Lésion cérébrale induite au laser dans le cortex moteur des rats

Résumé

Le protocole présenté ici montre une technique pour créer un modèle de rongeur de lésions cérébrales. La méthode décrite ici utilise l’irradiation laser et cible le cortex moteur.

Résumé

Une technique courante pour induire l’AVC dans les modèles expérimentaux de rongeurs implique l’occlusion transitoire (souvent désignée comme MCAO-t) ou permanente (désignée comme MCAO-p) de l’artère cérébrale moyenne (MCA) à l’aide d’un cathéter. Cette technique généralement acceptée, cependant, a quelques limites, limitant ainsi son utilisation extensive. L’induction de l’AVC par cette méthode est souvent caractérisée par une grande variabilité dans la localisation et la taille de la zone ischémique, des occurrences périodiques d’hémorragie, et des taux de mortalité élevés. En outre, l’achèvement réussi de l’une des procédures transitoires ou permanentes nécessite une expertise et dure souvent environ 30 minutes. Dans ce protocole, une technique d’irradiation laser est présentée qui peut servir de méthode alternative pour induire et étudier les lésions cérébrales dans les modèles de rongeurs.

Comparé aux rats dans les groupes de commande et de MCAO, les dommages de cerveau par induction de laser ont montré la variabilité réduite dans la température de corps, le volume infarctus, l’oedème de cerveau, l’hémorragie intracrânienne, et la mortalité. En outre, l’utilisation d’une lésion induite par le laser a causé des dommages aux tissus cérébraux seulement dans le cortex moteur contrairement aux expériences MCAO où la destruction du cortex moteur et des tissus striataux est observée.

Les résultats de cette recherche suggèrent que l’irradiation laser pourrait servir comme une technique alternative et efficace pour induire des lésions cérébrales dans le cortex moteur. La méthode raccourcit également le temps d’achèvement de la procédure et ne nécessite pas de gestionnaires experts.

Introduction

À l’échelle mondiale, l’AVC est la deuxième cause de décès et la troisième cause d’invalidité¹. L’AVC entraîne également un handicap grave, nécessitant souvent des soins supplémentaires de la part du personnel médical et de leurs proches. Il est donc nécessaire de comprendre les complications associées au trouble et d’améliorer le potentiel de résultats plus positifs.

L’utilisation de modèles animaux est la première étape pour comprendre les maladies. Pour assurer les meilleurs résultats de recherche, un modèle typique comprendrait une technique simple, une abordabilité, une reproductibilité élevée et une variabilité....

Protocole

La procédure suivante a été menée conformément aux lignes directrices sur l’utilisation des animaux expérimentaux de la Communauté européenne. Les expériences ont également été approuvées par le Comité des soins aux animaux de l’Université Ben Gourion du Néguev.

1. Sélection et préparation des animaux

1. Sélectionnez 65 rats mâles Sprague-Dawley pesant de 300 à 350 g sans pathologie manifeste pour cette procédure. La plus petite taille pose des difficultés techniques pour la procédure MCAO.
2. Assignez 3 rats par cage et laissez-les s’adapter pendant au moins 3 jours.

2. Procédure MCAO

<....

Résultats

Aucun décès ou SAH n’a été enregistré dans les groupes témoins ou expérimentaux (Tableau 1). Le groupe MCAO avait un taux de mortalité de 20 % et de SAH.

Les changements relatifs de température corporelle chez les rats des deux groupes étaient également similaires, malgré une différence dans la variabilité des deux groupes (tableau 1).

Il y avait un NSS significativement pire dans les modèles laser (16 ± 1.1) et MCAO (20 ± 1,5), com.......

Discussion

Il est juste de supposer que la technique laser est mini-invasive, étant donné qu’aucun décès ou SAH s’est produit dans le groupe laser. La principale cause de décès et de SAH est les dommages aux vaisseaux sanguins qui conduit à une élévation de la pression intracrânienne (ICP), comme le montrent les techniques originales mcao¹⁰. L’absence de décès et de SAH dans le groupe laser est probablement due aux effets spécifiques des lasers : ils n’ont pas d’impact direct sur les vaisseaux sanguins et pe.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium	SIGMA - ALDRICH	298-96-4
Acide trichloracétique à 50 %	SIGMA - ALDRICH	76-03-9
Cerveau & Matrices tissulaires	SIGMA - ALDRICH	15013
Canule Venflon 22 G	KD-FIX	1.83604E+11
Centrifugeuse Sigma 2-16P	SIGMA - ALDRICH	Sigma 2-16P
Balances analytiques compactes	SIGMA - ALDRICH	HR-AZ/HR-A
Balance numérique	SIGMA - ALDRICH	Rs 4,000
Ciseaux	de dissectionSIGMA - ALDRICH	Z265969
Pipette Eppendorf	SIGMA - ALDRICH	Z683884
Eppendorf Tube	SIGMA - ALDRICH	EP0030119460
Ethanol 96 %	ROMICAL		Liquide inflammable
Evans Blue 2 %	SIGMA - ALDRICH	314-13-6
Détecteur de fluorescence	Tecan, Mä ; nnedorf Suisse	modèle Infinite 200 PRO lecteur
Chauffage avec thermomètre	Coussin chauffant-1	Modèle : HEATINGPAD-1/2
Brassard de perfusion	ABN	IC-500
Isofluran, USP 100 %	Piramamal Critical Care, Inc	NDC 66794-017
Multiset	TEVA MEDICAL	998702
Olympus BX 40 microscope	Olympus
Scanner optique	Canon	Cano Scan 4200F
Boîtes de Pétri	SIGMA - ALDRICH	P5606
Lames de scalpel 11	SIGMA - ALDRICH	S2771
Sharplan 3000 Nd :YAG (grenat d’aluminium dopé au néodyme) Machine laser	Laser Industries Ltd
Support de tête stéréotaxique	KOPF	900LS
Seringue stérile 2 ml	Braun	4606027V
Seringue-aiguille 27 G	Braun	305620

multimode