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Article de méthode

Plate-forme de culture d’organes du segment antérieur pour le suivi des blessures du globe ouvert et des performances thérapeutiques

1.7K vues

DOI :

10.3791/62649

25 août 2021

Dans cet article

Résumé

Les blessures oculaires du globe ouvert peuvent ne pas être traitées pendant plusieurs jours dans des scénarios ruraux ou militaires, entraînant la cécité. Des thérapies sont nécessaires pour minimiser la perte de vision. Ici, nous détaillons un modèle de lésion du globe ouvert de culture d’organes. Avec ce modèle, les traitements potentiels pour stabiliser ces blessures peuvent être correctement évalués.

Résumé

Les blessures du globe ouvert ont de mauvais résultats visuels, entraînant souvent une perte permanente de la vision. Cela est dû en partie à un délai prolongé entre la blessure et l’intervention médicale dans les environnements ruraux et les applications de la médecine militaire où les soins ophtalmiques ne sont pas facilement disponibles. Les blessures non traitées sont sensibles à l’infection après que l’œil a perdu son joint étanche, ainsi qu’à la perte de viabilité des tissus due à l’hypotension intraoculaire. Les thérapies pour sceller temporairement les blessures du globe ouvert, si elles sont correctement développées, peuvent être en mesure de rétablir la pression intraoculaire et de prévenir l’infection jusqu’à ce que des soins ophtalmiques appropriés soient possibles. Pour faciliter le développement de produits, voici l’utilisation d’une plate-forme de lésions à globe ouvert de culture d’organes du segment antérieur pour suivre les performances thérapeutiques pendant au moins 72 heures après la blessure. Le tissu du segment antérieur porcin peut être maintenu dans des boîtes de culture d’organes conçues sur mesure et maintenu à la pression intraoculaire physiologique. Les blessures par perforation peuvent être créées avec un système pneumatique capable de générer des tailles de blessures allant jusqu’à 4,5 mm de diamètre, similaires aux tailles de blessures liées à l’armée. La perte de pression intraoculaire peut être observée pendant 72 heures après la blessure, confirmant l’induction correcte de la blessure et la perte de l’étanchéité de l’œil. La performance thérapeutique peut être suivie par application à l’œil après l’induction de la blessure, puis en suivant la pression intraoculaire pendant plusieurs jours. De plus, le modèle de lésion du segment antérieur est applicable aux méthodes largement utilisées pour le suivi fonctionnel et biologique de la physiologie du segment antérieur, telles que l’évaluation de la transparence, de la mécanique oculaire, de la santé de l’épithélium cornéen et de la viabilité des tissus. Dans l’ensemble, la méthode décrite ici est une prochaine étape nécessaire vers le développement de biomatériaux thérapeutiques pour sceller temporairement les blessures du globe ouvert lorsque les soins ophtalmiques ne sont pas facilement disponibles.

Introduction

Les blessures à globe ouvert (OG) peuvent entraîner une perte permanente de la vision lorsqu’elles ne sont pas traitées ou au moins stabilisées après une blessure1. Les retards, cependant, sont fréquents dans les régions éloignées où l’accès à l’intervention ophtalmique n’est pas facilement disponible, comme dans les zones rurales ou sur le champ de bataille dans les scénarios militaires. Lorsque le traitement n’est pas facilement disponible, la norme de soins actuelle consiste à protéger l’œil avec un bouclier rigide jusqu’à ce qu’une intervention médicale soit possible. En médecine militaire, ce délai est actuellement jusqu’à 24 h, mais il de....

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Protocole

Avant d’effectuer ce protocole, sachez qu’il existe des exigences légales et éthiques pour l’utilisation des animaux dans la recherche et la formation. Si des animaux vivants sont utilisés pour la source de tissu oculaire, demandez l’approbation de l’autorité éthique ou légale locale (IACUC ou comité d’éthique, etc.) avant de commencer. S’il est question d’obtenir l’approbation pour l’utilisation d’animaux, ne continuez pas. Nous avons précédemment déterminé et rapporté que les yeux porcins frais obtenus et utilisés dans les 24 heures post-mortem se comparaient le plus près de la physiologie in vivo et s’en sortaient bien pour ces études (Animal Technologies,....

