Différents modèles d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAo) sont utilisés dans la recherche expérimentale sur les accidents vasculaires cérébraux. Ici, un modèle expérimental d’AVC de MCAo transitoire via l’artère carotide externe (ECA) est décrit, qui vise à imiter l’AVC humain, dans lequel le thrombus cérébrovasculaire est enlevé en raison d’une lyse spontanée du caillot ou d’un traitement.
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Article de méthode
Modélisation de l’AVC chez la souris: occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide externe
Dans cet article
Résumé
Résumé
L’AVC est la troisième cause de mortalité la plus fréquente et la principale cause d’invalidité acquise chez les adultes dans les pays développés. À ce jour, les options thérapeutiques sont limitées à une petite proportion de patients victimes d’un AVC dans les premières heures suivant l’AVC. De nouvelles stratégies thérapeutiques sont largement étudiées, en particulier pour prolonger la fenêtre de temps thérapeutique. Ces recherches actuelles comprennent l’étude d’importantes voies physiopathologiques après un AVC, telles que l’inflammation post-AVC, l’angiogenèse, la plasticité neuronale et la régénération. Au cours de la dernière décennie, les groupes de recherche indépendants se sont de plus en plus préoccupés par la faible reproductibilité des résultats expérimentaux et des résultats scientifiques. Pour surmonter la soi-disant « crise de la réplication », des modèles standardisés détaillés pour toutes les procédures sont nécessaires de toute urgence. Dans le cadre d’un effort au sein du consortium de recherche « ImmunoStroke » (https://immunostroke.de/), un modèle murin standardisé d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne (MCAo) est proposé. Ce modèle permet la restauration complète du flux sanguin lors de l’élimination du filament, simulant la lyse thérapeutique ou spontanée des caillots qui se produit dans une grande proportion des accidents vasculaires cérébraux humains. La procédure chirurgicale de ce modèle d’AVC « filament » et les outils pour son analyse fonctionnelle sont présentés dans la vidéo d’accompagnement.
Introduction
L’AVC est l’une des causes les plus fréquentes de décès et d’invalidité dans le monde. Bien qu’il existe principalement deux formes distinctes d’AVC, ischémique et hémorragique, 80 à 85% de tous les cas d’AVC sont ischémiques1. Actuellement, seuls deux traitements sont disponibles pour les patients victimes d’AVC ischémique : le traitement pharmacologique avec un activateur tissulaire recombinant du plasminogène (rtPA) ou une thrombectomie mécanique. Cependant, en raison de la fenêtre de temps thérapeutique étroite et des multiples critères d’exclusion, seul un nombre restreint de patients peut bénéficier de ces options de traitement spécifique....
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Protocole
Les expériences rapportées dans cette vidéo ont été menées conformément aux directives nationales pour l’utilisation d’animaux de laboratoire, et les protocoles ont été approuvés par les comités gouvernementaux allemands (Regierung von Oberbayern, Munich, Allemagne). Des souris mâles C57Bl/6J âgées de dix semaines ont été utilisées et logées sous température contrôlée (22 ± 2 °C), avec une période de cycle lumière-obscurité de 12 h et un accès ad libitum aux aliments et à l’eau en granulés.
1. Préparation du matériel et des instruments
- Connectez la couverture chauffante pour maintenir la température de la zone d’opération....
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Résultats
Le modèle décrit ici est une modification du modèle de course « filament » couramment utilisé, qui consiste à introduire un filament recouvert de silicium à travers l’ECA pour bloquer transitoirement l’origine du MCA(Figure 1). Après avoir retiré le filament, seul le flux sanguin dans l’ECA est définitivement arrêté, ce qui permet une recanalisation complète du CCA et de l’ICA. Cela permet une reperfusion adéquate du cerveau(Figure 2),similaire à la situation ob.......
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Discussion
Le présent protocole décrit un modèle expérimental d’AVC basé sur l’accord consensuel d’un consortium de recherche multicentrique allemand (« ImmunoStroke ») pour établir un modèle MCAo transitoire standardisé. Le modèle transitoire MCAo établi en introduisant un filament recouvert de silicium à travers l’ECA à l’origine du MCA est l’un des modèles de course les plus largement utilisés pour obtenir une reperfusion artérielle après une période d’occlusion délimitée. Par conséquent, cette procédure peut être considérée com.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont pas d’intérêts concurrents à divulguer.
Remerciements
Nous remercions tous nos partenaires de collaboration des consortiums ImmunoStroke (FOR 2879, From immune cells to stroke recovery) pour leurs suggestions et discussions. Ce travail a été financé par la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, Fondation allemande pour la recherche) dans le cadre de la stratégie d’excellence de l’Allemagne dans le cadre du Cluster de Munich pour la neurologie des systèmes (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) et dans le cadre des subventions LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 et LL-112/1-1.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 45° ; rampe | H& S Kunststofftechnik | hauteur : 18 cm | |
| 5/0 menace | Pearsalls | 10C103000 | |
| 5 mL Seringue | Braun | ||
| Acide acétique | Sigma Life Science | 695092 | |
| Système d’anesthésie pour isoflurane | Dräger | ||
| Bepanthen pommade | Bayer | ||
| C57Bl/6J souris | Charles Pince | 000664 | |
| FST | 12500-12 | ||
| Clip | FST | 18055-04 | |
| Porte-clip | FST | 18057-14 | |
| Cotons | NOBA Verbondmitel Danz | 974116 | |
| Cresyl violet | Sigma Life Science | C5042-10G | |
| Cryostat | Thermo Scientific CryoStarNX70 | ||
| Éthanol 70 % | CLN Chemikalien Laborbedorf | 521005 | |
| Éthanol 96 % | CLN Chemikalien Laborbedorf | 522078 | |
| Éthanol 99 % | CLN Chemikalien Laborbedorf | ETO-5000-99-1 | |
| Filaments | Doccol | 602112PK5Re | |
| Fine 45 pince coudée | FST | 11251-35 | |
| Pince fine | FST | 11252-23 | |
| Ciseaux fins | FST | 14094-11 | |
| Colle | Orechseln | BSI-112 | |
| Durcisseur Colle | Drechseln & Mehr | BSI-151 | |
| Couverture chauffante | FHC DC Régulateur | ||
| Isoflurane | Abbot | B506 | |
| Isopentane | Fluka | 59070 | |
| Kétamine | Inresa Arzneimittel GmbH | ||
| Laser Doppler | Perimed | PF 5010 LDPM, Periflux System 5000 | |
| Sonde laser Doppler | Perimed | 91-00123 | |
| Phosphate Tamponné Saline pH : 7.4 | Apotheke Innestadt Uni München | P32799 | |
| Chambre de récupération | Mediheat | ||
| Roti-Histokit Milieu de montage Roth | 6638.1 | ||
| Solution saline | Braun | 131321 | |
| Scalpel | Feather | 02.001.30.011 | |
| Filaments recouverts de silicone | Doccol | 602112PK5Re | |
| Stéréomicropscope | Leica | M80 | |
| Superfrost Plus Lames | Thermo Scientific | J1800AMNZ | |
| Vannas Ciseaux à ressort | FST | 15000-00 | |
| Xylacine | Albrecht |
Références
- Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. Stroke. Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).
- O'Collins, V. E., et al. 1,026 experimental treatments in acute stroke. Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).
- Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J.
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Réimpressions et autorisations
