Article de méthode

Préparation d’électrodes de stimulation nerveuse périphérique pour l’implantation chronique chez les rats

DOI :

10.3791/61128

14 juillet 2020

Dans cet article

Résumé

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les approches existantes pour la construction d’électrodes de manchette périphériques implantables chroniques pour une utilisation chez les petits rongeurs nécessitent souvent un équipement spécialisé et/ou un personnel hautement qualifié. Dans ce protocole, nous démontrons une approche simple et peu coûteuse pour fabriquer des électrodes de manchette chroniquement implantables, et démontrons leur efficacité pour la stimulation de nerf vague (VNS) chez les rats.

Résumé

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les électrodes périphériques de manchette de nerf ont longtemps été employées dans les neurosciences et les champs connexes pour la stimulation, par exemple, des nerfs vagues ou sciatiques. Plusieurs études récentes ont démontré l’efficacité de VNS chronique dans l’amélioration de la plasticité du système nerveux central pour améliorer la réadaptation motrice, l’apprentissage de l’extinction, et la discrimination sensorielle. La construction de dispositifs implantables chroniques pour une utilisation dans de telles études est difficile en raison de la petite taille des rats, et les protocoles typiques nécessitent une formation approfondie du personnel et des méthodes de microfabrication chronophages. Alternativement, les électrodes implantables de manchette disponibles dans le commerce peuvent être achetées à un coût sensiblement plus élevé. Dans ce protocole, nous présentons une méthode simple et peu coûteuse pour la construction de petites électrodes de manchette périphériques chroniquement implantables pour une utilisation chez les rats. Nous validons la fiabilité à court et à long terme de nos électrodes de manchette en démontrant que VNS dans la kétamine/xylazine anesthésié rats produit des diminutions du taux de respiration compatible avec l’activation du réflexe Hering-Breuer, à la fois au moment de l’implantation et jusqu’à 10 semaines après l’implantation de l’appareil. Nous démontrons en outre la pertinence des électrodes de manchette pour une utilisation dans les études de stimulation chronique en associant VNS avec la performance habile de presse de levier pour induire la plasticité corticale de carte de moteur.

Introduction

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Récemment, la demande d’électrodes de manchettes chroniquement implantables pour la stimulation des nerfs périphériques a augmenté, car les études démontrent de plus en plus l’utilité préclinique de cette technique pour le traitement de nombreuses maladies inflammatoires1,2,3 et troubles neurologiques4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15. Chronique VNS, par exemple, a été montré pour améliorer la plasticité néocorticale dans une variété de contextes d’apprentissage, l’amélioration de la réadaptation motrice4,5,6 ,76,,8, l’apprentissage de l’extinction10,11,12,13,14, et la discrimination sensorielle15. Les électrodes périphériques de manchette périphériques disponibles dans le commerce sont souvent associées à des délais prolongés pour l’exécution des commandes et à des coûts relativement élevés, ce qui peut limiter leur accessibilité. Alternativement, les protocoles pour la fabrication « en interne » des électrodes de manchette chroniquement implantables restent limités, et l’anatomie de rongeur présente des défis particuliers en raison de leur petite taille. Les protocoles actuels pour la construction d’électrodes de manchette pour des expériences chroniques de rongeurs exigent souvent l’utilisation d’équipements et de techniques complexes, ainsi que du personnel hautement qualifié. Dans ce protocole, nous démontrons une approche simplifiée de la fabrication d’électrodes de manchette basée sur des méthodes précédemment publiées et largement utilisées16,17. Nous validons la fonctionnalité de nos électrodes chroniquement implantées chez les rats en démontrant qu’au moment de l’implantation de manchette autour du nerf vague cervical gauche, la stimulation appliquée aux électrodes de manchette a réussi à produire un arrêt de la respiration et de la baisse dans SpO2. La stimulation des fibres vagales de récepteur pulmonaire afférent est connue pour engager le réflexe d’Hering-Breuer, dans lequel l’inhibition de plusieurs noyaux respiratoires dans le tronc cérébral a comme conséquence l’inspiration de suppression18. Ainsi, l’arrêt de la respiration compatible avec le réflexe Hering-Breuer, et la baisse résultante dans SpO2, fournissent un test simple pour l’implantation d’électrode appropriée et la fonction de manchette dans les rats anesthésiés. Pour valider la fonctionnalité à long terme des électrodes de manchette chroniquement implantées, les réponses réflexes ont été mesurées au moment de l’implantation et comparées aux réponses obtenues chez les mêmes animaux six semaines après l’implantation. Un deuxième groupe de rats a été implanté avec des électrodes de manchette de VNS après l’entraînement comportemental sur une tâche pressante de levier. Chez ces rats, VNS jumelé à des performances de tâche correctes a produit la réorganisation de la carte motrice corticale, compatible avec les études précédemment publiées19,20,21,22. Au moment de la cartographie corticale motrice sous anesthésie, qui s’est produite 5 à 10 semaines après l’implantation de l’appareil, nous avons encore validé la fonction de manchette chez les animaux traités par VNS en confirmant que VNS a réussi à provoquer un arrêt de la respiration et une baisse de plus de 5% dans Spo2.

