Essai sur place légère pour l'analyse de Drosophila Larval Phototaxis

Résumé

Ce protocole introduit un essai de tache de lumière pour étudier le comportement phototactic larvaire de Drosophila. Dans cet analyse, un point lumineux est généré sous forme de stimulation lumineuse, et le processus d'évitement de la lumière larvaire est enregistré par un système d'imagerie infrarouge à base de lumière.

Résumé

Les larves de Drosophila melanogaster montrent un comportement évident d'évitement de la lumière pendant le stade de la recherche de nourriture. Drosophila larval phototaxis peut être utilisé comme un modèle pour étudier le comportement d'évitement des animaux. Ce protocole introduit un essai de tache de lumière pour étudier le comportement phototactic larvaire. La configuration expérimentale comprend deux parties principales : un système de stimulation visuelle qui génère la tache lumineuse, et un système d'imagerie infrarouge basé sur la lumière qui enregistre le processus d'évitement de la lumière larvaire. Cet analyse permet de suivre le comportement de la larve avant d'entrer, lors de la rencontre, et après avoir quitté la tache lumineuse. Les détails du mouvement larvaire, y compris la décélération, la pause, le moulage de la tête et le virage, peuvent être capturés et analysés à l'aide de cette méthode.

Introduction

Les larves de Drosophila melanogaster montrent un comportement évident d'évitement de la lumière pendant le stade de la recherche de nourriture. Drosophila larval phototaxis a fait l'objet d'une enquête, en particulier dans les 50 dernières années^1,2,3,4,5,6^{,7 ,8}. Ces dernières années, malgré le fait que 1) de nombreux neurones médiateurs de l'évitement de la lumière larvaire ont été i....

Protocole

1. Préparation des larves de Drosophila

1. Préparer le milieu standard composé de farine de maïs bouillie (73 g), d'agar (5,6 g), de farine de soja (10 g), de levure (17,3 g), de sirop (76 ml) et d'eau (1000 ml).
2. Soulevez toutes les mouches à 25 oC sur le milieu standard dans une pièce avec un cycle clair/foncé de 12 h/12 h.

2. Préparation des plaques d'agar

1. Préparer une solution d'agar de 1,0 %. Peser 3 g d'agar dans un bécher de 500 ml avec un solde, puis ajouter 300 ml d'eau distillée. Placer un papier d'aluminium sur le disjoncteur pour empêcher l'eau de s'évaporer. Chauffer le bécher au micro-o....

Résultats

Selon le protocole, l'analyse de tache lumineuse a été employée pour étudier le comportement d'évitement de lumière de la troisième larve d'étoile qui ont été soulevées à 25 oC sur le milieu standard dans une pièce avec un cycle de lumière/obscurité de 12 h/12 h. Une seule larve w¹¹¹⁸ a été testée à l'aide de l'analyse de la tache lumineuse à 25,5 oC. L'intensité lumineuse moyenne de la tache lumineuse générée par une LED de 460 nm était de 0,59 W/cm². L'ensemble du processus d'entrée et d.......

