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Article de méthode

Une approche chirurgicale révisée pour induire des hydrops endolymphatiques dans le cochon de Guinée

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DOI :

10.3791/60597

4 juin 2020

Dans cet article

Résumé

Cet article démontre une approche extradurale pour effacer le sac endolymphatique de cobaye et blesser le conduit endolymphatique avec un pic fin afin d’induire des hydrops endolymphatiques expérimentaux.

Résumé

Les hydrops endolymphatiques sont un élargissement des médias scala qui est le plus souvent associé à la maladie de Meniere, bien que le mécanisme pathophysiologic(s) reste peu clair. Afin d’étudier adéquatement les attributs des hydropes endolymphatiques, tels que les origines de la perte auditive à basse fréquence, un modèle fiable est nécessaire. Le cobaye est un bon modèle parce qu’il entend dans les régions à basse fréquence qui sont putativement touchés par les hydrops endolymphatiques. Des recherches antérieures ont démontré que les hydrops endolymphatiques peuvent être induits chirurgicalement par des approches intradurales ou extradurales qui impliquent le forage sur le conduit et le sac endolymphatiques. Cependant, s’il était possible de créer un modèle d’hydrops endolymphatique utilisant une approche extradurale qui a évité le forage dangereux sur le conduit et le sac endolymphatiques était inconnu. L’objectif de cette étude était de démontrer une approche extradurale révisée pour induire des hydrops endolymphatiques expérimentaux à 30 jours post-opératoirement en effaçant le sac endolymphatique et en blessant le conduit endolymphatique avec une belle pioche. La taille de l’échantillon se composait de sept cobayes. Des mesures fonctionnelles de l’ouïe ont été faites et des os temporels ont été plus tard récoltés pour l’analyse histologic. L’approche a eu un taux de réussite de 86% dans la réalisation des hydrops endolymphatiques. Le risque de fuite de liquide rébrospinal était minime. Aucun décès ou blessure périopératoire au canal semi-circulaire postérieur ne s’est produit dans l’échantillon. La méthode présentée démontre un moyen sûr et fiable d’induire des hydrops endolymphatiques à un point de temps relativement rapide de 30 jours. Les implications cliniques sont que la méthode présentée fournit un modèle fiable pour explorer davantage les origines de la perte auditive à basse fréquence qui peut être associée hydrops endolymphatiques.

Introduction

Les hydrops endolymphatiques sont un élargissement des médias scala. La présence d’hydrops endolymphatiques peut être mesurée à l’aide de la zone transversale des médias scala. On pense que les hydrops endolymphatiques cliniques peuvent être associés à la perte d’audition neurosensorielle à basse fréquence, comme celle vue dans La maladie de Meniere. Mais l’origine de la perte auditive reste incertaine. Pour étudier adéquatement les origines de la perte auditive à basse fréquence associée aux hydrops endolymphatiques, un modèle fiable est nécessaire.

En 1965, Kimura et Schuknecht ont décrit comment induire des hydrops endolymphatiques dans ....

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Protocole

Toutes les procédures énumérées immédiatement ci-dessous dans la section du Protocole ont été menées comme décrit dans les protocoles approuvés par l’Université de Washington à St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee.

1. Induction anesthésique et surveillance des signes vitaux

REMARQUE: Cette étude a utilisé des cobayes pigmentés à souche NIH obtenus d’une colonie de reproduction interne.

  1. Utilisez des cobayes de l’un ou l’autre sexe, pesant au moins 350 g.
  2. Placer le cobaye dans une isolette néonatale et donner un mélange de kétamine/xylazine intraperitoneally (50....

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Résultats

La méthode présentée a employé une approche extradurale pour effacer le sac endolymphatique et blesser le conduit endolymphatique avec une pioche fine dans sept cobayes composées de deux mâles et cinq femelles. La durée moyenne de la chirurgie était de 2 heures de l’incision à la fermeture. Le temps total de forage variait de 5 à 10 minutes. Jusqu’à 4 heures ont été nécessaires pour que le cobaye émerge entièrement de l’anesthésie. Il n’y a pas eu de décès intraopératoires ou postopératoi.......