Les protocoles récemment publiés de Childs et al.17 et Rios et coll.16 fournissent un point de départ bien validé pour une approche simplifiée de fabrication d’électrodes de manchette, car cette méthode populaire a été utilisée par plusieurs laboratoires menant des études VNS chroniques chez les rongeurs1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11. La méthode originale implique plusieurs étapes de haute précision pour manipuler les microfils fins de telle sorte que la fabrication d’électrodes de manchette prend plus d’une heure à compléter, et une formation approfondie pour effectuer de manière fiable. L’approche simplifiée décrite ici nécessite beaucoup moins de matériaux et d’outils et peut être complétée en moins d’une heure par du personnel peu formé.

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Protocole

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Toutes les procédures décrites dans ce protocole sont effectuées conformément au Guide des NIH pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire et ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université du Texas à Dallas.

1. Stimuler la fabrication d’électrodes de manchette

  1. Préparer le tube de manchette.
    1. À l’aide d’une lame de rasoir, couper un morceau de tube en polymère de 2,5 mm de longueur. Insérez des pointes de forceps ou un trombone à travers le tube et utilisez la lame pour faire une fente dans le sens de la longueur à travers le mur de la tuyauterie d’un côté le brassard.
    2. Retirer les forceps du tube et insérer une grande aiguille à coudre à travers la ligne médiane du brassard, perpendiculairement à l’axe long. Insérez l’aiguille à travers la fente (en haut) et dans le centre du tube en face (en bas). Placez l’aiguille dans la planche de mousse pour épingler le brassard en place pendant les étapes d’assemblage restantes.
  2. Placer la suture pour fixer la fermeture des poignets pendant l’implantation.
    1. Insérez la petite aiguille à coudre à travers le mur du brassard, sur la ligne médiane, à environ 0,5 mm de la fente supérieure d’un côté. Insérez l’aiguille de l’intérieur à l’extérieur pour éviter d’endommager le tube de manchette. Insérez une longueur de 2 cm de suture de 6/0 à travers l’œil de l’aiguille et tirez l’aiguille à travers le mur de la baignoire pour enfiler la suture dans le brassard.
    2. En laissant le fil en place, retirez l’aiguille et perforez un deuxième trou à travers le mur de tubes à environ 0,5 mm sous le premier trou, le long de la ligne médiane du brassard. Insérez la suture à travers l’œil de l’aiguille et tirez l’aiguille à travers le mur de tubes pour enfiler à nouveau la suture à travers le brassard.
    3. Les deux extrémités du fil de suture doivent maintenant être sur le côté extérieur de la manchette. Réglez la suture de sorte que ~1,5 cm s’étend du trou supérieur, et ~0,5 mm s’étend du trou inférieur.
    4. Appliquer une petite quantité d’adhésif UV cure à l’extrémité courte de la suture s’étendant du trou inférieur et tirer l’extrémité plus longue suture jusqu’à ce que la queue inférieure est presque flush avec le mur extérieur de la tuyauterie. Utilisez la baguette UV pour guérir l’adhésif et maintenir la suture fermement en place.
    5. Répétez les étapes 1.2.1 à 1.2.3 du côté opposé de la manchette.
  3. Placez les fils de fil Platinum:Iridium (Pt:Ir).
    1. Utilisez la petite aiguille à coudre pour faire 4 trous dans le mur de manchette. Chaque paire de trous doit être placée à environ 0,5 à 0,8 mm de la ligne médiane perpendiculaire, avec un trou d’environ 0,5 à 0,8 mm de la fente supérieure de chaque côté du brassard.
      ATTENTION : Pour le placement le plus cohérent et le plus précis des fils, insérez l’aiguille de l’intérieur à l’extérieur pour faire tous les trous, en utilisant le placement de suture comme guide.
    2. Insérez à nouveau l’aiguille à coudre, cette fois en travaillant de l’extérieur à l’intérieur, à travers le trou de plomb 1. Insérez environ 0,5 cm d’une longueur de 7,5 cm de Pt:Ir fil à travers l’œil de l’aiguille et tirez l’aiguille à travers le tube pour enfiler le fil de plomb à travers le mur de manchette. Réglez le fil de sorte que ~4,5 cm s’étend sur le côté extérieur de la manchette (Figure 1A).
    3. Insérez l’aiguille à travers le trou de plomb 1 à nouveau, de nouveau en travail extérieur à l’intérieur, et en outre insérer l’aiguille à travers le trou de plomb 2 directement en face du trou de plomb 1. Insérez ~0,5 cm de l’extrémité plus courte (intérieure) du fil Pt:Ir à travers l’œil de l’aiguille et tirez l’aiguille à travers le tube pour enfiler le fil de plomb à travers les parois du brassard.
      REMARQUE : Les deux extrémités du fil Pt:Ir doivent maintenant être sur le côté extérieur de la manchette, et une boucle de fil est formée autour du bord de la fente et à travers le trou de plomb 1 (Figure 1B).
    4. Répétez les étapes 1.3.1 à 1.3.3 pour placer Pt:Ir fil à travers les trous de plomb 3 et 4.
