Nous décrivons ici une méthode pour fabriquer des tableaux de microélectrode Ti3C2 MXene et les utiliser pour l’enregistrement neuronal in vivo.
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Article de méthode
Nous décrivons ici une méthode pour fabriquer des tableaux de microélectrode Ti3C2 MXene et les utiliser pour l’enregistrement neuronal in vivo.
Les technologies implantables de microélectrode ont été employées couramment pour élucider la dynamique neurale à l’échelle micrométrique pour acquérir une compréhension plus profonde des fondements neuronaux des maladies et des dommages de cerveau. Comme les électrodes sont miniaturisées à l’échelle des cellules individuelles, une augmentation correspondante de l’impédance d’interface limite la qualité des signaux enregistrés. En outre, les matériaux d’électrode conventionnels sont rigides, ce qui entraîne un décalage mécanique significatif entre l’électrode et le tissu cérébral environnant, ce qui provoque une réponse inflammatoire qui conduit finalement à une dégradation des performances de l’appareil. Pour relever ces défis, nous avons développé un procédé de fabrication de microélectrodes flexibles à base de Ti3C2 MXene, un nanomatériau récemment découvert qui possède une capacité volumétrique remarquablement élevée, la conductivité électrique, la fonctionnalité de surface et la processabilité dans les dispersions aqueuses. Les réseaux flexibles de microélectrodes Ti3C2 MXene ont une impédance remarquablement faible en raison de la conductivité élevée et de la surface spécifique élevée des films Ti3C2 MXene, et ils se sont avérés extrêmement sensibles pour l’enregistrement de l’activité neuronale. Dans ce protocole, nous décrivons une nouvelle méthode pour micropatterning Ti3C2 MXene dans des tableaux de microélectrode sur des substrats polymères flexibles et dénonçons leur utilisation pour l’enregistrement in vivo de micro-électrocorticographie. Cette méthode peut facilement être étendue pour créer des réseaux d’électrodes MXene de taille arbitraire ou de géométrie pour une gamme d’autres applications en bioélectronique et il peut également être adapté pour une utilisation avec d’autres encres conductrices en plus de Ti3C2 MXene. Ce protocole permet la fabrication simple et évolutive de microélectrodes à partir d’encres conductrices basées sur des solutions, et permet spécifiquement d’exploiter les propriétés uniques de l’hydrophile Ti3C2 MXene pour surmonter bon nombre des obstacles qui ont longtemps entravé l’adoption généralisée de nanomatériaux à base de carbone pour les microélectrodes neurales à haute fidélité.
Comprendre les mécanismes fondamentaux sous-jacents aux circuits neuronaux, et comment leur dynamique est altérée dans la maladie ou les blessures, est un objectif critique pour développer des thérapies efficaces pour un large éventail de troubles neurologiques et neuromusculaires. Les technologies de microélectrode ont été employées couramment pour élucider la dynamique neurale sur les échelles spatiales et temporelles fines. Cependant, l’obtention d’enregistrements stables avec un rapport signal-bruit élevé (RNS) à partir d’électrodes à microéchelle s’est avérée particulièrement difficile. Comme les dimensions des électrodes sont réduites à l’approche de l’échelle c....
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Toutes les procédures in vivo étaient conformes au National Institutes of Health (NIH) Guide for the Care and Use of Laboratory Animals et ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’Université de Pennsylvanie.
1. Synthèse de Ti3C2 MXene
REMARQUE : Les procédures de réaction décrites dans cette section sont destinées à être utilisées à l’intérieur d’une hotte chimique. Les étapes de lavage incluses dans cette procédure sont destinées à être utilisées avec des tubes de centrifugeuse équilibrés. Tous les déchets produits sont consid....
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Les données micro-ECoG enregistrées sur un réseau de microélectrodes MXene sont affichées à la figure 5. Après l’application du réseau d’électrodes sur le cortex, des signaux physiologiques clairs ont été immédiatement apparents sur les électrodes d’enregistrement, avec environ 1 mV d’amplitude ECoG signaux apparaissant sur toutes les électrodes MXene. Les spectres de puissance de ces signaux ont confirmé la présence de deux rythmes cérébraux couramment observés chez les rats sous anesthésie.......
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La procédure de synthèse et de délamination MXene décrite dans ce protocole (HF/HCl/LiCl) a été construite à partir de l’approche de gravure MILD qui utilisait un liF/HCl (in situ HF) etchant moyen26. L’approche MILD permet de délaminer spontanément les flocons de Ti3C2 (plusieurs flocons latéraux) pendant le lavage une fois que le pH 5-6 a été atteint. Par rapport à la gravure avec HF seul, cela se traduit par des matériaux avec une meilleure qualité et des propriétés matéri.......
