Utilisation d’une injection de traceur cellulaire pour étudier l’origine des cellules formant neointima dans un modèle de paroi latérale sacculaire de rat

Stefan Wanderer; Basil E. Grüter; Jeannine Kümin; Gwendoline Boillat; Sivani Sivanrupan; Kristina Catalano; Michael von Gunten; Hans Rudolf Widmer; Serge Marbacher; Lukas Andereggen

doi:10.3791/63580

Article de méthode

Utilisation d’une injection de traceur cellulaire pour étudier l’origine des cellules formant neointima dans un modèle de paroi latérale sacculaire de rat

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DOI :

10.3791/63580

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16 mars 2022

Stefan Wanderer^*¹^,² , Basil E. Grüter^*¹^,² , Jeannine Kümin¹^,² , Gwendoline Boillat¹^,² , Sivani Sivanrupan² , Kristina Catalano¹^,² , Michael von Gunten³ , Hans Rudolf Widmer⁴ , Serge Marbacher¹^,²^,⁵ , Lukas Andereggen¹^,²^,⁵

¹Department of Neurosurgery, Kantonsspital Aarau, ²Cerebrovascular Research Group, Department for BioMedical Research, University of Bern, ³Institute of Pathology Laenggasse, ⁴Department of Neurosurgery, Neurocenter and Regenerative Neuroscience Cluster, Inselspital, Bern University Hospital, University of Bern, ⁵Faculty of Medicine, University of Bern

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Nous avons effectué une injection de traceur cellulaire lipophile en un point pour suivre les cellules endothéliales, suivie d’une artériotomie et de la suture d’anévrismes de la paroi latérale sur l’aorte abdominale du rat. La formation de Néoinntima semblait dépendre de l’artère mère dans les anévrismes décellularisés et était favorisée par le recrutement de cellules de la paroi de l’anévrisme dans les parois riches en cellules vitales.

Résumé

La coupure microchirurgicale crée une barrière ultérieure du flux sanguin dans les anévrismes intracrâniens, tandis que le traitement endovasculaire repose sur la formation de néoinntima et de thrombus. La source des cellules endothéliales recouvrant la couche endoluminale du néointame reste incertaine. Par conséquent, l’objectif de la présente étude était d’étudier l’origine des cellules formant le néoinntima après injection de traceur cellulaire dans le modèle d’anévrisme microchirurgical de la paroi latérale du rat d’Helsinki déjà bien établi.

Les anévrismes des flancs ont été créés en suturant des poches artérielles décellularisées ou vitales côte à côte de l’aorte chez les rats Lewis mâles. Avant l’artériotomie avec suture d’anévrisme, une injection de traceur cellulaire contenant du colorant CM-Dil a été effectuée dans l’aorte serrée pour marquer les cellules endothéliales dans le vaisseau adjacent et suivre leur prolifération pendant le suivi (FU). Traitement suivi d’un enroulement (n = 16) ou d’une endoprothèse (n = 15). À FU (7 jours ou 21 jours), tous les rats ont subi une angiographie par fluorescence, suivie d’une récolte d’anévrisme et d’une évaluation macroscopique et histologique avec un nombre de cellules immunohistologiques pour des régions d’intérêt spécifiques.

Aucun des 31 anévrismes ne s’était rompu lors du suivi. Quatre animaux sont morts prématurément. Une perfusion macroscopiquement résiduelle a été observée chez 75,0 % de rats enroulés et 7,0 % de rats stentés. La quantité de cellules cell-tracer-positives était significativement élevée dans les stents décellularisés par rapport aux anévrismes enroulés en ce qui concerne le thrombus au jour 7 (p = 0,01) et le néointame au jour 21 (p = 0,04). Aucune différence significative n’a été trouvée dans le thrombus ou le néointame dans les anévrismes vitaux.

Ces résultats confirment des schémas de guérison pires dans les anévrismes enroulés par rapport aux anévrismes à stent. La formation de Neointima semble particulièrement dépendante de l’artère mère dans les anévrismes décellularisés, alors qu’elle est soutenue par le recrutement à partir des cellules de la paroi de l’anévrisme dans les parois riches en cellules vitales. En termes de traduction, le traitement par stent pourrait être plus approprié pour les anévrismes fortement dégénérés, tandis que l’enroulement seul pourrait être adéquat pour les anévrismes avec des parois vasculaires pour la plupart saines.

Introduction

L’hémorragie sous-arachnoïdienne causée par la rupture d’un anévrisme intracrânien (IA) est une affection neurochirurgicale dévastatrice associée à une morbidité et une mortalité élevées 1,2,3,4. En plus de la coupure microchirurgicale, qui fournit un contact direct entre l’endothélium et l’endothélium, les dispositifs endovasculaires ont acquis une importance croissante au cours des dernières décennies pour traiter les IA rompues et découvertes accidentellement. La réponse cicatrisante dans les IA traitées par endovasculairement dépend pri....