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Article de méthode

Fabrication de Ti3C2 MXene Microelectrode Arrays pour In Vivo Neural Recording

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DOI :

10.3791/60741

12 février 2020

Dans cet article

Résumé

Nous décrivons ici une méthode pour fabriquer des tableaux de microélectrode Ti3C2 MXene et les utiliser pour l’enregistrement neuronal in vivo.

Résumé

Les technologies implantables de microélectrode ont été employées couramment pour élucider la dynamique neurale à l’échelle micrométrique pour acquérir une compréhension plus profonde des fondements neuronaux des maladies et des dommages de cerveau. Comme les électrodes sont miniaturisées à l’échelle des cellules individuelles, une augmentation correspondante de l’impédance d’interface limite la qualité des signaux enregistrés. En outre, les matériaux d’électrode conventionnels sont rigides, ce qui entraîne un décalage mécanique significatif entre l’électrode et le tissu cérébral environnant, ce qui provoque une réponse inflammatoire qui conduit finalement à une dégradation des performances de l’appareil. Pour relever ces défis, nous avons développé un procédé de fabrication de microélectrodes flexibles à base de Ti3C2 MXene, un nanomatériau récemment découvert qui possède une capacité volumétrique remarquablement élevée, la conductivité électrique, la fonctionnalité de surface et la processabilité dans les dispersions aqueuses. Les réseaux flexibles de microélectrodes Ti3C2 MXene ont une impédance remarquablement faible en raison de la conductivité élevée et de la surface spécifique élevée des films Ti3C2 MXene, et ils se sont avérés extrêmement sensibles pour l’enregistrement de l’activité neuronale. Dans ce protocole, nous décrivons une nouvelle méthode pour micropatterning Ti3C2 MXene dans des tableaux de microélectrode sur des substrats polymères flexibles et dénonçons leur utilisation pour l’enregistrement in vivo de micro-électrocorticographie. Cette méthode peut facilement être étendue pour créer des réseaux d’électrodes MXene de taille arbitraire ou de géométrie pour une gamme d’autres applications en bioélectronique et il peut également être adapté pour une utilisation avec d’autres encres conductrices en plus de Ti3C2 MXene. Ce protocole permet la fabrication simple et évolutive de microélectrodes à partir d’encres conductrices basées sur des solutions, et permet spécifiquement d’exploiter les propriétés uniques de l’hydrophile Ti3C2 MXene pour surmonter bon nombre des obstacles qui ont longtemps entravé l’adoption généralisée de nanomatériaux à base de carbone pour les microélectrodes neurales à haute fidélité.

Introduction

Comprendre les mécanismes fondamentaux sous-jacents aux circuits neuronaux, et comment leur dynamique est altérée dans la maladie ou les blessures, est un objectif critique pour développer des thérapies efficaces pour un large éventail de troubles neurologiques et neuromusculaires. Les technologies de microélectrode ont été employées couramment pour élucider la dynamique neurale sur les échelles spatiales et temporelles fines. Cependant, l’obtention d’enregistrements stables avec un rapport signal-bruit élevé (RNS) à partir d’électrodes à microéchelle s’est avérée particulièrement difficile. Comme les dimensions des électrodes sont réduites à l’approche de l’échelle c....

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Protocole

Toutes les procédures in vivo étaient conformes au National Institutes of Health (NIH) Guide for the Care and Use of Laboratory Animals et ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’Université de Pennsylvanie.

1. Synthèse de Ti3C2 MXene

REMARQUE : Les procédures de réaction décrites dans cette section sont destinées à être utilisées à l’intérieur d’une hotte chimique. Les étapes de lavage incluses dans cette procédure sont destinées à être utilisées avec des tubes de centrifugeuse équilibrés. Tous les déchets produits sont consid....

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Résultats

Les données micro-ECoG enregistrées sur un réseau de microélectrodes MXene sont affichées à la figure 5. Après l’application du réseau d’électrodes sur le cortex, des signaux physiologiques clairs ont été immédiatement apparents sur les électrodes d’enregistrement, avec environ 1 mV d’amplitude ECoG signaux apparaissant sur toutes les électrodes MXene. Les spectres de puissance de ces signaux ont confirmé la présence de deux rythmes cérébraux couramment observés chez les rats sous anesthésie.......

