Compétences microchirurgicales pour établir une canulation veineuse jugulaire permanente chez le rat pour le prélèvement sanguin en série d’un médicament administré par voie orale

Résumé

Des techniques microchirurgicales détaillées sont démontrées pour établir un modèle de canulation de la veine jugulaire à plus long terme pour la collecte séquentielle de sang chez le même animal. Les paramètres physiologiques et hématologiques ont été surveillés pendant la phase de récupération du rat. Ce modèle a été appliqué pour étudier la pharmacocinétique du polyphénol administré par voie orale sans induire de stress animal.

Résumé

Le prélèvement sanguin chez de petits animaux de laboratoire est nécessaire pour l’optimisation du plomb pharmaceutique, mais peut causer beaucoup de dommages et de stress aux animaux de laboratoire, ce qui pourrait potentiellement affecter les résultats. La canulation veineuse jugulaire (JVC) chez le rat est un modèle largement utilisé pour la collecte répétée de sang, mais nécessite une formation adéquate des compétences chirurgicales et des soins aux animaux. Cet article détaille les procédures microchirurgicales pour établir et maintenir un modèle permanent de rat JVC avec un accent particulier sur le placement et l’étanchéité de la canule jugulaire. L’importance de surveiller les paramètres physiologiques (p. ex., le poids corporel, la nourriture et la consommation d’eau) et hématologiques a été soulignée avec des résultats présentés pendant 6 jours après la chirurgie pendant le rétablissement du rat. Le profil concentration-temps médicament-plasma de l’acide phénol ellagique naturel administré par voie orale a été déterminé dans le modèle de rat JVC.

Introduction

L’acquisition répétée d’échantillons de sang de petits animaux de laboratoire, tels que des rongeurs, des cochons d’Inde et des lapins, est un aspect important pour l’optimisation du plomb pharmaceutique et pour réduire le nombre d’animaux utilisés dans la recherche ^1,2. Le pipeline de développement de nouveaux outils de diagnostic et de la formulation de médicaments (par exemple, un vaccin) nécessite l’accès à différents volumes de sang afin d’évaluer leur robustesse et leur performance in vivo, tels que la pharmacocinétique (PK), la toxicité et la sensibilité

Protocole

Les procédures décrites ci-dessous ont été effectuées dans le cadre d’un protocole approuvé par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de la Northwestern Polytechnical University (no 202101117).

1. Préparation préopératoire (la veille de la chirurgie)

REMARQUE: Solutions requises: solution saline normale (0,9% p / v de chlorure de sodium), solution saline héparinisée (1% p / v d’héparine sodique), solution de verrouillage de cathéter, anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), comme la solution de méloxicam (2 mg / mL).

1. Préparation de la solution
   1. Aliquote ....

Résultats

Ce protocole a démontré en profondeur comment établir un modèle JVC à long terme en utilisant des compétences microchirurgicales pour la collecte de sang en série. La figure 1A montre les instruments chirurgicaux essentiels et le matériel utilisé pour effectuer la chirurgie. La spécification du cathéter PU avec trois marques bleues est également illustrée, ce qui est utile pour guider le chercheur à placer la canule veineuse à l’étape 3.3., comment utiliser les marques sur le cathét.......

Discussion

Maîtriser la technique de la canulation des navires nécessite une pratique importante et l’apprentissage de la leçon de chaque opération. Christakis et al. en utilisant l’analyse de somme cumulative (CUSUM), ont constaté qu’un chercheur doit pratiquer 200 rats sur une période d’un an avant d’être prêt pour l’évaluation PK des candidats médicaments²⁰. Pourtant, le temps d’opération requis pour la canulation veineuse peut être considérablement réduit par le nombre de rats^{effectués .......}

