Établissement d’organoïdes endométriaux 3D à partir de l’utérus de souris

Suni Tang; Sydney E. Parks; Zian Liao; Dominique I. Cope; Sarah E. Blutt; Diana Monsivais

doi:10.3791/64448

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Article de méthode

Établissement d’organoïdes endométriaux 3D à partir de l’utérus de souris

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DOI :

10.3791/64448

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6 janvier 2023

Suni Tang¹^,² , Sydney E. Parks¹^,² , Zian Liao¹^,² , Dominique I. Cope¹^,² , Sarah E. Blutt³ , Diana Monsivais¹^,²

¹Department of Pathology & Immunology, Baylor College of Medicine, ²Center for Drug Discovery, Baylor College of Medicine, ³Departments of Molecular Virology and Microbiology and Medicine, Baylor College of Medicine

Dans cet article

Résumé

Ce protocole décrit des méthodologies pour établir des organoïdes épithéliaux de l’endomètre de souris pour l’expression génique et les analyses histologiques.

Résumé

Le tissu endométrial tapisse la cavité interne de l’utérus et est sous le contrôle cyclique de l’œstrogène et de la progestérone. C’est un tissu composé d’épithélium luminal et glandulaire, d’un compartiment stromal, d’un réseau vasculaire et d’une population complexe de cellules immunitaires. Les modèles murins ont été un outil puissant pour étudier l’endomètre, révélant des mécanismes critiques qui contrôlent l’implantation, la placentation et le cancer. Le développement récent de cultures organoïdes endométriales 3D présente un modèle de pointe pour disséquer les voies de signalisation qui sous-tendent la biologie de l’endomètre. L’établissement d’organoïdes endométriaux à partir de modèles de souris génétiquement modifiés, l’analyse de leurs transcriptomes et la visualisation de leur morphologie à une résolution unicellulaire sont des outils cruciaux pour l’étude des maladies de l’endomètre. Cet article décrit les méthodes permettant d’établir des cultures 3D d’épithélium endométrial à partir de souris et décrit des techniques pour quantifier l’expression des gènes et analyser l’histologie des organoïdes. L’objectif est de fournir une ressource qui peut être utilisée pour établir, cultiver et étudier l’expression génique et les caractéristiques morphologiques des organoïdes épithéliaux de l’endomètre.

Introduction

L’endomètre - le tissu muqueux interne de la muqueuse de la cavité utérine - est un tissu unique et très dynamique qui joue un rôle essentiel dans la santé reproductive d’une femme. Au cours de la vie reproductive, l’endomètre a le potentiel de subir des centaines de cycles de prolifération, de différenciation et de dégradation, coordonnés par l’action concertée des hormones ovariennes - œstrogènes et progestérone. Des études sur des souris génétiquement modifiées ont révélé des mécanismes biologiques de base qui sous-tendent la réponse endométriale aux hormones et le contrôle de l’implantation des embryons, de la décidualisation des cellules stromales et de la grosse....