    5. À l’aide d’un briquet butane, retirez soigneusement l’isolant d’une longueur de 5 à 6 mm à l’extrémité des fils Pt:Ir qui s’étendent du trou de plomb 2 et du trou de plomb 4.
      ATTENTION : Isolez soigneusement les extrémités des fils du reste de l’ensemble de manchettes afin d’éviter d’endommager la manchette. Utilisez des outils pour tenir les fils afin d’éviter les blessures.
    6. Alignez le fil nu à l’intérieur du brassard pour placer les fils dans leurs emplacements finaux. Pour ce faire, tirez doucement sur l’extrémité du fil Pt:Ir s’étendant du trou 1 jusqu’à ce que la partie non isolée du fil est rince avec le trou 1. Répétez avec l’autre fil pour aligner l’extrémité non isolée du fil fileté à travers les trous de plomb 3 et 4.
    7. Appliquer une petite quantité d’adhésif UV cure sur les boucles de fil sur le côté extérieur de la manchette aux trous de plomb 1 et 3. Utilisez la baguette UV pour guérir l’adhésif et fixer les fils en place.
    8. Utilisez une petite pointe de pipette pour pousser les fils non isolés Pt:Ir contre le mur intérieur de la manchette. Une fois les fils en place, coupez les extrémités des fils s’étendant des trous de plomb 2 et 4 de sorte qu’environ 1 mm de fil s’étend au-delà de l’extérieur du mur de manchette.
    9. Pliez les queues de 1 mm du fil à plat contre la surface extérieure du brassard, en prenant soin de ne pas les court-circuiter ensemble. Appliquer une petite quantité d’adhésif UV cure pour couvrir les deux queues et guérir l’adhésif pour fixer le placement de plomb et de fournir une isolation électrique.
      ATTENTION : Il est important de couvrir entièrement les surfaces Pt:Ir exposées à l’extérieur avec de l’adhésif pour isoler les fils et éviter la stimulation hors cible.
  4. Sécurisez les fils Pt:Ir en place avec la sécurité de suture.
    1. Retirez la grande aiguille avec l’ensemble de manchette de la planche en mousse. Insérez une longueur de 3 cm de 6/0 suture à travers l’œil de l’aiguille et tirez l’aiguille à travers le tube pour enfiler la suture à travers le bas de la manchette au milieu.
    2. Passez à la petite aiguille à coudre pour compléter le filetage de suture pour la sécurité de plomb Pt:Ir. Insérez l’aiguille dans le même trou de ligne médiane, en travaillant à nouveau de l’intérieur à l’extérieur pour éviter la déformation du tube et des fils de fil. Insérez la queue extérieure de la suture à travers l’œil de l’aiguille et tirez l’aiguille à travers le mur du brassard pour créer une boucle de suture autour du bord du brassard (figure 1C).
      REMARQUE : Utilisez des forceps et travaillez au microscope pour s’assurer que la suture est orientée le long du long axe de la manchette et se trouve à plat contre le tube. Cette étape assure que les fils restent séparés sur le côté intérieur de la manchette et sont maintenus en place latérale à la ligne médiane du brassard.
    3. Créez une deuxième boucle autour de l’extrémité opposée du brassard en attachant les extrémités de la suture en un demi-nœud, sur le côté extérieur de la manchette. Assurez-vous que la suture longe le long axe du brassard et se trouve à plat contre le tube. Tout en maintenant le noeud serré de sorte qu’il se couche à plat contre le tube, appliquer une petite quantité d’adhésif uv cure à la moitié-noeud et guérir pour tenir en place.
    4. Couper soigneusement les extrémités du fil de suture aussi près que possible du nœud. Si nécessaire, utilisez une petite quantité d’adhésif uv supplémentaire pour coller les extrémités courtes de la suture afin qu’elles soient à plat contre le tube (figure 1D).
  5. Les broches de connecteur de soudure aux fils de fil de Pt:Ir.
    1. À l’aide d’un briquet butane, retirez l’isolant d’environ 3 mm à la fin de chacun des fils de fil Pt:Ir. Souder le côté tasse d’une goupille d’or (voir Tableau des matériaux)à l’extrémité non isolée de chaque plomb.
  6. Testez l’impédance de l’appareil assemblé.
    1. Connectez les broches d’or aux entrées d’un compteur LCR ou d’un module de vérification de l’impédance électrode et réglez la fréquence d’essai à 1 kHz. Submergez les tubes de manchette (et Pt:Ir stimulation contacts intérieur à la manchette) dans un petit bécher rempli de solution saline, en prenant soin de garder les broches de plomb d’or et les connecteurs de sonde au sec. Vérifiez que le brassard assemblé a une impédance à 1 kHz de moins de 2 kΩ avant de procéder à l’implantation.
      REMARQUE : L’impédance élevée indique souvent la surface inadéquate de Pt:Ir exposée, qui peut survenir en raison de facteurs tels que l’enlèvement insuffisant de l’isolation, l’application accidentelle de l’adhésif dans l’intérieur de manchette, les brins de fil cassés, etc. Les poignets doivent également être inspectés pour détecter les brins de fil cassés ou mal placés qui pourraient entraîner des contacts courts avec une utilisation à long terme.