Discussion

Ce protocole présente l'analyse des points lumineux pour tester la capacité des larves de Drosophila à s'échapper de la lumière. Cet analyse permet de suivre le comportement des larves avant d'entrer, lors de la rencontre et après avoir quitté un point lumineux. Les détails du mouvement larvaire peuvent être capturés et analysés. L'argument de la tache lumineuse est très simple et possède une forte praticabilité. Le coût de l'ensemble de l'appareil n'est pas élevé. Dans l'expérience, la lumière LED est utilisée .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
LED génératrices de lumière infrarouge 850 nm ± ; 3 nm	Thorlabs, USA	PM100A	Capteurs compatibles : photodiodes et thermique Plage de puissance optique : 100 pW à 200 W Gamme de longueurs d’onde du capteur disponible : 185 nm-25 &mu ; m Taux de rafraîchissement de l’affichage : 20 Hz Bande passante : DC-100 kHz Plage du capteur de photodiodeb : 50 nA-5 mA Plage du capteur de thermopileb : 1 mV-1 V
convertisseur AC vers DC	Thorlabs, USA	S120VC	Taille de l’ouverture : Ø ; 9,5 mm Gamme de longueurs d’onde : 200-1100 nm Plage de puissance : 50 nW-50 mW Type de détecteur : Photodiode Si (UV étendue) Linéarité : ± ; 0,5 % Incertitude de mesurec : ± ; 3 % (440 à 980 nm), ± ; 5 % (280-439 nm), ± ; Filtre passe-bande 7 % (200-279 nm, 981-1100 nm)
	Thorlabs, USA	DC2100	Plage de courant des LED : 0-2 A Résolution du courant des LED : 1 mA Précision du courant des LED : ± ; LED 20 mA Tension directe : 24 V Modulation Gamme de fréquences : 0-100 kHz Onde sinusoïdale Modulation :
Lumière bleue LED collimatée arbitrairenbsp ;	ELP, Chine	USBFHD01M	Résolution max. : 1920X1080 F6.0 mm Capteur : 1/2.7" CMOS OV2710
Console compacte de mesure de puissance  ;	Ocean Optics, États-Unis	USB2000+(RAD)	Dimensions : 89,1 mm x 63,3 mm x 34,4 mm Poids : 190 g Détecteur : Sony ILX511B (réseau CCD linéaire en silicium de 2048 éléments) Gamme de longueurs d’onde : 200-850 nm Temps d’intégration : 1 ms < 65 secondes (20 secondes typiques)br/> Plage dynamique : 8,5 x 10^7 (système) ; 1300:1 pour une acquisition unique Rapport signal/bruit : 250:1 (signal complet) Bruit sombre : 50 comptes RMS Réseau : 2 (250 &ndash ; 800 nm) Fente : SLIT-50 Lentille de collecte du détecteur : L2 Tri des commandes : OFLV-200-850 Résolution optique : ~2,0 nm FWHM Lumière parasite : < 0,05 % à 600 nm ; < 0,10 % à 435 nm Connecteur à fibre optique : SMA 905 à 0,22 Fibre monobrin à ouverture numérique
Pilote LED haute puissance	Minhongshi, Chine	MHS-48XY	Tension de fonctionnement : DC12V Longueur d’onde centrale : Caméra
Web haute résolution 850nm	Thorlabs, États-Unis	MWWHL4	Couleur : Blanc chaud Température de couleur corrélée : 3000 K Courant de test pour une puissance LED typique : 1000 mA Courant maximal (CW) : 1000 mA Bande passante (FWHM) : N/A Puissance électrique : 3000 mW Angle de vision (plein angle) : 120 ? Taille de l’émetteur : 1 mm x 1 mm Durée de vie typique : >50 000 h Température de fonctionnement (sans condensation) : 0 à 40 ° ; C Température de stockage : -40 à 70 °C C Groupe de risquea : RG1 &ndash ; Groupe à faible risque
LED blanc chaud	Mega-9, Chine	BP850 / 22K	et Oslash ; 25.4(+0~-0.1) mm Bande passante : 22± ; 3nm Transmittance de crête : 80 % Longueur d’onde centrale : 850nm± ; 3 nm  ;
Spectromètre  ;	Noël Danjou	Amcap9.22	AMCap  ; est une application de capture d’images fixes et vidéo avec des fonctionnalités avancées de prévisualisation et d’enregistrement. Il s’agit d’une application de bureau conçue pour les ordinateurs exécutant Windows 7 SP1 ou une version ultérieure. La plupart  ; Vidéo-pour-Windowset  ; Les appareils compatibles DirectShow sont pris en charge, qu’il s’agisse de webcams bon marché ou de cartes de capture vidéo avancées.
Capteur de puissance à photodiode standard  ;	Super Dragon, Chine	YGY-122000	Entrée : AC 100-240V ~ 50 / 60Hz 0.8A Sortie : DC 12V 2A
Capteur de puissance thermique  ;	Thorlabs, USA	M470L3-C1	Couleur : Bleu Longueur d’onde nominale : 470 nm Bande passante (FWHM) : 25 nm Courant maximum (CW) : 1000 mA Tension directe : 3,2 V Puissance électrique (max) : 3200 mW Taille de l’émetteur : 1 mm x 1 mm Durée de vie typique : 100 000 h Température de fonctionnement (sans condensation) : 0 à 40 ° ; C Température de stockage : -40 à 70 °C C Groupe de risqueb : GR2 &ndash ; Groupe de risque modéré
Capteur de puissance thermique  ;	Thorlabs, États-Unis	S401C	Gamme de longueurs d’onde : 190 nm-20 &mu ; m Plage de puissance optique : 10 &mu ; W-1 W(3 Wb) Taille de l’ouverture d’entrée : Ø ; 10 mm Zone active du détecteur : 10 mm x 10 mm Densité de puissance optique maximale : 500 W/cm2 (Moy.) Linéarité : ± ; 0,5 %