Article de méthode

Un modèle intact de rongeur ischémique péricardique

DOI :

10.3791/62720

⸱

2 septembre 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Section of Cardiac Surgery, Department of Cardiac Sciences, Libin Cardiovascular Institute, Cumming School of Medicine, 2Department of Pharmacology and Physiology, University of Calgary

Dans cet article

Résumé

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ce protocole décrit les étapes pour induire un infarctus du myocarde chez la souris tout en préservant le péricarde et son contenu.

Résumé

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ce protocole a montré que le péricarde et son contenu jouent un rôle anti-fibrotique essentiel dans le modèle de rongeur ischémique (ligature coronaire pour induire une lésion myocardique). La majorité des modèles précliniques d’infarctus du myocarde nécessitent la perturbation de l’intégrité péricardique avec perte du milieu cellulaire homéostatique. Cependant, récemment, une méthodologie a été développée par nous pour induire l’infarctus du myocarde, ce qui minimise les dommages péricardiques et conserve la population de cellules immunitaires résidentes du cœur. Une amélioration de la récupération fonctionnelle cardiaque chez les souris ayant un espace péricardique intact après une ligature coronarienne a été observée. Cette méthode permet d’étudier les réponses inflammatoires dans l’espace péricardique à la suite d’un infarctus du myocarde. Le développement ultérieur des techniques de marquage peut être combiné avec ce modèle pour comprendre le devenir et la fonction des cellules immunitaires péricardiques dans la régulation des mécanismes inflammatoires qui entraînent le remodelage dans le cœur, y compris la fibrose.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

À ce jour, les maladies cardiovasculaires (MCV) sont reconnues comme la principale cause de décès dans le monde, entraînant un fardeau financier important et une réduction de la qualité de vie des patients1. La coronaropathie (CAD) est un sous-type de MCV et joue un rôle essentiel dans le développement de l’infarctus du myocarde (IM), qui est l’un des principaux contributeurs à la mortalité. Par définition, l’IM résulte d’une lésion irréversible du tissu myocardique due à des conditions prolongées d’ischémie et d’hypoxie. Le tissu myocardique manque de capacité de régénération, de sorte que les blessures sont permanentes et entraînent le rempla....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Protocole

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Des souris C57BL/6J mâles et femelles âgées de 8 à 14 semaines ont été utilisées pour ces expériences. Ce protocole a reçu l’approbation éthique du Comité de protection des animaux de l’Université de Calgary et respecte toutes les lignes directrices sur les soins aux animaux.

1. Préparation et chirurgie de la souris

  1. Stériliser les outils chirurgicaux (via un stérilisateur de billes ou un autoclave).
  2. Peser la souris pour le poids préchirurgical et la dose analgésique.
  3. Placez la souris dans une boîte à induction contenant 4 % d’isoflurane et 800 mL/min d’oxygène. Confirmez le plan anesthésique en pinçant les orte....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ce modèle modifié de ligature coronaire a été optimisé pour atteindre la reproductibilité et la survie des animaux. Cependant, en raison de la blessure importante induite dans le cœur, une certaine mortalité peropératoire et postopératoire attendue est associée à la procédure. La mortalité standard est généralement plus élevée chez les hommes (~25-35%) que chez les femmes (~ 10-15%).

L’induction réussie d’un IM avec la ligature coronaire modifiée devrait être évidente par des changements dans .......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L’induction d’un IM dans un péricarde fermé chez les rongeurs est unique et peut avoir des applications potentiellement importantes. La procédure repose fortement sur la familiarité du chirurgien avec le modèle de rongeur et l’anatomie cardiaque des rongeurs. Le succès dépend également des soins prodigués au cours de trois étapes critiques: l’incision musculaire intercostale et la rétraction des côtes (étapes 1.11-1.13), la création de l’infarctus (étape 1.17) et la récupération de l’animal (étapes 1.22-1.24).

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs n’ont aucun conflit à révéler.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Stérilisateur à billes Steri-350InotechNC9449759
10 % formolMillipore SigmaHT501128-4L
40 µ ; m Crépine à cellulesVWRCA21008-949Falcon, 352340
70 µ ; m Filtre cellulaireVWRCA21008-952Falcon, 352350
ACK Tampon de lyseThermo FisherA1049201
BD Insyte-W Aiguille de cathéter 24 G X 3/4"CDMV Inc108778
Bétadine (solution topique de povidone iodée à 10 %)CDMV Inc104826
Pince émousséeOutils de haute scienceFST 11000-12
BNP Pommade ophtalmiqueCDMV Inc17909
Castroviejo Needle DriverOutils de sciences finesFST 12061-01
Centrifugeuse 5810REppendorf22625101
Collagenase IMillipore SigmaSCR103
Collagenase XIMillipore SigmaC7657
Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 Aiguille coniqueMedtronic CanadaGL-890
Covidien 5-0 Suture Polysorb - PC-13 Aiguille coupanteMedtronic CanadaSL-1659
Pince émoussée incurvéeOutils de sciences finesFST 11009-13
Dako Montage MoyenAgilenCS70330-2
DNase IMillipore Sigma11284932001
Éthanol, 100 %Millipore SigmaMFCD00003568
Ethicon 8-0 Suture Ethilon - BV-130-4 aiguille coniqueJohnson & Johnson Inc.2815G
Lampe à fibre optiqueNikon2208502
Pince fineOutils scientifiques finsFST 11150-10
Fluoresbrite® ; Microsphères de carboxylate YG 1,00 & micro ; mPolysciences, Inc.15702
Unité de cauctérisation thermique GeigerWorld Precision Instruments501293Modèle 150-ST
HyaluronidaseMillipore SigmaH4272
Vaporisateur isofluoraneHarvard Apparatus75-0951
Isoflurane USP, 250 mLCDMV Inc108737
Fixateur magnétique Système de rétractionOutils scientifiques fins18200-20
MX550D- Sonde 40 MHzFujifilm- Visual Sonics
Needle DriverFine Science ToolsFST 12002-12
PE-10 TubingBraintree Scienctific, Inc.PE10 50 FT
CiseauxOutils de sciences finesFST 14184-09
SMZ-1B StéréomicroscopeNikonSMZ1-PS
VentElite Ventilateur pour petits animauxHarvard Apparatus55-7040
Vetergesic (10 mL, 0,3 mg/mL buprénorphine))CDMV Inc124918médicament contrôlé
Vevo 2100 LogicielFujifilm-Visual Sonics

Références

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 141, 139(2020).
  2. Iismaa, S. E., et al. Comparative regenerative mechanisms across different m....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Réimpressions et autorisations

Demander l’autorisation de réutiliser le texte ou les figures de cet article JoVE

Demander une autorisation

Mots-clés

Mod le de p ricarde intactinfarctus du myocardeligation coronariennefibrose cardiaquemacrophages p ricardiquescytom trie en fluxvaluation par chocardiographiecoloration au rouge de Picrosiriustra age de lignageremodelage cardiaque

Articles connexes