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Discussion

La procédure de synthèse et de délamination MXene décrite dans ce protocole (HF/HCl/LiCl) a été construite à partir de l’approche de gravure MILD qui utilisait un liF/HCl (in situ HF) etchant moyen26. L’approche MILD permet de délaminer spontanément les flocons de Ti3C2 (plusieurs flocons latéraux) pendant le lavage une fois que le pH 5-6 a été atteint. Par rapport à la gravure avec HF seul, cela se traduit par des matériaux avec une meilleure qualité et des propriétés matéri.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à révéler.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par les National Institutes of Health (accord no. R21-NS106434), le Citizens United for Research in Epilepsy Taking Flight Award, la Mirowski Family Foundation et Neil et Barbara Smit (F.V.); le National Science Foundation Graduate Research Fellowship Program (subvention no. DGE-1845298 à N.D. et B.M.); le Bureau de recherche de l’Armée de terre (numéro d’entente coopérative W911NF-18-2-0026 à K.M.); et par l’armée américaine par l’intermédiaire du Programme d’initiative des sciences de surface au Edgewood Chemical Biological Center (PE 0601102A Project VR9 à Y.G. et K.M.). Ce travail a été effectué en partie au Singh Center for Nanotechnology....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Vis 00-90McMaster-Carr90910A630Vis crâne autour de laquelle le fil de terre est enroulé Contrôleur
stimulation/enregistrement 128chIntan TechnologiesUn composant du système d’enregistrement neuronal.
Tubes à centrifuger coniques en polypropylène (PP) de 175 mLFalconREF : 352076Utilisé pour le lavage
connecteur ZIF à 18 positions avec pas de 0,5 mmMolex505110-1892Utilisé pour interfacer le réseau flexible de microélectrodes en parylène avec la carte adaptateur PCB.
Connecteur nanominiature mâle à 18 rangées à deux rangées (.025"/.64mm)Omnetics Connector CorporationA79008-001Utilisé pour interfacer la carte adaptateur PCB à la tête d’enregistrement.
3ML Disposable Plastic Set Transfer Pipettes GraduéesRienarRienar-3ML-20PCSUtilisé pour le transfert de mordançants ou de solutions MXene
50 mL de tube à centrifuger concial en polyproylène (PP)FalconREF : 352070Utilisé pour le lavage et la sélection de la taille
Al etcant Type ATransene060-0026000-QTPour enlever la couche de masque de gravure Al après la gravure finale Parylène-C.
Poudre d’aluminium, -325 mesh, 99,5 % (à base de métaux), taille des particules < 44 < micro ; mAlfa AesarCAS : 7429-90-5Utilisé pour la synthèse MAX
Logiciel AutoCADAutodesk Inc.Logiciel de conception pour dessiner des photomasques. Les alternatives gratuites incluent DraftSight et LayoutEditor.
Tampon d’oxyde de gravure 6:1JT Baker1178-03Pour enlever la couche de SiO2 afin d’exposer les contacts de l’électrode MXene à la fin de la procédure de fabrication.
Buprénorphine SRWildlife Pharmaceuticalspour la chirurgie du rat
CentrifugeuseHermleBenchmark Z 446Utilisé pour le lavage et la sélection de la taille
DexdomitorMidwest Veterinary Supply193.13250.3Anesthésie pour la chirurgie du rat
Fraise de forageOutils de science fine 19007-07Meules pour perceuse
Perceuse électriqueForedomK.1070Perceuse à micromoteur pour craniotomies
Évaporateur à faisceau d’électronsKurt J. Lesker CompanyUtilisé pour évaporer le Ti, l’Au et le SiO2 pendant la fabrication. La plupart des salles blanches universitaires disposent de cet outil ou d’un outil similaire.
Fil de terreA-M Systems781500Fil d’argent nu
Headspace Fial, verreSupelcoREF : 27298Utilisé pour le stockage des solutions MXene
Acide chlorhydrique (12.1N)Fisher ScientificCAS : 7647-01-0Corrosif ; matériau de gravure
Acide fluorhydrique, (solution à 48-51 % dans H2O)AcrosCAS : 7664-39-3Matériau de gravure
Jupiter II Système RIEMarch Plasma Systems Inc.Système de gravure RIE planaire utilisé pour graver le Parylène-C à l’aide de plasma O2. La plupart des salles blanches universitaires disposent d’un système de gravure RIE planaire comparable.
Ruban polyimide standard Kapton, 1/4"DuPontUtilisé pour ajouter de l’épaisseur à la région du tampon de liaison Au du réseau de microélectrodes flexible en parylène pour l’insertion dans le connecteur ZIF.
Hôpital de kétaminede l’Université de Pennsylvanie.Anesthésie pour la chirurgie du rat
