Article de méthode

Mesure transdermique du débit de filtration glomérulaire chez les porcelets ventilés mécaniquement

DOI :

10.3791/64413

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13 septembre 2022

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1Department of Physiology, College of Medicine University of Tennessee Health Science Center

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

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Le débit de filtration glomérulaire (DFG) est le marqueur idéal pour évaluer la fonction rénale. Cependant, la méthode de mesure standard utilisant l’injection d’inuline avec analyse de sang et d’urine en série n’est pas pratique. Cet article décrit une méthode pratique pour mesurer le DFG par voie transdermique chez les porcelets.

Résumé

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La mesure transdermique du débit de filtration glomérulaire (DFG) a été utilisée pour évaluer la fonction rénale chez les animaux conscients. Cette technique est bien établie chez les rongeurs pour étudier les lésions rénales aiguës et les maladies rénales chroniques. Cependant, la mesure du DFG à l’aide du système transdermique n’a pas été validée chez les porcs, une espèce ayant un système rénal similaire à celui des humains. Par conséquent, nous avons étudié l’effet de la septicémie sur le DFG transdermique chez des porcs nouveau-nés anesthésiés et ventilés mécaniquement. La septicémie polymicrobienne a été induite par ligature et ponction (CLP). Le système de mesure du DFG transdermique consistant en un capteur de fluorescence miniaturisé a été fixé à la peau rasée du porc pour déterminer la clairance de la sinistrone conjuguée à l’isothiocyanate de fluorescéine (FITC), un traceur de DFG injecté par voie intraveineuse. Nos résultats montrent qu’à 12 h post-CLP, la créatinine sérique augmentait avec une diminution du DFG. Cette étude démontre, pour la première fois, l’utilité de l’approche DFG transdermique dans la détermination de la fonction rénale chez les porcs néonatals ventilés mécaniquement.

Introduction

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Une évaluation pratique et quantitative de la fonction rénale est la mesure du débit de filtration glomérulaire (DFG), qui indique dans quelle mesure les reins filtrent le sang sur la base du principe de clairance1. Une méthode antérieure de mesure du DFG implique l’injection intraveineuse de composés exogènes tels que l’inuline ou la sinistrine, en effectuant des mesures en série des niveaux plasmatiques/urinaires pour détecter leur clairance 2,3. Cette méthode est lourde et nécessite la collecte en série d’échantillons de plasma et d’urine4. Une alternative est....

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Protocole

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Les procédures sont rédigées conformément aux normes nationales pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire et ont été approuvées par le Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC) du Centre des sciences de la santé de l’Université du Tennessee (UTHSC).

REMARQUE: Les porcelets du groupe expérimental sont soumis à une ligature et à une ponction des cæcales, tandis que le groupe simulé ne subit qu’une ouverture de l’abdomen sans ligature ou ponction des cæcales. Les porcelets des deux groupes sont maintenus sous anesthésie pendant 12 heures après l’intervention afin de laisser suffisamment de temps pour que....

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Résultats

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Dans cette section, nous présentons pour la première fois les données représentatives de l’utilisation du DFG transdermique chez les porcs nouveau-nés. Nous avons utilisé un modèle de ligature et de ponction des cæcaux dont il a déjà été démontré qu’il diminuait la fonction rénale28. En conséquence, nous avons émis l’hypothèse que chez nos porcs CLP, il devrait y avoir une baisse aiguë du DFG correspondant à l’IRA, ce qui devrait être détecté sur le dispositif de DFG transdermique comme un temps d.......

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Discussion

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Cet article décrit les étapes pratiques pour déterminer la fonction rénale chez les porcs à l’aide des moniteurs de DFG transdermique miniaturisés et de la FITC-sinistrin dans un modèle de porc néonatal anesthésié et ventilé mécaniquement. Des articles antérieurs ont établi des protocoles expérimentaux de DFG transdermique chez les rongeurs11,12,14, mais aucun protocole n’existe chez les porcs.

Récemm.......

