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Article de méthode

Méthodes d’élevage du parasitoïde Ganaspis brasiliensis, un agent de lutte biologique prometteur pour la drosophile suzukii envahissante

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DOI :

10.3791/63898

2 juin 2022

Dans cet article

Résumé

Ganaspis brasiliensis - un parasitoïde larvaire de Drosophila suzukii (un ravageur envahissant mondial des cultures fruitières) - a été approuvé ou est envisagé pour l’introduction en Europe et aux États-Unis pour la lutte biologique contre ce ravageur. Cet article fournit des protocoles pour l’élevage à petite et à grande échelle de ce parasitoïde.

Résumé

Originaire d’Asie de l’Est, la drosophile à ailes tachetées, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), s’est largement établie dans les Amériques, en Europe et dans certaines parties de l’Afrique au cours de la dernière décennie, devenant un ravageur dévastateur de divers fruits à peau douce dans ses régions envahies. La lutte biologique, en particulier au moyen de parasitoïdes auto-entretenus et spécialisés, devrait être une option viable pour la gestion durable à l’échelle de la zone de ce ravageur hautement mobile et polyphage. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) est un parasitoïde larvaire qui est largement distribué en Asie de l’Est, et s’est avéré être l’un des parasitoïdes les plus efficaces de D. suzukii.

Après des évaluations rigoureuses avant l’introduction de son efficacité et des risques potentiels non ciblés, l’un des groupes génétiques les plus spécifiques à l’hôte de cette espèce (G1 G. brasiliensis) a récemment été approuvé pour l’introduction et la libération sur le terrain aux États-Unis et en Italie. Un autre groupe génétique (G3 G. brasiliensis), qui a également été couramment trouvé pour attaquer D. suzukii en Asie de l’Est, pourrait être envisagé pour l’introduction dans un proche avenir. Il y a actuellement un énorme intérêt pour l’élevage de G. brasiliensis à des fins de recherche ou de production de masse pour la libération sur le terrain contre D. suzukii. Ce protocole et l’article vidéo associé décrivent des méthodes d’élevage efficaces pour ce parasitoïde, à la fois à petite échelle pour la recherche et à grande échelle pour la production de masse et la libération sur le terrain. Ces méthodes pourraient bénéficier à d’autres recherches à long terme et à l’utilisation de ce parasitoïde originaire d’Asie comme agent de lutte biologique prometteur pour ce ravageur envahissant mondial.

Introduction

Originaire d’Asie de l’Est, la drosophile à ailes tachetées, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), s’est largement établie dans les Amériques, en Europe et dans certaines parties de l’Afrique 1,2. La mouche est extrêmement polyphage, étant capable d’utiliser divers fruits cultivés et sauvages à la peau douce et fine dans ses régions indigènes et envahies 1,2,3. Les stratégies actuelles de lutte contre ce ravageur reposent fortement sur l’utilisation fréquente d’insecticides qui ciblent les ....

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Protocole

1. Méthodes d’élevage en laboratoire à petite échelle de G3 Ganaspis brasiliensis

  1. Préparez le régime alimentaire de l’hôte.
    1. Ajouter 600 mL d’eau distillée dans un récipient en verre de 1 500 mL et chauffer l’eau sur une plaque chauffante.
    2. Ajouter 88,6 g de régime sec disponible dans le commerce (à base d’agar, de levure de bière, de farine de maïs, de méthylparabène et de saccharose) ou préparer un régime alimentaire en utilisant la formule publiée par Dalton et al.28 (voir l’étape 2.1.2).
    3. Ajouter 300 ml d’eau distillée dans le régime sec et bien mélanger le mélange alimentaire.<....

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Résultats

La figure 4 montre les résultats représentatifs de l’élevage en laboratoire à petite échelle de G3 Ganaspis brasiliensis en utilisant deux densités parasitoïdes différentes (six ou 10 paires) et deux temps d’exposition différents (5 ou 10 jours) à l’installation de quarantaine de l’USDA-ARS Beneficial Insects Introduction Unit (Newark, Delaware). Il y avait 14 répétitions pour chaque combinaison de densité parasitoïde et de temps d’exposition. Au total, les 64 flacons ont produit 4 .......

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Discussion

La recherche à long terme et les rejets ultérieurs sur le terrain d’un agent de lutte biologique dépendent de la disponibilité de techniques d’élevage efficaces et économiques. Les méthodes décrites dans cette étude se sont avérées être des protocoles efficaces pour l’élevage à petite et à grande échelle de Ganaspis brasiliensis. Le protocole d’élevage à petite échelle a été développé sur plusieurs années pour optimiser la quantité de main-d’œuvre et réduire l’équipement spécialisé nécessaire pour maintenir simu.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.