KLA P-7 Stylus ProfilomètreKLA CorporationA utilisé les profils 2D de mesure pour confirmer la gravure complète à travers la couche sacrificielle de parylène-C à l’étape 2.4.2. La plupart des salles blanches universitaires disposent de cet outil ou d’un outil de profilomètre à stylet comparable.
Chlorure de lithium, 99 % pour l’analyse, anhydreAcrosCAS : 7447-41-8Hygroscopique ; matériau de délaminage
Aligneur de masque MA6Karl Suss Microtec AGUtilisé pour aligner chaque photomasque sur le motif de la plaquette et exposer la plaquette à la lumière UV. La plupart des salles blanches universitaires disposent de cet outil ou d’un outil similaire.
Solution de nettoyage Micro-90International Products CorporationM-9050-12Utilisé comme couche anti-adhésive pour permettre l’élimination de la couche sacrificielle de parylène-C pour modeler le MXene
NR71-3000p photoresistFuturrex Inc.NR71-3000pPhotorésine négative utilisée pour définir les traces Ti/Au et les motifs MXene dans les dispositifs.
Pommade ophtalmiqueMidwest Veterinary Supply193.63200.3Pour prévenir le dessèchement de la cornée pendant la chirurgie
Système de dépôt de parylèneSystèmes de revêtementUtilisé pour évaporer de minces films conformes de dimère de parylène-C de parylène-C
Systèmes de revêtement spécialisés980130-c-01lbePolymère flexible utilisé comme couches de passivation inférieure et supérieure pour les dispositifs
MXene flexiblesPhotomasques (chrome sur verre sodocalcique)Université de PennsylvanieNos photomasques ont été produits dans la salle blanche de l’Université à l’aide d’un système d’écriture laser Heidelberg DWL66+, mais plusieurs fournisseurs fabriquent des photomasques à partir des fichiers de conception fournis.
Solution de povidone iodéeMedlineMDS093901Pour aider à prévenir l’infection autour de l’incision du cuir chevelu
Carte de circuit imprimé (PCB)CircuitsUtilisé pour l’interface entre le réseau d’électrodes MXene et l’électronique de mesure telle que le potentiostat et le système d’enregistrement Intan. Advanced Circuits et d’autres fournisseurs fabriquent et assemblent des circuits imprimés à partir des fichiers de conception fournis.
RD6 DéveloppeurFuturrex Inc.RD6 DéveloppeurUtilisé pour développer la résine photosensible négative NR71-3000p suite à une exposition aux UV
Référence 600 PotentiostatGamry InstrumentsUtilisé pour mesurer l’impédance des électrodes afin d’évaluer la qualité des appareils
Dissolvant PGMicroChem Corp.G050200Utilisé pour retirer le NR71-3000p suite à un dépôt de métal afin d’effectuer un motif de décollage
RHS2000 Câble d’interface Stim SPIIntan TechnologiesUn composant du système d’enregistrement neuronal.
RHS2116 carte d’amplificationIntan TechnologiesUn composant du système d’enregistrement neuronal.
SiwafersWafer World2885Substrat pour la fabrication
Spin CoaterÉquipementPour l’enduction des plaquettes avec des résines et l’application des couches Micro-90 et MXene. La plupart des salles blanches des universités sont équipées de spin coaters.
Cadre stéréotaxiqueKopf InstrumentsModèle 902Pour positionner le rat pour la neurochirurgie
Barre d’agitation magnétique recouverte de téflonCorningREF : 1233W95Utilisé pour agiter pendant la gravure et l’intercalation
Carbure de titane, 99,5 % (base métalliques), taille des particules ~2 µ ; mAlfa AesarCAS : 12070-08-5Utilisé pour la synthèse MAX
Poudre de titane, -325 mesh, 99 % (à base de métaux), taille des particules < 44µ ; mAlfa AesarCAS : 7440-32-6Utilisé pour la synthèse MAX
Sonicateur à bain ultrasoniqueReynolds TechPour l’élimination des particules métalliques et photosensibles pendant les processus de décollage pour modeler les métaux.
Spectrophotomètre UV-visThermoScientificEvolution 201Utilisé pour déterminer la concentration et observer le pic d’absorption
Zetasizer, Analyse granulométriqueMalvern PanalyticalNano ZSUtilisé pour déterminer la distribution latérale de la taille des particules
de du Analgésie spécialisés avancés rentable

Références

  1. Ludwig, K. A., et al. Poly(3,4-ethylenedioxythiophene) (PEDOT) polymer coatings facilitate smaller neural recording electrodes. Journal of Neural Engineering. 8 (1), 014001(2011).
  2. Polikov, V. S., Tresco, P. A., Reichert, W. M.

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