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Les auteurs n’ont rien à révéler.
Ce travail a été soutenu par les National Institutes of Health (accord no. R21-NS106434), le Citizens United for Research in Epilepsy Taking Flight Award, la Mirowski Family Foundation et Neil et Barbara Smit (F.V.); le National Science Foundation Graduate Research Fellowship Program (subvention no. DGE-1845298 à N.D. et B.M.); le Bureau de recherche de l’Armée de terre (numéro d’entente coopérative W911NF-18-2-0026 à K.M.); et par l’armée américaine par l’intermédiaire du Programme d’initiative des sciences de surface au Edgewood Chemical Biological Center (PE 0601102A Project VR9 à Y.G. et K.M.). Ce travail a été effectué en partie au Singh Center for Nanotechnology....
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Vis 00-90 | McMaster-Carr | 90910A630 | Vis crâne autour de laquelle le fil de terre est enroulé Contrôleur |
| stimulation/enregistrement 128ch | Intan Technologies | Un composant du système d’enregistrement neuronal. | |
| Tubes à centrifuger coniques en polypropylène (PP) de 175 mL | Falcon | REF : 352076 | Utilisé pour le lavage |
| connecteur ZIF à 18 positions avec pas de 0,5 mm | Molex | 505110-1892 | Utilisé pour interfacer le réseau flexible de microélectrodes en parylène avec la carte adaptateur PCB. |
| Connecteur nanominiature mâle à 18 rangées à deux rangées (.025"/.64mm) | Omnetics Connector Corporation | A79008-001 | Utilisé pour interfacer la carte adaptateur PCB à la tête d’enregistrement. |
| 3ML Disposable Plastic Set Transfer Pipettes Graduées | Rienar | Rienar-3ML-20PCS | Utilisé pour le transfert de mordançants ou de solutions MXene |
| 50 mL de tube à centrifuger concial en polyproylène (PP) | Falcon | REF : 352070 | Utilisé pour le lavage et la sélection de la taille |
| Al etcant Type A | Transene | 060-0026000-QT | Pour enlever la couche de masque de gravure Al après la gravure finale Parylène-C. |
| Poudre d’aluminium, -325 mesh, 99,5 % (à base de métaux), taille des particules < 44 < micro ; m | Alfa Aesar | CAS : 7429-90-5 | Utilisé pour la synthèse MAX |
| Logiciel AutoCAD | Autodesk Inc. | Logiciel de conception pour dessiner des photomasques. Les alternatives gratuites incluent DraftSight et LayoutEditor. | |
| Tampon d’oxyde de gravure 6:1 | JT Baker | 1178-03 | Pour enlever la couche de SiO2 afin d’exposer les contacts de l’électrode MXene à la fin de la procédure de fabrication. |
| Buprénorphine SR | Wildlife Pharmaceuticals | pour la chirurgie du rat | |
| Centrifugeuse | Hermle | Benchmark Z 446 | Utilisé pour le lavage et la sélection de la taille |
| Dexdomitor | Midwest Veterinary Supply | 193.13250.3 | Anesthésie pour la chirurgie du rat |
| Fraise de forage | Outils de science fine 19007-07 | Meules pour perceuse | |
| Perceuse électrique | Foredom | K.1070 | Perceuse à micromoteur pour craniotomies |
| Évaporateur à faisceau d’électrons | Kurt J. Lesker Company | Utilisé pour évaporer le Ti, l’Au et le SiO2 pendant la fabrication. La plupart des salles blanches universitaires disposent de cet outil ou d’un outil similaire. | |
| Fil de terre | A-M Systems | 781500 | Fil d’argent nu |
| Headspace Fial, verre | Supelco | REF : 27298 | Utilisé pour le stockage des solutions MXene |
| Acide chlorhydrique (12.1N) | Fisher Scientific | CAS : 7647-01-0 | Corrosif ; matériau de gravure |
| Acide fluorhydrique, (solution à 48-51 % dans H2O) | Acros | CAS : 7664-39-3 | Matériau de gravure |
| Jupiter II Système RIE | March Plasma Systems Inc. | Système de gravure RIE planaire utilisé pour graver le Parylène-C à l’aide de plasma O2. La plupart des salles blanches universitaires disposent d’un système de gravure RIE planaire comparable. | |
| Ruban polyimide standard Kapton, 1/4 | "DuPont | Utilisé pour ajouter de l’épaisseur à la région du tampon de liaison Au du réseau de microélectrodes flexible en parylène pour l’insertion dans le connecteur ZIF. | |
| Hôpital de kétamine | de l’Université de Pennsylvanie. | Anesthésie pour la chirurgie du rat | |