Remerciements

Les auteurs remercient Lukas Seehausen et Marc Kenis (CABI, Suisse) d’avoir aimablement fourni G1 G. brasiliensis. Le financement en Italie a été fourni par provincia autonoma di Trento, Trento, Italie, et aux États-Unis par l’Institut national de l’alimentation et de l’agriculture, le prix USDA Specialty Crops Research Initiative (#2020-5118-32140), le service d’inspection de la santé animale et végétale de l’USDA (Farm Bill, fonds 14-8130-0463) et les fonds de base USDA ARS CRIS (projet 8010-22000-033-00D). L’USDA est un fournisseur et un employeur d’égalité des chances et ne cautionne pas les produits mentionnés dans cette publication.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Levure sèche activeLevure Fleischmanns, Cincinatti, OH, USAAucunUtilisé pour couvrir les fruits afin de réduire la croissance de moisissures et d’améliorer l’attraction de la frui pour les mouches
Gélose bactériologiqueMerk Life Science S.r.l., Milan, ItalieA1296 - 5KGUtilisé pour préparer la solution d’eau de Javel moyenne standard pour la drosophile
Clorox Company, Oakland, CA, USAAucunUtilisé pour désinfecter les fruits
à chairBouchon bleuAzer Scientific, Morgantown, PA, USAES3837Utilisé pour sceller le tube tout en permettant la ventilation pour les insectes
Épicerie de myrtilles, Newark, DE, USAAucun Fournicomme fruit hôte pour les mouches (divers autres fruits peuvent également être utilisés)
Cage d’élevage d’insectes BugDorm (L24,5 x P24,5 x H63,0 cm)Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taïwan4E3030Utilisé pour l’élevage de parasitoïdes (cage de parasitisme)
Cage d’élevage d’insectes BugDorm (L32.5 x P32.5 x H32.5 cm)Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taïwan4E4590Utilisé pour l’élevage de mouches
Cage d’élevage d’insectes BugDorm (L32.5 x P32.5 x H32.5 cm)Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan4E4545Utilisé pour l’élevage de parasitoïdes (cage d’éclosion)
Grillage à poules (0,64 cm, Calibre 19)Everbilt, OH, USA308231EBUtilisé pour soulever le fruit afin de permettre une ponte parasitoïde maximale
Épicerie de semoule de maïs, Trento, TN, ItalieAucunUtilisé pour préparer le moyen standard Drosophila
Rouleau de coton dentaire (1 x 3,8 cm)Gima S.p.A., Gessate, MI, Italie35000Utilisé pour fournir de l’eau aux parasitoïdes dans le récipient de stockage
Régime alimentairede la drosophileFrontier Scientific, Newark, DE, USATF1003 Régimealimentaire personnalisé utilisé pour élever les mouches
Flacon de drosophile étroit, Polystyrène (2,5 x 9,5 cm)VWR International, LLC., Radnor, PA, US75813-160Utilisé pour fournir de l’eau aux parasitoïdes à l’intérieur de la cage
Bouchons de flacon de drosophile, Acétate de cellulose (2,5 cm)VWR International, LLC., Radnor, PA, US89168-886Utilisé pour fournir de l’eau aux parasitoïdes à l’intérieur de la cage
Fiole Erlenmeyer (250 mL)Carolina Biological, Burlington, NC, USA731029Utilisée pour l’élevage de mouches et de parasitoïdes
Tube à centrifuger de style Falcon (50 mL)VWR International, LLC., Radnor, PA, USVWRI525-0611Modifié pour expédier des parasitoïdes adultes
Bouchon en mousseJaece Industries, North Tanawanda, NY, USAL800-CUtilisé pour sceller les flacons tout en permettant la ventilation des insectes
HoneyGrocery Store, Newark, DE, USAAucunFourni comme nourriture pour les parasitoïdes
Bouchon en mousse plastique Identi-PlugFisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US14-127-40EUtilisé comme mangeoire pour les parasitoïdes et pour sceller le récipient de stockage
Serviette en papier industrielleGrocery Store, Newark, DE, USAAucunFourni comme substrat de nymphose pour les pupes et l’humidité atténuée
Tissu à mailles microniques (250 mL)Filet industriel, Maple Grove, MN, États-UnisWN0250-72Utilisé pour fabriquer un couvercle de ventilation pour les insectes
Levure nutritionnelle (flocons)Épicerie, Trento, TN, ItalieAucunUtilisé pour préparer le sous-verre en papier standard Drosophila Medium
(10,2 cm)Hoffmaster, WI, USA35NG26Transformé comme substrat de nymphose pour les mouches et les pupes
parsitéesGobelet en plastique (& Oslash ; 13,3 cm, 800 mL)Berry Superfos, Taastrup, DanemarkUnipak 5134Modifié pour stocker les parasitoïdes adultes
Couvercle en plastique (& Oslash ; 13,3 cm)Berry Superfos, Taastrup, DanemarkPP 2830Modifié pour stocker les parasitoïdes adultes
Acide propioniqueMerk Life Science S.r.l., Milan, ItalieP1386 - 1LUtilisé pour préparer le moyen standard de drosophile
SaccharoseÉpicerie, Trento, TN, ItalieAucunUtilisé pour préparer la drosophile standard Tasse à
soupe moyenne avec couvercle (475 mL)StackMan, VietnamDC1648Utilisé pour les larves parasitées pour nymphoser
farine de sojaÉpicerie, Trento, TN, ItalieAucunUtilisé pour préparer la drosophile standard
Medium Rondelle en feutre blanc (0,64 cm d’épaisseur, 5 mm ID x 20 mm OD)Quiklok, Lincoln, NH, USWFW/.25 x 5 x 20 mmUtilisé comme anneau d’alimentation pour les parasitoïdes
la

Références

  1. Asplen, M. K., et al. Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities. Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).
  2. Tait, G., et al.

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

levage de parasito desM thodes d levage de massePr paration du r gime alimentaire de l h teCage de parasitismemergence des gu pesLutte contre les ravageurs envahissantsRavageurs des fruits p pins et noyau