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Article de méthode

Co-fermentation de Marsdenia tenacissima avec Ganoderma lucidum et effet anti-cancer du poumon des produits de fermentation

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DOI :

10.3791/64687

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16 décembre 2022

Dans cet article

Résumé

Ici, nous décrivons un protocole pour établir un système de co-fermentation systématique et complet afin de produire des produits de biotransformation riches en saponines piquantes en utilisant Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn. (MT) comme milieu de fermentation pour Ganoderma lucidum. Cela servira de référence méthodologique pour le développement d’autres drogues ethniques.

Résumé

Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn. (MT), en tant que phytothérapie traditionnelle chinoise et Dai, a des propriétés anti-inflammatoires, antibactériennes et antitumorales. Cependant, la plupart de ses principales substances actives sont des aglycones, telles que la ténacigénine A et la ténacigénine B. Comme la biodisponibilité de la MT est faible et que ses composants actifs médicinaux sont difficiles à synthétiser, elle est principalement étudiée par biotransformation. Cette étude vise à produire des produits de biotransformation riches en saponines piquantes en utilisant la MT comme milieu de fermentation pour Ganoderma lucidum (G. lucidum).

Grâce au criblage préliminaire de trois champignons médicinaux, il a été constaté que G. lucidum et Ophiocordyceps sinensis (O. sinensis) peuvent généralement se développer dans le milieu pour la MT ; Par conséquent, l’efficacité de la fermentation des deux types de champignons a été testée à l’aide d’un modèle murin de cancer du poumon. Enfin, la co-fermentation de G. lucidum et de MT a été sélectionnée pour une étude plus approfondie. Une analyse métabolomique non ciblée a été effectuée sur les produits de la co-fermentation de MT avec G. lucidum . Nous avons identifié 12 saponines spécifiques de MT à partir des produits de fermentation, et obtenu un composé monomère, la ténacigénine A, à partir des produits de fermentation.

La majeure partie de la ténacigénine a montré une tendance à la hausse significative, à travers les niveaux de ténacigénine A et de ténacigénine B. Les résultats ont montré que l’efficacité de la MT s’est améliorée après la fermentation par G. lucidum. De plus, la biotransformation des glycosides stéroïdiens en C21 dans la MT a été la réaction centrale dans ce processus de fermentation. En résumé, cette étude a établi un système de co-fermentation systématique et complet et une méthode d’évaluation pharmacodynamique pour la MT, qui ont non seulement amélioré l’utilisation complète des substances actives efficaces dans la MT, mais ont également fourni une référence méthodologique pour le développement d’autres drogues ethniques.

Introduction

Le cancer du poumon appartient à la catégorie des « escarboucles pulmonaires » dans la médecine traditionnelle chinoise. La pathogenèse de l’anthrax pulmonaire est une faiblesse du « Qi » sain des patients, un déséquilibre du Yin et du Yang, des toxines et une stagnation dans les poumons, entraînant un dysfonctionnement pulmonaire, un blocage sanguin et une perte de liquide dans les poumons. Ainsi, la stase sanguine à long terme et les toxines des expectorations dans les poumons forment une masse pulmonaire1. Par conséquent, le renforcement du Qi et l’élimination des facteurs pathogènes sont le principe de base....

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Protocole

Cette étude a été menée conformément aux recommandations du Centre pour les animaux expérimentaux de l’Université Minzu (No. ECMUC2019008AA). Le protocole a été approuvé par le Comité d’éthique des animaux d’expérimentation de l’Université Minzu. La MT a été collectée à Kunming, dans la province du Yunnan.

1. Préparation de l’étude

  1. Extraire MT à l’eau chaude (100 °C ; MT/eau = 1/10, p/v) pendant 30 min et recueillir le résidu d’extraction MT comme matériau d’essai.
  2. Maintenir la lignée cellulaire de cancer du poumon de souris LLC dans le milieu Eagle modifié (DMEM) de D....

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Résultats

Résultats préliminaires du dépistage des souches
Pour explorer les champignons capables de co-fermenter avec la MT, nous avons sélectionné trois champignons : G. lucidum, I. obliquus et O. sinensis. Tout d’abord, les souches ont été activées : G. lucidum, I. obliquus et O. sinensis ont été inoculés dans le milieu PDA comme le montre la figure 1A-C ; La figure 1D-F<.......

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Discussion

Après des expériences de criblage de souches, nous avons constaté que tous les champignons médicinaux ne peuvent pas survivre normalement sur des matières herbacées. En l’absence de milieu supplémentaire, la survie des champignons médicinaux dépend de la dégradation des composants des matériaux médicinaux par leurs propres enzymes pour synthétiser les sources de carbone et d’azote nécessaires. On peut en déduire que I. obliquus peut ne pas contenir d’enzymes capables de dégrader.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents connus ou de relations personnelles qui auraient pu sembler influencer les travaux rapportés dans cet article.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par des subventions de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (81973977). Les échantillons de MT ont été identifiés par le professeur Tongxiang-Liu et conservés à l’École de pharmacie de l’Université Minzu de Chine.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
AcetonitrileTonguang Fine Chemicals Company, Pékin, Chine20200923
AgarSinopharm Chemical ReagentCo., Ltd., États-UnisNO.20080107
AutoclaveBinJiang Medical Co., Ltd., Jiangyin, ChineLS-50LD
incubateur à agitation constanteZhicheng Inc. Tous droits réservés., Shanghai, ChineZWY-100D
Ganoderma lucidumBeNa Culture Collection, Pékin, Chine31732
Inonotus obliquusBeNa Culture Collection, Pékin, Chine117822
LLC Cellule de cancer du poumon de sourisnationale de ressources de lignées cellulaires, Pékin, ChinePUMC000673
Souris mâles C57BL/6JVital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd., Beiijng, ChineNo.1100112107024684
MéthanolTonguang Fine Chemicals Company, Pékin, Chine20210723
Ophiocordyceps sinensisBeNa Culture Collection, Pékin, Chine118371
Poly tétra fluoroéthylèneJinteng Experiment Equipment Co., Ltd., Tianjing, ChineNo.997
QTRAP 5500 LC / MSAB Sciex Pte. Ltd., États-UnisCV20231711
Évaporateur rotatifBUCHI Co., Ltd., Shanghai, ChineR-300
SeringueZhiyu Medical Instrument Co., Ltd., Jinagsu, ChineV500111
Banc ultra-propreBOXUN Medica Bioological Instrument Co., Ltd., Shanghai, ChineSW-CJ-LFD
Infrastructure

Références

  1. Jansen, B. J., Liang, H., Ye, J. International Conference on Cognitive Based Information Processing and Applications (CIPA 2021). 85, Springer Nature. (2021).
  2. WANG, J., et al. Literature-based research on common syndromes of cough varian....

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Réimpressions et autorisations

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