Changements de température progressifs pour la reproduction et le frai maximaux chez Astyanax mexicanus

Summary

Cet article décrit les conditions et les protocoles de laboratoire de base pour un régime de température incrémentale afin de stimuler le frai maximal dans le tétra mexicain Astyanax mexicanus,qui est un modèle émergent pour les études développementales et évolutives.

Abstract

Le tétra mexicain, Astyanax mexicanus, est un système modèle émergent pour les études de développement et d’évolution. L’existence de morphes de surface aux yeux (poissons de surface) et de grottes aveugles (poissons des cavernes) chez cette espèce offre l’occasion d’interroger les mécanismes sous-jacents à l’évolution morphologique et comportementale. Les poissons des cavernes ont développé de nouveaux traits constructifs et régressifs. Les changements constructifs comprennent l’augmentation des papilles gustatives et des mâchoires, des organes sensoriels de la ligne latérale et de la graisse corporelle. Les changements régressifs comprennent la perte ou la réduction des yeux. Pigmentation de mélanine, comportement scolaire, agression, et sommeil. Pour interroger expérimentalement ces changements, il est crucial d’obtenir un grand nombre d’embryons frayés. Depuis que les poissons de surface et les poissons des cavernes A. mexicanus ont été collectés au Texas et au Mexique dans les années 1990, leurs descendants ont été régulièrement stimulés à se reproduire et à frayer un grand nombre d’embryons tous les deux mois dans le laboratoire Jeffery. Bien que la reproduction soit contrôlée par l’abondance et la qualité de la nourriture, les cycles clair-foncé et la température, nous avons constaté que les changements de température progressifs jouent un rôle clé dans la stimulation du frai maximal. L’augmentation progressive de la température de 72 ° F à 78 ° F dans les trois premiers jours d’une semaine de reproduction fournit deux-trois jours de frai consécutifs avec un nombre maximal d’embryons de haute qualité, qui est ensuite suivie d’une diminution progressive de la température de 78 ° F à 72 ° F au cours des trois derniers jours de la semaine de frai. Les procédures présentées dans cette vidéo décrivent le flux de travail avant et pendant une semaine de reproduction en laboratoire pour le frai stimulé par la température incrémentielle.

Introduction

Le téléostéen Astyanax mexicanus a une forme de surface(poisson de surface) et de nombreuses formes aveugles de grottes (poissons des cavernes)^1,2. Les poissons des cavernes ont évolué dans l’obscurité perpétuelle et sous des limites alimentaires, ce qui a entraîné l’apparition de nouveaux traits constructifs et régressifs³. Les traits constructifs comprennent l’augmentation des papilles gustatives et de la taille de la mâchoire, les organes sensoriels de la ligne latérale et les réserves de graisse. Les traits régressifs incluent la perte ou la réduction de la pigmentation de ....

Protocol

Cette procédure a été approuvée par les directives de soins institutionnels aux animaux de l’Université du Maryland, College Park (actuellement IACUC 469 #R-NOV-18-59; Projet 1241065-1).

Figure 1. Calendriers pendant une semaine de reproduction et une semaine de non-reproduction. Veuillez cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Results

Nous élevons et frappons généralement les descendants de poissons de surface collectés à l’origine à Nacimiento del Rio Choy à San Luis Potosi, au Mexique (poissons de surface rio Choy) et à San Solomon Springs dans le parc d’État de Balmorhea, au Texas (poissons de surface du Texas) et de poissons des cavernes dérivés de Cueva de El Pachón (poisson des cavernes de Pachón) à Tamaulipas, au Mexique, et cueva de los Sabinos (poisson des cavernes de Los Sabinos) et sotano de la Tinaja (poisson des cavernes de Tinaja) à San .......

Discussion

Astyanax mexicanus est un nouveau modèle biologique qui fraie fréquemment et peut être élevé facilement en laboratoire^1,2. Parce que nous nous intéressons aux mécanismes de développement qui sous-tendent les changements évolutifs chez les poissons des cavernes A. mexicanus, la production et l’utilisation d’embryons sont essentielles à nos objectifs de recherche. L’objectif principal du maintien d’un stock de poissons adultes est la production d’.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Vers noirs Eastern	Aquatics, Lancaster, PA	Aucun
Filets d’élevage	Œufs d’artémias fabriqués
	AquaCave Lake Forest, IL.	Aucun
Kit de test colorimétrique	Petco	SKU :11916	Kit de test de pH d’eau douce API
Flocons de jaune d’œuf	Pentair, Minneapolis, MN	Aucun
Bols à doigts Carolina	Biological Supply	741004	Plats de culture, 4,5 po, 250 mL
Filets à main	N’importe quelle animalerie
Incubateur pour embryons	Fisher Scientific	51-029-321HPM	405 L
Sels de mer instantanés de l’océan	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Aucun
Bleu de méthylène	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	M9140
Pipettes Pasteur	Fisher Scientific	13-678-20	5,75 po.
Solution de trempage net	N’importe quelle animalerie
Nutrafin Cycle	Amazon	Aucun	Boost bactérien
Réfrigérateur pour alimentation en direct	Toute source
Stéréomicroscope	N’importe quelle source
Thermomètre	N’importe quelle source
Tetra Tropical	Crisps Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Aucun