2. Construction de bouchons

REMARQUE : Les procédures d’assemblage de headcap sont semblables à celles publiées précédemment (Childs et al.17),et sont résumées ici pour plus de commodité.

  1. Assembler le headcap17
    1. Couper deux petits morceaux de 30 enveloppements de fil AWG, un ~13 mm de longueur et un ~10 mm de longueur. Retirez les ~1,5 mm d’isolant de chaque extrémité des deux fils. Souder le côté pin d’une épingle d’or à une extrémité de chaque fil, aussi près que possible de la tasse. Utilisez des coupe-fils pour couper l’excès de longueur de la goupille au-delà de l’articulation de soudure.
    2. Souder les autres extrémités des fils AWG aux deux tasses centrales de soudure d’un connecteur microstrip à 4 broches.
    3. Pliez le casque de fil conduit vers le connecteur et placez les broches d’or à plat contre le connecteur, parallèles les uns aux autres, comme le montre la figure 2A. La goupille reliée au fil plus court doit être placée sous la goupille reliée au fil plus long. Utilisez de l’acrylique à ongles, du ciment dentaire ou de l’adhésif UV pour fixer les fils de la tête en place.

3. Utilisation de l’appareil

  1. Implanter les électrodes de manchette pour la stimulation chronique du nerf vague.
    REMARQUE : Toutes les interventions chirurgicales doivent être effectuées à l’aide d’une technique stérile ou aseptique sous anesthésie appropriée, conformément aux Lignes directrices des NIH pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire et avec l’approbation locale de l’IACUC. Les procédures suivantes sont destinées à illustrer une utilisation représentative de l’appareil et ne sont pas destinées à être complètes.
    1. Placez le rat dans un cadre stéréotaxique et faites une incision sagittale sur les os pariétals et occipitals pour révéler la surface du crâne pour l’implantation du casque/connecteur. Percer soigneusement 4 trous dans le crâne et placer les vis du bijoutier. Utilisez de l’acrylique dentaire pour fixer la tête au crâne et aux vis.
    2. Retirez le rat du cadre stéréotaxique et allongez-le sur le côté droit. Faire une incision verticale dans la peau sur le côté gauche du cou, et disséquer soigneusement le nerf vague gauche de l’artère carotide, situé entre les muscles sternomastoïdes et sternohyoïdes et sous le muscle omohyoïde.
    3. Tunnel le brassard conduit sous-cutanéement vers le crâne. Connectez les conduits au headcap à l’aide des broches d’or.
    4. Placez le nerf vague à l’intérieur du brassard et fixez l’appareil fermé en attachant un double nœud dans les sutures de manchette. Veillez à éviter d’endommager le nerf pendant l’implantation en manipulant le nerf avec des crochets émoussés et non conducteurs ou en saisissant le tissu conjonctif entourant le nerf.
    5. Testez l’implant en appliquant une stimulation sur l’appareil (10 s train de 0,8 mA, 30 Hz, 100 μs impulsions biphasiques). Une implantation adéquate entraînera un arrêt de la respiration et une baisse du SpO2 de 5 % ou plus.
