L’acquisition répétée d’échantillons de sang de petits animaux de laboratoire, tels que des rongeurs, des cochons d’Inde et des lapins, est un aspect important pour l’optimisation du plomb pharmaceutique et pour réduire le nombre d’animaux utilisés dans la recherche 1,2. Le pipeline de développement de nouveaux outils de diagnostic et de la formulation de médicaments (par exemple, un vaccin) nécessite l’accès à différents volumes de sang afin d’évaluer leur robustesse et leur performance in vivo, tels que la pharmacocinétique (PK), la toxicité et la sensibilité 3,4,5.
L’approche de laboratoire pour le prélèvement d’échantillons de sang est généralement classée en deux types, chirurgical et non chirurgical6. L’approche non chirurgicale est relativement facile à comprendre pour le chercheur, qui comprend des techniques courantes, telles que la ponction cardiaque, la ponction des sinus orbitaux et le saignement de la veine saphène et de la veine caudale. Le prélèvement sanguin multiple est possible par certaines méthodes non chirurgicales, mais le volume de l’échantillon est faible et peut causer des plaies physiques et un stress psychologique aux animaux1. D’autre part, l’approche chirurgicale est une alternative préférée à la ponction veineuse répétée, et elle implique la mise en place d’une canule temporaire ou permanente dans les vaisseaux sanguins des animaux 7,8,9. Le grand volume sanguin pourrait être retiré à plusieurs reprises à travers la canule chez les rats conscients tout en évitant le stress et la douleur dus à la technique de manipulation, à la retenue et à l’anesthésie 7,8,10,11. Cependant, l’implantation de la canule nécessite un chercheur expérimenté avec une formation adéquate afin de recueillir avec succès le sang.
La collecte de sang par canulation veineuse jugulaire (JVC) chez le rat est la méthode la plus largement utilisée pour étudier le médicament PK 6,10,12,13. Pourtant, l’établissement du modèle de rat JVC nécessite une pratique minutieuse des compétences microchirurgicales et une connaissance des soins et de l’entretien postchirurgicaux. En particulier, après la chirurgie, le rat a besoin de l’administration d’analgésiques et d’un temps de récupération suffisant pour atteindre un état physiologique stable pour d’autres expériences 13,14,15. Bien que le gain de poids corporel (c.-à-d. >10 g) soit un indicateur valide et couramment appliqué pour le rétablissement du rat, il n’est pas rare que les rats meurent subitement après l’opération en raison de la déshydratation, de l’infection et de l’inflammation, ce qui pourrait être subtil à remarquer au débutprécoce 14,15. De plus, l’obstruction du cathéter dans le modèle JVC reste un problème lors de la collecte de sang.
Le présent protocole a démontré en détail les procédures microchirurgicales pour JVC chez un rat anesthésié avec un accent particulier sur l’identification, l’isolement et la canulation de la veine jugulaire. L’importance de la surveillance physiologique et hématologique des rats pendant la phase de récupération est soulignée. Enfin, des échantillons de sang en série ont été prélevés à travers le cathéter veineux pour étudier la PK de l’acide ellagique phénolique naturel administré par voie orale avec une faible biodisponibilité (c.-à-d. une faible concentration systémique) afin de vérifier le modèle de rat JVC.