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Tube à essai de 0,5 mL contenant un anticoagulant EDTA	Xinkang	N/A	prélevant des échantillons de sang pour un test d’hématologie
Seringue de 0,5 * 20 mm de 1,0 mL	KLMEDICAL	N/	A lavage ou remplacement du liquide par une solution saline
Seringue de 0,6 * 28,5 mm de 5,0 mL	HD	HD N/A	Injection sous-cutanée
Seringue à bout émoussé de 1,0 mL (22G)	skillsmodel	S4-PKT22G	Injecter la solution saline et prélever des échantillons de sang à l’aide d’un cathéter
Tube de microcentrifugation stérile de 1,5 mL	Axygen	MCT-150-C-S	Stocker une solution saline héparinée de cathéter et une solution de méloxicam
1,5 ; mL microcentrifugeuses	tubes Biosharp	BS-15-M	prélèvement sanguin
1/2  ; cercle coupe 5*12 mm aiguille de suture	compétencesmodèle	S4-FHZ	Enfiler la couche musculaire pour fixer le cathéter
3/8 coupe de cercle 7*17 mm aiguille de suture	compétencesmodèle	S5-FHZ	Suture l’incision du cortex du rat
6-0 fil de suture en soie stérile non résorbable	JUNSHENG	N/A	ligature
75 % d’alcool médical	HONGSONG	N/A	Désinfection
Ruban adhésif	LIUTAI	N/	A positionnement du rat
Ruban de stérilisation autoclave	Biosharp	BS-QT-028	Marquer les articles stérilisés
Compteur automatisé de cellules sanguines	Sysmex	XN-550	Test d’hématologie
Castroviejo micro ciseaux	compétencesmodel	WA1010	Couper l’ouverture dans le vaisseau sanguin
Centrifugeuse	Thermo Fisher Scientific	75002402	Préparation du plasma
Nettoyer le coussin	Qingjie N	/A	Préparer la zone d’opération
Boules de coton	HC	N/A	Désinfection et stérilisation des plaies
Cotons-tiges	BEITAGOGO	N/A
Désinfection Hémostat incurvé	skillsmodel	N/A	ligature
DN50 Dispositif de contention de rats en acier inoxydable	skillsmodel	S4-RGDQ1	Restreindre les mouvements des rats pour une utilisation facile
Acide ellagique	Aladdin	E102710-25g	phénol naturel pour administration orale
Pince semi-courbée	skillsmodel	53072	Soulever la couche musculaire et les tissus, isoler la veine jugulaire et attacher la suture
Coussin chauffant	Warm mate	N/A	empêchant la perte de chaleur de l’animal
Héparine sodique	Solarbio	H8060	anticoagulant
Iodophor	Xidebao	N/A	Nettoyer la plaie
Ciseaux à iris	compétencesmodel	54002	Séparation émoussée de la couche musculaire
Isoflurane	RWD	R510-22-16	Lampe
	LED d’anesthésieEMPERORFEEL	N/	A ugery
Chromatographie liquide-spectroscopie de masse	Thermo Fisher Scientific	VQF01-20001/ TSQ02-10002	détection de la concentration de médicament dans le plasma
Méloxicam	Hongqiang N	/A	Analgésique
Saline normale	KL	N/A	Préparer la solution et protéger les vaisseaux sanguins de l’assèchement
Rasoir pour animaux de compagnie	Codos	3180	Rasage de la fourrure
Solution saline tamponnée au phosphate	ZHHC	PW012	Préparation d’une solution d’acide ellagique
Cathéter PU	Compétencesmodèle	RJVC-PU	Canulation de la veine jugulaire
Opération pour petits animaux Console d’anesthésie	RWD	68620	Poste de travail
Opération Flacon pulvérisateur	Autre	N/A	Poste de travail aseptique
Bouchon en acier inoxydable (22G)	compétencesmodèle	S4-PKD22G	Boucher le cathéter pour assurer son étanchéité
Compétences en trochar en acier inoxydablemodèle		S$-PKDGZ	Guider l’extériorisation du cathéter
Solution de verrouillage stérile	Compétencesmodèle	SK-FB	Verrouillage du cathéter pour assurer sa stérilité
Aiguille d’alimentation droitemodèle		N/A	Gavage oral
Poche chirurgicale	BKMAM	N/A	récipient pour la stérilisation des instruments chirurgicaux
Ciseaux chirurgicaux	compétencesmodèle	J21070	Incision coupée sur la peau du rat
Dilatateur de vaisseau Pince équilibrée	compétencesmodèle	WA3020	Élargir le vaisseau sanguin et guider la canule pour glisser
ZS-MV Appareil d’anesthésie pour petits animaux	ZSLab	1057003	induction et maintien de l’anesthésie