    6. Couvrez les broches d’or et les fils exposés avec de l’acrylique dentaire, fermez les plaies avec des sutures, et nettoyez les sites d’incision avec la solution saline, d’alcool et d’iode povidone.
    7. Fournir des liquides de remplacement, des analgésiques et des soins postopératoires conformément aux lignes directrices des NIH et à l’approbation de l’IACUC.
  2. Stimuler le nerf vague pendant le comportement éveillé.
    REMARQUE : Il a déjà été démontré que la livraison de VNS au fur et à mesure que les animaux effectuent des tâches motrices spécifiques élargit la représentation de la carte motrice de la musculature pertinente pour les tâches. Nous utilisons ce paradigme validé pour fournir un exemple représentatif de l’utilisation de l’appareil, mais de nombreux autres paradigmes comportementaux et /ou paramètres de stimulation peuvent être pertinents pour d’autres applications. Les rats ont été formés à la compétence sur la tâche de presse de levier utilisée ici avant l’implantation de dispositif. Après la chirurgie, de bonnes performances ont de nouveau été vérifiées avant l’accouchement par VNS : les rats ont effectué au moins 100 essais réussis en deux séances d’entraînement de 30 minutes par jour. VNS a été jumelé avec des presses à levier correctes au cours de 10 séances d’entraînement ultérieures sur 5 jours.
    1. Connectez le rat à un générateur de stimulus par l’intermédiaire d’un bouchon de tête implanté et adaptez-le aux paramètres de stimulation appropriés. Pour la réorganisation induite par VNS de la carte corticale du moteur, jumeler chaque presse à levier correcte avec un seul train de 15 impulsions biphasiques, chacune d’une largeur de 100 μs et une amplitude de 800 μA, livrée à une fréquence de 30 Hz.
    2. Un train de stimulation est livré immédiatement après la détection de chaque presse à levier réussie tout au long de dix séances d’entraînement de 30 min. Pendant la livraison de VNS, utilisez un oscilloscope pour surveiller la livraison réussie de la stimulation actuelle.
  3. Valider la fonction de manchette implantée chroniquement.
    1. Dans les 24 h de la dernière séance d’entraînement jumelée vns, utilisez la microstimulation intracrânienne (ICMS) pour quantifier la carte somatotopique fonctionnelle dans le cortex moteur19,20,21,22.
    2. Après l’induction de l’anesthésie pour la cartographie ICMS du cortex moteur, valider la fonction de manchette à nouveau en appliquant un train de 10 s de 30 Hz, 0,8 mA stimulation du courant (100 μs impulsions biphasiques), ce qui devrait entraîner un arrêt de la respiration et une réduction des niveaux de SpO2 d’au moins 5%, compatible avec le réflexe Hering-Breuer.
      REMARQUE : Selon l’application, la fonction de manchette peut être considérée comme acceptable si une baisse fiable de SpO2 inférieure à 5 % est observée, ou si des amplitudes de courant plus élevées (jusqu’à 1,6 mA) produisent de manière fiable une réduction fiable d’au moins 5 % de SpO2. Le défaut d’observer un arrêt de la respiration et/ou une diminution fiable du SpO2 est révélateur d’une défaillance de l’implant.