| KLA P-7 Stylus Profilomètre | KLA Corporation | A utilisé les profils 2D de mesure pour confirmer la gravure complète à travers la couche sacrificielle de parylène-C à l’étape 2.4.2. La plupart des salles blanches universitaires disposent de cet outil ou d’un outil de profilomètre à stylet comparable. | |
| Chlorure de lithium, 99 % pour l’analyse, anhydre | Acros | CAS : 7447-41-8 | Hygroscopique ; matériau de délaminage |
| Aligneur de masque MA6 | Karl Suss Microtec AG | Utilisé pour aligner chaque photomasque sur le motif de la plaquette et exposer la plaquette à la lumière UV. La plupart des salles blanches universitaires disposent de cet outil ou d’un outil similaire. | |
| Solution de nettoyage Micro-90 | International Products Corporation | M-9050-12 | Utilisé comme couche anti-adhésive pour permettre l’élimination de la couche sacrificielle de parylène-C pour modeler le MXene |
| NR71-3000p photoresist | Futurrex Inc. | NR71-3000p | Photorésine négative utilisée pour définir les traces Ti/Au et les motifs MXene dans les dispositifs. |
| Pommade ophtalmique | Midwest Veterinary Supply | 193.63200.3 | Pour prévenir le dessèchement de la cornée pendant la chirurgie |
| Système de dépôt de parylène | Systèmes de revêtement | Utilisé pour évaporer de minces films conformes de dimère de parylène-C de parylène-C | |
| Systèmes de revêtement spécialisés | 980130-c-01lbe | Polymère flexible utilisé comme couches de passivation inférieure et supérieure pour les dispositifs | |
| MXene flexiblesPhotomasques (chrome sur verre sodocalcique) | Université de Pennsylvanie | Nos photomasques ont été produits dans la salle blanche de l’Université à l’aide d’un système d’écriture laser Heidelberg DWL66+, mais plusieurs fournisseurs fabriquent des photomasques à partir des fichiers de conception fournis. | |
| Solution de povidone iodée | Medline | MDS093901 | Pour aider à prévenir l’infection autour de l’incision du cuir chevelu |
| Carte de circuit imprimé (PCB) | Circuits | Utilisé pour l’interface entre le réseau d’électrodes MXene et l’électronique de mesure telle que le potentiostat et le système d’enregistrement Intan. Advanced Circuits et d’autres fournisseurs fabriquent et assemblent des circuits imprimés à partir des fichiers de conception fournis. | |
| RD6 Développeur | Futurrex Inc. | RD6 Développeur | Utilisé pour développer la résine photosensible négative NR71-3000p suite à une exposition aux UV |
| Référence 600 Potentiostat | Gamry Instruments | Utilisé pour mesurer l’impédance des électrodes afin d’évaluer la qualité des appareils | |
| Dissolvant PG | MicroChem Corp. | G050200 | Utilisé pour retirer le NR71-3000p suite à un dépôt de métal afin d’effectuer un motif de décollage |
| RHS2000 Câble d’interface Stim SPI | Intan Technologies | Un composant du système d’enregistrement neuronal. | |
| RHS2116 carte d’amplification | Intan Technologies | Un composant du système d’enregistrement neuronal. | |
| Siwafers | Wafer World | 2885 | Substrat pour la fabrication |
| Spin Coater | Équipement | Pour l’enduction des plaquettes avec des résines et l’application des couches Micro-90 et MXene. La plupart des salles blanches des universités sont équipées de spin coaters. | |
| Cadre stéréotaxique | Kopf Instruments | Modèle 902 | Pour positionner le rat pour la neurochirurgie |
| Barre d’agitation magnétique recouverte de téflon | Corning | REF : 1233W95 | Utilisé pour agiter pendant la gravure et l’intercalation |
| Carbure de titane, 99,5 % (base métalliques), taille des particules ~2 µ ; m | Alfa Aesar | CAS : 12070-08-5 | Utilisé pour la synthèse MAX |
| Poudre de titane, -325 mesh, 99 % (à base de métaux), taille des particules < 44µ ; m | Alfa Aesar | CAS : 7440-32-6 | Utilisé pour la synthèse MAX |
| Sonicateur à bain ultrasonique | Reynolds Tech | Pour l’élimination des particules métalliques et photosensibles pendant les processus de décollage pour modeler les métaux. | |
| Spectrophotomètre UV-vis | ThermoScientific | Evolution 201 | Utilisé pour déterminer la concentration et observer le pic d’absorption |
| Zetasizer, Analyse granulométrique | Malvern Panalytical | Nano ZS | Utilisé pour déterminer la distribution latérale de la taille des particules |
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