Stimulation durale et test de von Frey périorbitaire chez la souris en tant que modèle préclinique de maux de tête

Résumé

Le symptôme le plus notable de la migraine est une douleur intense à la tête, et on suppose que cela est médié par des neurones sensoriels innervant les méninges. Ici, nous présentons une méthode pour appliquer localement des substances à la dure-mère d’une manière peu invasive tout en utilisant l’hypersensibilité faciale comme sortie.

Résumé

On pense que les méninges crâniennes, composées de la dure-mère, de l’arachnoïde et de la pia mater, servent principalement des fonctions structurelles pour le système nerveux. Par exemple, ils protègent le cerveau du crâne et ancrent/organisent l’approvisionnement vasculaire et neuronal du cortex. Cependant, les méninges sont également impliquées dans des troubles du système nerveux tels que la migraine, où la douleur ressentie pendant une migraine est attribuée à une inflammation stérile locale et à l’activation ultérieure des afférences nociceptives locales. Parmi les couches dans les méninges, la dure-mère présente un intérêt particulier pour la physiopathologie des migraines. Il est très vascularisé, abrite des neurones nociceptifs locaux et abrite un large éventail de cellules résidentes telles que les cellules immunitaires. Des changements subtils dans le microenvironnement méningé local peuvent entraîner l’activation et la sensibilisation des nocicepteurs périvasculaires duraux, entraînant ainsi des douleurs migraineuses. Des études ont cherché à examiner comment les afférences durales sont activées / sensibilisées en utilisant soit l’électrophysiologie in vivo, des techniques d’imagerie ou des modèles comportementaux, mais ceux-ci nécessitent généralement des chirurgies très invasives. Ce protocole présente une méthode pour l’application relativement non invasive de composés sur la dure-mère chez la souris et une méthode appropriée pour mesurer la sensibilité tactile semblable à des maux de tête en utilisant des tests de von Frey périorbitaires après stimulation durale. Cette méthode maintient l’intégrité de la dure-mère et du crâne et réduit les effets de confusion des techniques invasives en injectant des substances à travers une canule modifiée de 0,65 mm à la jonction de sutures sagittales et lambdoïdes non fusionnées. Ce modèle préclinique permettra aux chercheurs d’étudier un large éventail de stimuli duraux et leur rôle dans la progression pathologique de la migraine, tels que l’activation des nocicepteurs, l’activation des cellules immunitaires, les changements vasculaires et les comportements douloureux, tout en maintenant des conditions sans blessure au crâne et aux méninges.

Introduction

La douleur migraineuse reste un problème de santé publique majeur dans le monde entier. L’Organisation mondiale de la santé la classe au sixième rang des maladies les plus répandues dans le monde, touchant un peu moins de 15 % de la population de la Terre¹ et causant un fardeau socio-économique important à la société ^2,3. Les options de traitement et leur efficacité ont été sous-optimales et ne procurent qu’un soulagement symptomatique et ne modifient pas de manière significative les événements physiopathologiques qui sous-tendent l’apparition de^{migraines 4,....}

Protocole

Toutes les procédures ont été menées avec l’approbation préalable du comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université du Texas à Dallas. Des souris ICR (CD-1) (30-35 g) et C57/BL6 (25-30 g) âgées de 6 à 8 semaines ont été utilisées dans cette étude.

1. Infuseur dural

1. Créez les infuseurs/injecteurs de souris en modifiant une canule interne et un infuseur disponibles dans le commerce pour des injections unilatérales avec un capuchon en plastique de silice fondue non métallique réglable et inséré dans/s’étendant en dessous d’une canule guide de 28 G avec un diamètre intérieur (I.D.) de 0,18 mm et un diamètr....

Résultats

Cette méthode d’injection est utilisée pour administrer des stimuli sur la dure-mère de souris afin que des tests comportementaux ultérieurs puissent avoir lieu. Le résultat comportemental le plus courant mesuré avec ce modèle est l’hypersensibilité faciale cutanée évaluée via von Frey 12,13,14. Nous montrons ici comment ce modèle peut être utilisé pour évaluer les contributions potentielles spécifiques au sexe à la pathologie m.......

Discussion

Les changements inadaptés dans le système nociceptif local dans la dure-mère sont considérés comme un contributeur clé à la phase de maux de tête des crises de migraine malgré l’absence de lésion tissulaire^25,26. Ici, l’étude présente une méthode par laquelle la stimulation mini-invasive de la dure-mère peut induire une hypersensibilité tactile faciale. Élucider les mécanismes et les événements impliqués dans l’activation des nocicepteurs duraux sans causer de do.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Gobelets en papier chaud de 4 oz	Choice Paper Company	5004W	https://www.webstaurantstore.com/choice-4-oz-white-poly-paper-hot-cup-case/5004W.html
Coussinets absorbants	Fisherbrand	14-206-65	https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-absorbent-underpads-8/p-306048
C313I/SPC Canule interne de 28 G	P1 Technologies (anciennement Plastics One)	8IC313ISPCXC	D.I. 18 mm, D.E. 35 mm
Étanche aux gaz Modèle 1701 SN Seringues	Hamilton	80008	https://www.hamiltoncompany.com/laboratory-products/syringes/80008
Tube de pompe Ismatec, 0,19 mm	Cole-Palmer	EW-96460-10	Support https://www.coleparmer.com/i/ismatec-pump-tubing-2-stop-tygon-s3-e-lab-0-19-mm-id-12-pk/9646010
avec grillage à poule	Custom		Les dimensions du grillage à poule en acier galvanisé sont de 0,25 po. x Rack d’essai de calibre 19
avec Chaque			pour contenir la souris. Les chambres doivent également être suffisamment grandes pour contenir un gobelet en papier de 4 oz.
von Frey Filaments	Touch test/Stoelting	58011	https://www.stoeltingco.com/touch-test.html

chambre doit avoir une division entre chaque souris et des couvercles