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Remerciements

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Cette étude a été soutenue par les subventions R01 DK120595 et R01 DK127625 des National Institutes of Health accordées au Dr Adebiyi. Le contenu de cet article relève de la seule responsabilité des auteurs et ne représente pas nécessairement les opinions officielles des National Institutes of Health. Merci au Dr. Daniel Schock-Kusch, directeur de site chez MediBeacon GmbH, pour ses conseils.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Alpha - ChloraloseSigma-AldrichC0128-25GUtilisé pour l’entretien de l’anesthésie
Soie tressée noire  ; 3-0Spécialités chirurgicalesSP117Attache en soie pour la traction et la ligature des vaisseaux sanguins
Machine de centrifugation AccuSpin 8CFischer Scientific75-008-821Utilisée pour extraire le plasma d’un échantillon de sang total
Tube endotrachéal 3.0 sans manchetteProgressive Medical International1109021995Inséré par trachéotomie
FITC-Sinistrin 1.0 gMediBeacon Inc.FTCF S001Stocker à température ambiante et à l’abri de la lumière
GEM Premier 3000 Analyseur de gaz du sangLaboratoire d’instrumentation5700Pour l’analyse des gaz du sang au chevet
du patient Coussin chauffant de taille moyenne 20 in x 29 inAdroit Medical SystemsV029Se connecte à la pompe de thérapie
thermique HTP-Pompe de thérapie thermiqueAdroit Medical SystemsHTPVous permet de régler la température selon vos besoins.
IDEXX Catalyst OneIDEXX Laboratories89-92525-00Analyse de la créatinine plasmatique
Cathéter de pression artérielle invasive 3.5FrMillarSPR-524Inséré dans l’artère fémorale
Kit d’administration IV avec régulateur de débitTrue CareTCRTCBINF033GUtilisé pour connecter le sac de liquide IV au cathéter veineux
KétamineCovetrus68317Utilisé pour l’induction de l’anesthésie
Logiciel d’analyse MediBeacon version 3.0MediBeacon Inc.N/AProgramme logiciel utilisé pour analyser les données afin d’obtenir la clairance, la demi-vie et la courbe de la sinistrine
Millex-GV Unité de filtre de seringue 0,22 & micro ; mMillipore SigmaSLGVR33RSFiltre à seringue pour injection de chloralose
Ventilateur pour nouveau-nés/nourrissonsSechrist Millennium20409Raccordé à l’alimentation en air pour assurer la ventilation par sonde endotrachéale
Phénobarbital sodique + phénytoïne sodique (Euthasol)Covetrus72934Utilisé pour l’euthanasie
Ringer Lactate 500 mL sacBaxter2B2323QPerfusion de fluide d’entretien
Gants stérilesHenry Schein104-5920Utilisé par l’opérateur pendant l’opération
Blouse stérileHalyard Health95021Utilisé par l’opérateur pendant l’opération
Serviette SterilMedline42131704Utilisé comme drap pour maintenir le champ stérile lors de l’utilisation
Suture 3-0 Aiguille de coupe inversée en soieEthiconNC1842168Utilisé pour la suture des couches de la paroi abdominale
Mini moniteur DFG transdermiqueMediBeacon Inc.TDM004Batterie et connecteur USB inclus dans l’emballage
Patch adhésif pour moniteur transdermiqueMediBeacon Inc.PTC-SM001Patch adhésif double face pour sonde DFG
Ruban ombilical 1/8 po x 20 ydsFisher ScientificNC9303017Pour fixer le tube endotrachéal
Cathéter veineux taille PE/5Micro tube médicalBB31695Pour canulation de la veine fémorale
XylazineCovetrus61035Utilisé pour l’induction de l’anesthésie

Références

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Pasala, S., Carmody, J. B. How to use... serum creatinine, cystatin C and GFR. Archives of Disease in Childhood Education and Practice Edition. 102 (1), 37-43 (2017).
  2. Smith, H. W. The Kidney: Structure and Function in Health and Disease. , Oxford Universit....

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Mots-clés

DFG transdermiqueinsuffisance r nale aigumaladie r nale chroniqueclairance de la sinistrine FITCligature et ponction c calesvaluation de la fonction r nalemod le de sepsiscapteur de fluorescence

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