Évaluation thérapeutique de la transplantation de microbiote fécal dans un modèle murin déficient en interleukine 10

Résumé

L’interaction de la susceptibilité génétique, de l’immunité muqueuse et de l’environnement microécologique intestinal est impliquée dans la pathogenèse des maladies inflammatoires de l’intestin (MII). Dans cette étude, nous avons appliqué la transplantation de microbiote fécal à des souris déficientes en IL-10 et étudié son impact sur l’inflammation colique et la fonction cardiaque.

Résumé

Avec le développement de la microécologie au cours des dernières années, la relation entre les bactéries intestinales et les maladies inflammatoires de l’intestin (MII) a attiré une attention considérable. L’accumulation de preuves suggère que le microbiote dysbiotique joue un rôle actif dans le déclenchement ou l’aggravation du processus inflammatoire dans les MII et que la transplantation de microbiote fécal (FMT) est une stratégie thérapeutique attrayante puisque le transfert d’un microbiote sain à un patient atteint de MII pourrait rétablir la communication hôte-microbiote appropriée. Cependant, les mécanismes moléculaires ne sont pas clairs et l’efficacité de la FMT n’a pas été très bien établie. Par conséquent, d’autres études sur des modèles animaux de MII sont nécessaires. Dans cette méthode, nous avons appliqué la FMT de souris C57BL / 6J de type sauvage à des souris déficientes en IL-10, un modèle murin largement utilisé de colite. L’étude porte sur la collecte de granulés fécaux sur les souris donneuses, la fabrication de la solution / suspension fécale, l’administration de la solution fécale et la surveillance de la maladie. Nous avons constaté que la FMT atténuait significativement l’insuffisance cardiaque chez les souris knock-out IL-10, soulignant son potentiel thérapeutique pour la prise en charge des MII.

Introduction

Le micro-écosystème intestinal humain est extrêmement complexe, avec plus de 1000 espèces de bactéries dans l’intestin d’une personne en bonne santé¹. La flore intestinale est impliquée dans le maintien des fonctions physiologiques normales de l’intestin et de la réponse immunitaire et a une relation inséparable avec le corps humain. L’accumulation de preuves suggère que le microbiome intestinal constitue le dernier organe humain, qui fait partie du corps humain, pas seulement un groupe de parasites². Une relation symbiotique « saine » entre le microbiote intestinal, ses métabolites et le système immunitaire de l’hôte ét....

Protocole

Toutes les procédures effectuées sur les animaux ont été approuvées par le Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux de la branche médicale de l’Université du Texas à Galveston (Protocole # 1512071A).

1. Collecte de granulés fécaux frais

1. Préparez des serviettes en papier stériles, des pinces à extrémité émoussée et des tubes coniques de 50 mL.
   1. Placer des serviettes en papier et des pinces dans des sacs d’autoclave séparés et les autoclaver à 180 °C à feu sec pendant 30 min. Utilisez également des tubes coniques stériles. Pesez les tubes coniques et notez leur poids sur les tubes.

Résultats

Nous avons effectué une FMT de donneur sain 3 fois (une fois par mois pendant 3 mois) sur des souris C57BL/6J de type sauvage (WT) et IL-10 âgées de 2 mois. Des souris C57BL/6J appariées selon l’âge (la différence d’âge devrait être de <2 mois) ont servi de donneurs fécaux et des granulés fécaux frais ont été utilisés à chaque fois. Les tests EIA ont révélé que le BNP était nettement élevé dans le plasma des souris déficitaires en IL-10 et que la TMF d’un donneur sain atténuait significativement l’augmentation des tau.......

Discussion

En tant que traitement expérimental innovant, la FMT est devenue un sujet brûlant dans le traitement de divers troubles ces dernières années, car la dysbiose du microbiote commensale est impliquée dans la pathogenèse de multiples maladies humaines, notamment les MII, l’obésité, le diabète sucré, l’autisme, les maladies cardiaques et le cancer²⁶. Bien que le mécanisme n’ait pas été déterminé, on pense que la FMT agit en construisant une nouvelle flore biologique et en empêchant la perte de bactérie.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
BD Seringue, 1 mL	Fisher Scientific	14-829-10F
Pince à bout émoussé	Knipex	926443
Brain natriurétique peptide EIA kit	Sigma	RAB0386
C57BL/6J	Jackson Lab	000664
Centrifugeuse	Eppendorf	5415R
Tubes coniques	ThermoFisher	339650
Aiguilles d’alimentation incurvées	Kent Scientific	FNC-20-1.5-2
GLH-115 homogénéisateur	Omni International	GLH-115
Glycérol	MilliporeSigma	G5516
IL-10 souris knock-out	Jackson Lab	004366
Isoflurane	Piramal Soins intensifs	NDC66794-017-10
USP normal salin	Grainger	6280
Vaporisateur	Euthanex Corp.	EZ-108SA

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