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Résultats

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Les électrodes et les headcaps de manchette de nerf de Vagus ont été chroniquement implantés chez des rats selon des procédures chirurgicales précédemmentéditées 17,19,20,21,22. Avant l’implantation, l’impédance à 1 kHz a été mesurée à travers les fils de manchette avec le tube de manchette submergé en solution saline (impédance = 1,2 ± 0,17 kΩ [moyenne ± std]...

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Discussion

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Ici, nous décrivons une approche simple et peu coûteuse pour l’assemblage des électrodes de manchette stimulante chroniquement implantables pour une utilisation chez les rongeurs, facilitant les investigations précliniques de cette thérapie émergente. Cette méthode simplifiée ne nécessite aucune formation ou équipement spécialisé, et utilise un petit nombre d’outils et de fournitures qui sont facilement accessibles à la plupart des laboratoires de recherche, réduisant à la fois les coûts monétaires et de main-d’œuvre de ...

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Déclarations de divulgation

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Les auteurs n’ont rien à révéler.

Remerciements

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Ces travaux ont été financés par l’Université du Texas à Dallas et le Conseil des régents de l’UT. Nous remercions Solomon Golding, Bilaal Hassan, Marghi Jani et Ching-Tzu Tseng pour leur assistance technique.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Tube polymère biocompatible à base de polyuréthane, 0,080 » OD x 0,040 » IDBraintree ScientificMRE080 36 FT
Microscope de dissectionAM Scopes#SM-6T-FRL
Ciseaux dentelés fins, droits, bord de coupe de 22 mmOutils de science fine#14058-09pour couper le fil Pt/Ir et le fil de suture
Pince, #5 Pince Dumont, droite, 11 cm, 0,1 x 0,06 mm pointeFine Science Tools#11626-11
Pinces, pince à pointe en céramique, pointes de 0,3 mm x 30 mmMicroscopie électronique Sciences#78127-71
Broches en or, PCB Press Fit SocketMill-Max#1001-0-15-15-30-27-04-0ou petites broches similaires pour connecter les fils du brassard au capuchon
Briquet isobutaneBIC#LCP21-ASTpour désisoler le fil
Pt/IrConnecteur micro bande avec loquet, 4 brochesOmneticsA24002-004 / PS1-04-SS-LT
Pointe de pipette, 10 uLVWR89079-464
Fil platine-iridium (90/10 %), 0,001" (diamètre) x 9 brins,Sigmund Cohn10IR9/49T
, à un seul tranchant, acier au carbone chirurgical n° 9VWR#55411-050pour la coupe de
tubes en MicroRenathaneAiguille à coudre, env. 4,0 cm de longueur x 0,7 mm de diamètre (taille 6-7)Singer00276Aiguille plus petite pour enfiler le fil Pt/Ir
Aiguille à coudre, env. 4,5 cm de longueur x 0,8 mm de diamètre (taille 2-3)Singer00276Aiguille plus grande pour épingler le brassard lors du montage et pour enfiler la suture
Petit panneau de mousseJuvo+/AmazonB07C9637SJpour plate-forme de fabrication ; nos dimensions sont d’environ 2,5 » x 3,5 » x 1 » (L x l x H)
Soudure, multiconducteur sans plomb, 0,38 mm de diamètreLoctite/Multicore#796037
Station de soudageWellerWES51ou fer à souder similaire compatible avec les pointes coniques longues (cette pièce a été abandonnée)
Panne à souder, conique longue, 0,01 » / 0,4 mmWeller1UNF8
Suture, soie tressée non résorbable, taille 6/0Outils de sciences fines#18020-60
Spot lumineux UV (405 nm)Henkel/Loctite#2182207
Adhésif de polymérisation à la lumière UV 25 mlHenkel/LoctiteAA 3106ou adhésif de polymérisation UV biocompatible similaire
Fil d’enroulement, 30 AWGDigikeyK396-ND
Lame de rasoir isolée PTFE

Références

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