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Discussion

La méthode extradurale présentée a eu un taux de réussite de 86% en réalisant des hydrops endolymphatiques confirmés histologically et la perte auditive à basse fréquence. La méthode a réalisé de façon fiable des preuves histologiques des hydrops endolymphatiques par le jour postopératoire 30, compatible avec des études antérieures qui ont employé une approche intradurale2. L’importance de la méthode par rapport aux méthodes existantes est qu’une fuite de FSC n’est pas nécessaire, éliminant ainsi .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Nous remercions Shannon M. Lefler pour l’aide aux chiffres et à la Table des matériaux. Les recherches rapportées dans cette publication ont été soutenues par le National Institute of Deafness and Other Communication Disorders au sein des National Institutes of Health, grâce à la subvention de formation « Développement des cliniciens/chercheurs en ORL académique », numéro de prix T32DC000022 (C.V.V.) et par R01 DC014997 (J.T.L). Le contenu est uniquement la responsabilité des auteurs et ne représente pas nécessairement les vues officielles des National Institutes of Health.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Seringue de 12 mLHenke-Sass Loup5100-X00V0
Seringue de 1 mL et 3 mLBD Précision (Commandé chez Fischer Sci)14-826-87 15859152
Aiguille papillon 27,5Ensemble d’infusion ailé Terumo Surflo, Terumo Corporation, Japon) (commandé chez McKesson)448407
Suture 4-0McKesson1034507
4 x 4 éponges en gazeDukal (Forme ordonnée : McKesson)374454
Seringue de 60 mLFisher Sci22-031-375
Foret otologique d’AnspachAnspachSC2100
AtipamezoleZoetis107204-6
AutoclaveSciences de Fisher15-103-0508
Sacs d’autoclaveMcKesson524881
Séparateur à baïonnetteOlympeAL 130564
bupivicaineauro Medics Pharma555150-169-10
Drapé stérile transparent3M1020
boules de cotonFisherbrand (commandé chez Fisher Sci)22-456-885
Coton-tige-cotonMcKesson508716
meules diamantées #3, #2, #1 et #0,5 mmAnspachQD8-3SD ; QD8-2SD ; QD8-1SD ; QD8-05SD
Serviette couchetteMcKesson945330
Lame jetable 15Swann-Morton0305
enrofloxacineHospira0409-4888-01
épinéphrineMcKesson63739-0456
Pommade oculaireProduits Dechra Vet17033-211-38
Élévateur plus libreGrace Medical215100FX
GelfoamPfizer (Commandé chez McKesson)82830
Tondeuses à cheveuxOster Power Pro sans fil (commandé sur Amazon)078400-020-000
Gommage d’iodePurdue Pharma (commandé chez mcKesson)521243
ciseaux irisOlympeCL-542114
KétamineHenry Schein Santé Animale55853
Ringers lactésB. Braun Medical (commandé à McKesson)186662
Couteau lancetier par RosenGrace Medical151100FXDésignée sous le nom de curette dans le texte
lubrifiantMilex (commandé chez Cooper Surgical)MX5030
ruban de masquage3M (commandé à Fisher Sci19047259
Bassin rectangulaire métalliqueAmazonB07NQDBC6T
Porte-aiguillesOlympeCR 213015-ENT
aiguilles : calibre 27, calibre 18BD Précision (Commandé chez Fischer Sci)14-826-48 14-826-5D
Isolette de réchauffement néonatalSystèmes de soutien vital aéroporté731-1800
Microscope opératoireCarl ZeissOPMI pico
Bouteille d’oxygèneAirGasOX USP200
Saturation de poulsCapnoTrue (commandé chez Medacx)M-3090112001
Sonde rectale avec couverture chauffanteAppareil de HarvardSonde : PY2 50-7217 Couverture chauffante : PY2 50-7214
Porte-corps rougeLaboratoire LichtenhanN/AProduit interne
angle droitOlympeBV-230337
aiguille de rosenOlympeAM-130566personnalisé, c’est l’instrument que j’utilise pour déchirer le sac
Tubes en caoutchouc pour l’administration O2Fisher Sci14-171-104
film plastiqueFisher SciNC9617977
Porte-tête stéréotaxiqueAtelier d’usinage d’instruments WUSTLN/AProduit interne
Rideaux stérilesSanté Cardinale7553
tube d’aspiration par BaronGrace Medical034903FX 034905FX#3 et #5 Aspiration
Pinces tissulaires Adson BrownGrace Medical325112FX
Rétracteur WeitlanderOlympus Grace MedicalBL200011 100313FX
XylazineAkorn59399-110-20

Références

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J.

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Mod le de cobayeapproche extraduraleoblit ration du sac endolymphatiquel sion du conduit endolymphatiqueanalyse histologiquemesure de la perte auditivefuite de liquide c phalorachidiencanal semi circulaire post rieurlargissement de la scala media