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Résultats

Des images capturées par tomographie par cohérence optique (OCT) sont montrées pour les yeux blessés OG afin d’illustrer à quoi ressemble une induction de blessure réussie. La figure 3 montre des images pour le contrôle et le tissu AS blessé OG immédiatement après la blessure et 72 h plus tard. Deux vues sont montrées : des images en coupe transversale à travers le site de la blessure et une projection d’intensité maximale (MIP) descendante pour visualiser la surface de l’image. Les yeux tém.......

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Discussion

Il y a des étapes critiques avec la plate-forme asoc OG sur les blessures qui devraient être mises en évidence pour améliorer les chances de succès lors de l’utilisation de la méthodologie. Tout d’abord, lors de la dissection du segment antérieur, la préservation du maillage trabéculaire est essentielle mais difficile à faire correctement. Si la MT est perturbée, l’œil ne maintiendra pas la pression physiologique et ne répondra pas aux critères d’admissibilité à une utilisation expérimentale. Il est recommandé de pratiqu.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs ne déclarent aucun intérêt concurrent. Les opinions exprimées dans cet article sont celles du ou des auteurs et ne reflètent pas la politique ou la position officielle du département médical de l’armée américaine, du département de l’armée, du ministère de la Défense ou du gouvernement américain.

Remerciements

Ce matériel est basé sur des travaux soutenus par le département de la Défense des États-Unis par le biais d’un accord inter-agences (# 19-1006-IM) avec le programme d’acquisition de réparation cornéenne temporaire (United States Army Medical Materiel Development Agency).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
10-32 Bouchon droit en polycarbonate, connecteur de tuyau fileté mâleMcMaster-Carr51525K431
10-32 Vis d’assemblage à six pans creux, ½ ; "McMaster-Carr92196A269
Seringue de 10 mLBD302995
seringue de 20 mLBD302830
Anti-AntiGibco15240-096
Clé en L à bout sphériqueMcMaster-Carr5020A25
BetadineFisher ScientificNC1696484
BD  ; Intramedic  ; PE 160 TubingFisher Scientific14-170-12E
Cotons-tigesPuritan25-8061WC
DMEM mediaATCC30-2002
FBSATCC30-2020
Pinces finesWorld Precision Instruments15914
GazeCovidien8044
GentamicineGibco15710-064
GlutamaxGibco35050-061
Joint torique en silicone haute température, 2 mm de large, 4 mm IDMcMaster-Carr5233T47
Grande pinceWorld Precision Instruments500365
Grands ciseaux chirurgicauxWorld Precision Instruments503261
Pince à dents moyennesWorld Precision Instruments501217
Clou (objet perforant)McMaster-Carr97808A503
Filtres à seringue en nylonFisher09-719C
PBSGibco10010-023
Boîte de Pétri (100 mm)FisherFB0875713
Polycarbonate, à trois voies, robinet d’arrêt avec robinet mâle luer  ; serrureFisherNC9593742
Lame de rasoirFisher12-640
Acier inoxydable 18 G  ; 90 degrés  ; aiguille de distribution d’angleMcMaster-Carr75165A81
Acier inoxydable 18 G droit ½ ; '’ aiguille de distributionMcMaster-Carr75165A675
Béchers stériles de 100 mL avec couverclesVWR15704-092
Vannas  ; ciseauxWorld Precision InstrumentsWP5070

Références

  1. Hilber, D., Mitchener, T. A., Stout, J., Hatch, B., Canham-Chervak, M. Eye injury surveillance in the US Department of Defense, 1996-2005. American Journal of Preventive Medicine. 38, 1 Suppl 78-85 (2010).
  2. Linde, A. S., McGinnis, L. J., Thompson, D. M.

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

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