Ce protocole décrit une méthode commune et faisable d’induire des lésions hépatiques aigues (ALI) par l’intermédiaire de l’exposition CC4 par un tube orogastricrique. L’exposition CC4 induit l’ALI par la formation d’espèces réactives d’oxygène pendant sa biotransformation dans le foie. Cette méthode est utilisée pour analyser la pathophysiologie d’ALI et examiner différentes stratégies hépatoprotectives.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
Induire des lésions hépatiques aigues chez les rats via le tétrachlorure de carbone (CCl4) Exposition par un tube orogastricrique
* These authors contributed equally
Dans cet article
Résumé
Résumé
Les lésions hépatiques aigues (ALI) jouent un rôle crucial dans le développement de l’échec hépatique, qui se caractérise par un grave dysfonctionnement hépatique comprenant des complications telles que l’encéphalopathie hépatique et une synthèse altérée des protéines. Les modèles animaux appropriés sont essentiels pour tester le mécanisme et la pathophysiologie de l’ALI et étudier différentes stratégies hépatoprotectrices. En raison de sa capacité à effectuer des transformations chimiques, le tétrachlorure de carbone (CCl4) est largement utilisé dans le foie pour induire ALI par la formation d’espèces réactives d’oxygène. L’exposition CC4 peut être effectuée par inhalation, ou par un tube nasogastrique ou orogastricrique. Ici, nous décrivons un modèle de rongeur, dans lequel ALI est induit par l’exposition CCl4 par un tube orogastricrique. Cette méthode est peu coûteuse, facile à exécuter, et a un risque minimal. Le modèle est hautement reproductible et peut être largement utilisé pour déterminer l’efficacité des stratégies hépatoprotective potentielles et évaluer les marqueurs des lésions hépatiques.
Introduction
La fréquence des insultes toxiques au foie, en particulier en raison de l’abus d’alcool et de drogues, augmente. Les lésions hépatiques aigues (ALI) sont associées à des taux de mortalité élevés et ont causé des préoccupations cliniques1,2. Les dommages toxiques mènent aux voies de signalisation de mort dans le foie, ayant comme conséquence l’apoptosis d’hépatocyte, la nécrose, ou la pyroptose. ALI joue un rôle crucial dans le développement de l’échec hépatique, qui se caractérise par un dysfonctionnement hépatique grave, y compris des complications telles que l’encéphalopathie hépatique et la synthèse des pro....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Protocole
Les expériences ont été menées conformément aux recommandations des Déclarations d’Helsinki et de Tokyo et aux Lignes directrices pour l’utilisation des animaux expérimentaux de la Communauté européenne. Les expériences ont été approuvées par le Comité de soins aux animaux de l’Université Ben-Gourion du Néguev.
REMARQUE : Le modèle CC4 a été généré et utilisé dans une étude précédente17. Le calendrier du protocole est démontré dans le tableau 1.
1. Préparation des rats à la procédure expérimentale
REMARQUE : Sélectionnez des rats Spragu....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Résultats
Les niveaux de tuberculose, de GOT et de TPG ont considérablement augmenté de 24 h après avoir incité l’ALI (plus à des doses plus élevées de CC4) par rapport aux contrôles truqués (p’lt; 0,001)(figure 1). Les niveaux de tuberculose, de GOT et de TPG à la ligne de base étaient normaux et n’étaient pas significativement différents des contrôles truqués. À 24 h, les trois groupes d’intervention, 1 ml/kg CCl4 (1, 1 à 2), 2,5 ml/kg CC4 (3, 3 à 4), et 5 mL/kg CCl<.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
Dans ce protocole, CCl4 est utilisé comme une toxine hépatique pour induire ALI chez les rats. ALI est caractérisé par la perte de parenchyme hépatique et la dysrégulation subséquente des fonctions métaboliques et synthétiques du foie. Les médicaments, les virus, les toxines, les maladies auto-immunes, les maladies métaboliques et les troubles vasculaires induisent tous la mort hépatocyte, et la réponse inflammatoire suivante contribue à la pathogénie d’ALI.
L’insulte initiale au fo.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Les auteurs remercient Bertha Delgado, Département de pathologie, Centre médical de Soroka, Faculté des sciences de la santé, Université Ben Gourion du Néguev, pour son aide en laboratoire ainsi que dans l’analyse histologique.
....Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Cathéter 22 G BD Neoflon TM | Becton Dickinson Infusion Therapy AB | ||
| Solution de formaldéhyde tamponnée à 4 % | Sigma - Aldrich lab materials technologies | ||
| BD Microtainer SST TM Tubes | Becton Dickinson and Company | ||
| Carbone tetrachloride | Sigma - Aldrich lab materials technologies | CAS 56-23-5 | |
| Isofluran, USP 100 % | Piramamal Critical Care, Inc | ||
| Olympus AU2700 Chemistry-Immuno Analyzer | Olympus (MN, USA) | L’analyse des échantillons de sang a été effectuée par la méthode de fluorescence | |
| Olympus BX 40 | microscope Olympus | ||
| RAT Feeding Needles | ORCHID SCIENTIFICS | ||
| SERINGUE SET 1 et 2 ml MEDI -PLUS | Shandong Zibo Shanchuan Medical Instruments Co., Ltd |
Références
- Hoofnagle, J. H., Carithers, R. L., Shapiro, C., Ascher, N. Fulminant hepatic failure: Summary of a workshop. Hepatology. 21 (1), 240-252 (1995).
- Rakela, J., Lange, S. M., Ludwig, J., Baldus, W. P. Fulminant hepatitis: Mayo clinic experience with 34 cases. Mayo Clinic Proceedings.
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
