Voici un protocole pour montrer que la capsule de Bazi Bushen (BZBS) peut réguler la voie de signalisation RANKL/OPG dans le modèle de rongeur ovariectomisé grâce à son effet semblable à celui des œstrogènes.
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Article de méthode
Voici un protocole pour montrer que la capsule de Bazi Bushen (BZBS) peut réguler la voie de signalisation RANKL/OPG dans le modèle de rongeur ovariectomisé grâce à son effet semblable à celui des œstrogènes.
Cette étude vise à montrer l’effet semblable à celui des œstrogènes de la capsule Bazi Bushen (BZBS), un composé à base de plantes chinoises, chez des souris ovariectomisées. Les rats femelles Sprague-Dawley (SD) ont été divisés au hasard en six groupes : un groupe opéré par placebo, un groupe modèle (OVX), un groupe progynova et des groupes BZBS (1, 2 et 4 d/kg/j). Une ovariectomie a été pratiquée sur tous les rats, à l’exception de ceux du groupe opéré par placebo. La microtomodensitométrie (micro-TDM), la coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (H&E), l’immunohistochimie et la détection par immuno-enzymatique (ELISA) ont été réalisées après 4 mois de traitement par BZBS. En conséquence, par rapport au groupe OVX, les rats traités avec BZBS ont montré une augmentation du nombre et de la surface des cellules trabéculaires de l’os et de la moelle osseuse, et une diminution du nombre de cellules adipeuses. Le volume osseux, le nombre trabéculaire et l’épaisseur trabéculaire du tibia droit dans les groupes de médicaments ont augmenté et l’espace trabéculaire a diminué. Les taux de 17β-œstradiol et de calcium sérique dans les groupes de médicaments étaient élevés, mais les taux de phosphore sérique, de sclérostine, de β-CTX et de TRACP-5b ont diminué. Dans les groupes médicamenteux, les taux de RANKL et de sclérostine ont diminué, tandis que le taux d’ostéoprotégerine (OPG) a augmenté. En conclusion, ce protocole a systématiquement évalué les effets thérapeutiques et les mécanismes moléculaires potentiels des composés à base de plantes chinoises chez des rats ovariectomisés avec une variété de techniques.
L’ostéoporose postménopausique (PMOP) est une maladie du système squelettique causée par une fonction ovarienne inadéquate, une diminution des œstrogènes et une augmentation de l’activité des ostéoclastes1, caractérisée par une faible masse osseuse, une dégénérescence microarchitecturale du tissu osseux et des lésions de la trabécule osseuse. Le PMOP est susceptible de provoquer des fractures et peut avoir des effets graves sur la qualité de vie des patients. L’ostéoporose touche environ 200 millions de personnes dans le monde2 ; environ 40 % des femmes ménopausées souffrent d’ostéoporos....
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Les expériences sur les animaux ont été approuvées par le Comité de la recherche animale et de l’éthique de l’Institut de recherche médicale Hebei Yiling (numéro d’approbation : N2020150). Les 36 rats femelles Sprague-Dawley (SD) (âgés de 3 mois, pesant 180-200 g) (voir tableau des matériaux) ont été nourris avec de la nourriture normale et de l’eau propre dans le nouveau centre d’évaluation des médicaments de l’Institut de recherche médicale Hebei Yiling et ont été exposés à la lumière artificielle pendant 12 heures par jour dans des pièces à température contrôlée (20-26 °C) et à humidité relative (40 %-70 %).
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La microstructure osseuse du tibia a été évaluée par micro-tomodensitométrie
Le traitement de rats ovariectomisés avec du BZBS a considérablement réduit les changements structurels trabéculaires induits par les OVX. Comme le montrent les images micro-TDM reconstruites du tibia droit (figures 1A, B), l’os trabéculaire du groupe OVX a montré une diminution significative de la DMO (figure 1C), de la VB/TV (f.......
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Après l’ovariectomie, les niveaux d’œstrogènes ont fortement diminué en raison de la réduction continue de l’os spongieux et de l’augmentation du renouvellement osseux. Essentiellement, une diminution de la sécrétion d’œstrogènes après la ménopause pourrait entraîner une perte osseuse significative18, entraînant une perte de Ca2+ chez les rats ovariectomisés19,20. Il a été rapporté que la prise .......
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Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Ce travail a été soutenu par le projet de conseil stratégique de l’Académie chinoise d’ingénierie : recherche stratégique sur l’effet anti-âge de la médecine traditionnelle chinoise (subvention n° : 2022-XY-45), la Fondation des sciences naturelles de la province du Hebei en Chine (subvention n° : 2022106065), le programme S&T du Hebei, Chine (subvention n° : 22372502D) et le projet de talent de haut niveau en matière d’innovation et d’entrepreneuriat en S&T de Shijiazhuang, Hebei, Chine (N° de subvention : 07202203).
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Formol tamponné neutre à 10 % | Proteintech Group, Inc. | 23408-1AP-100 | |
| Kits ELISA 17-bêta-estradiol | Proteintech Group, Inc. | 21933-1-AP | |
| 3 %H2O2 | ShanDong LIRCON Medical Technology Incorporated Company | 20221027 | |
| Anticorps anti-ostéoprotégeine | Abcam | ab203061 | |
| Bazibushen gélules | Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co. Ltd. | ||
| Biotine chèvre anti-lapin IgG | Abcam | ab207995 | |
| Kits de dosage du calcium | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | C004-2-1 | |
| Diaminobenzidine | ZSGB-BIO | ZLI-9018 | |
| Comprimés de valérate d’œstradiol | Bayer AG | 156A | |
| Gene 1580R centrifugeuse | GENE Co. Ltd. | ||
| Image-Pro Plus | Media Cybernetics | IPP 6.0 | |
| Leica DM6000B Microscope (système de microscope vertical entièrement automatisé) | Leica | 361715 | |
| Normal Goat Sérum Bloquant Solution | Vector Laboratories | S-1000-20 | |
| Kits de dosage du phosphate | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | C006-1-1 | |
| Solution saline tamponnée au phosphate | Servicebio, Wuhan, Chine | CR10201M | |
| Système d’imagerie microCT Quantum GX2 | PerkinElmer | CLS149276 | |
| RANKL Anticorps polyclonal de lapin | Elabscience Biotechnology Co. Ltd. | E-EL-R3032-96T | |
| Rat SOST (Sclérostine) Kit ELISA | Elabscience Biotechnology Co., Ltd. | E-EL-R1405C-96T | |
| Rat TRACP-5b (Phosphatase Acide Résistante au Tartrate 5b) Kit ELISA | Abcam | ab108667 | |
| Rat &beta ;-CTx (Beta Crosslaps) Kit ELISA | Elabscience Biotechnology Co., Ltd. | E-EL-R0939c-96T | |
| Anticorps polyclonal de lapin Sclerostin | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. | SCXK(JING)2016-0006 | |
| Scanner de lames | Hamamatsu Photonics K.K. | Nano Zoomer-SQ | |
| Sprague Dawley rats femelles | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. | ZLI-9381 |
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