilation mécanique
Hémostases	F.S.T	13010-12	Pour tenir la suture avant de resserrer l’aorte
Hémostatiques	F.S.T	13011-12	Pour maintenir la suture avant de serrer l’aorte
ligature	F.S.T	18062-12	Pour placer une suture autour de l’aorte
Écarteur magnétique	F.S.T	18200-20	Pour aider à maintenir l’animal dans une bonne position
Porte-aiguille	F.S.T	12503-15	Pour suturer l’animal
Aiguille 26G	B-BRAUN		Pour servir de molécule de diamètre de constriction aortique
Oxygène	Air Liquide		Pour l’anesthésie et la ventilation mécanique
Suture du polipropilene	Vycril	W8304/W8597	Pour suturer l’animal et faire la constriction
de povidone iodée	Betadine® ; Antiseptique		Skin
PowerLab	Millar instruments	ML880 PowerLab 16/30	Boucle PV Signal Aquisition
Oxymètre de pouls	Kent Scientific	MouseStat	Pour contrôler la fréquence cardiaque et la saturation sanguine
Logiciel PVAN	Millar Instruments		Pour analyser les données hémodynamiques
Boucle PV Cathether	Millar instruments	SPR-1035. 1.4 F	PV loop Signal Aquisition
Retractor	F.S.T	17000-01	Pour donner une meilleure vue d’ensemble de l’aorte
Poignée du scalpet	F.S.T	10003-12	Pour effectuer l’incision cutanée
Ciseaux	F.S.T	15070-08	Pour couper la suture dans la chirurgie de débauchage
Ciseaux	F.S.T	14084-09	Pour couper d’autres matériaux pendant la chirurgie, par exemple la suture, papper
Sevoflurane	Baxter	533-CA2L9117
Module de contrôle de la température	Kent Scientific	RightTemp	Pour contrôler la température corporelle animale
Ventilateur	Kent Scientific	PhysioSuite	Pour ventiler l’animal
Bain-marie	Thermo Scientific&trade ;	TSGP02	Pour maintenir une température de l’eau adéquate pour chauffer les câbles de la boucle P-V