Évaluation des dyskinésies induites par la L-DOPA dans le modèle unilatéral de la maladie de Parkinson chez le rat à 6-OHDA

Résumé

Les modèles de dyskinésies induites par la L-DOPA chez les rongeurs sont des outils précieux pour identifier les interventions thérapeutiques visant à atténuer le développement ou à atténuer les manifestations qui émergent en raison de l’administration répétée de L-DOPA. Ce protocole démontre comment induire et analyser des mouvements de type dyskinétique dans le modèle unilatéral de la maladie de Parkinson chez le rat 6-OHDA.

Résumé

Les dyskinésies induites par la L-DOPA (LID) font référence aux complications motrices résultant de l’administration prolongée de L-DOPA à des patients atteints de la maladie de Parkinson (MP). Le schéma le plus couramment observé dans la clinique est la dyskinésie à dose de pointe qui consiste en des manifestations cliniques de mouvements choreiformes, dystoniques et balistiques. Le modèle de MP chez le rat 6-hydroxydopamine (6-OHDA) imite plusieurs caractéristiques des LID. Après administration répétée de L-DOPA, les rats atteints de 6-OHDA présentent des mouvements dyskinétiques (p. ex. mouvements involontaires anormaux, AIM). Ce protocole démontre comment induire et analyser les AIM chez des rats atteints de 6-OHDA présentant une déplétion dopaminergique de 90 % à 95 % dans la voie nigrostriale . L’administration répétée (3 semaines) de L-DOPA (5 mg/kg, associée à 12,5 mg/kg de bensérazide) peut induire le développement de MARI. L’analyse de l’évolution temporelle révèle une augmentation significative des AIM à 30-90 min (dyskinésie de la dose de pointe). Les modèles de DIL chez les rongeurs sont un outil préclinique important pour identifier des interventions antidyskinétiques efficaces.

Introduction

Le précurseur de la dopamine L-3,4-dihydroxyphénylalanine (L-DOPA) représente le traitement le plus efficace pour les symptômes moteurs de la maladie de Parkinson (MP)¹. La thérapie L-DOPA peut améliorer les symptômes moteurs associés à la MP, mais perd de son efficacité avec le temps. Les fluctuations motrices telles que la « fluctuation de l’usure » ou la « détérioration en fin de dose » se manifestent cliniquement par une durée raccourcie de l’effet des doses uniques de L-DOPA². Dans d’autres cas, les manifestations cliniques consistent en des mouvements de torsion lents et des postures anormales (dystonie)

Protocole

Toutes les expériences ont été réalisées conformément au Comité d’éthique de la Faculté de philosophie, des sciences et des lettres de Ribeirão Preto (CEUA/FFCLRP 18.5.35.59.5).

1. Lésion 6-OHDA

1. Utilisez des rats mâles Sprague-Dawley pesant de 200 à 250 g au début des expériences (6 semaines). Hébergez les animaux (2-3 par cage) dans des conditions de laboratoire standard (12:12 h cycle lumière/obscurité, lumières allumées à 06:00 h, installations à température contrôlée (22-24 °C), avec de la nourriture et de l’eau disponibles ad libitum.
   REMARQUE : Une description complète de la façon de générer des ....

Résultats

Bien que les profils de MAA observés chez le rat soient plus simples et limités que ceux observés chez les humains et les primates non humains, ce modèle reproduit à la fois les mouvements hyperkinétiques et dystoniques induits par l’administration chronique de L-DOPA. Nous présentons ici les données recueillies auprès d’un groupe (n = 10) de rats unilatéraux atteints de 6-OHDA traités de façon chronique avec de la L-DOPA (5 mg/kg combinés à 12,5 mg/kg de bensérazide) pendant 3 semaines (du lundi au vendredi). Notez que .......

Discussion

Ce protocole démontre comment induire et analyser les MAA dans le modèle de DP induite par microinjection unilatérale de 6-OHDA dans la MFB chez le rat. L’administration quotidienne chronique de faibles doses de L-DOPA (5 mg/kg, combiné à 12,5 mg/kg de bensérazide) a entraîné le développement de MIA au cours des 3 semaines de traitement. L’analyse temporelle a révélé une augmentation significative des AIM et la dyskinésie de la dose de pointe est observée entre 30 et 90 minutes après l’administration de L-DOPA. Les AIM s.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Bromhydrate de 6-hydroxydopamine	Sigma-Aldrich, États-Unis	H6507	Neurotoxine qui produit la dégénérescence des terminaisons catécholaminergiques Chlorhydrate de
benzerazide	Sigma	B7283	Inhibiteur périphérique de la dopa-décarboxylase
Caméra Bullet IR Turbo HD (HD-TVI)  ; 2.8mm B	HIKVISION	DS-2CE16C0T-IRP	Caméra utilisée pour enregistrer tous les comportements
Imipramine hidrochlorure	Alfa Aesar	J63723	Inhibiteur du transporteur de noradrénaline (TNE) utilisé pour protéger les neurones noradrénergiques contre le chlorhydrate de kétamine 6-OHDA
	Ceva Santé		Anesthésie pour intervention chirurgicale
L-3,4-dihydroxyphénylalanine (L-DOPA) ester méthylique (chlorhydrate)	Cayman Chemical Company	16149	Précurseur de la dopamine
Miroirs			Utilisé pour observer le comportement des animaux lors d’expériences dans toutes les directions
Aiguilles 0,30 x 13 mm	PrecisionGlide	Aiguilles utilisées pour l’injection de médicaments
sodium (NaCl)	sel	Samtec
1 ml Seringues BD	Plastipak		stériles Utilisées pour l’injection de médicaments
Cylindres transparents			expériences
Chlorhydrate de xylazine	Ceva Santé		Sédatif, analgésique et relaxant musculaire pour intervention chirurgicale

animale Chlorure de Seringues de Utilisés pour enregistrer le comportement des animaux pendant les animale