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Article de méthode

Effet semblable à celui de l’œstrogène de la capsule de Bazi Bushen chez le rat ovariectomisé

1.9K vues

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DOI :

10.3791/64884

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7 avril 2023

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Dans cet article

Résumé

Voici un protocole pour montrer que la capsule de Bazi Bushen (BZBS) peut réguler la voie de signalisation RANKL/OPG dans le modèle de rongeur ovariectomisé grâce à son effet semblable à celui des œstrogènes.

Résumé

Cette étude vise à montrer l’effet semblable à celui des œstrogènes de la capsule Bazi Bushen (BZBS), un composé à base de plantes chinoises, chez des souris ovariectomisées. Les rats femelles Sprague-Dawley (SD) ont été divisés au hasard en six groupes : un groupe opéré par placebo, un groupe modèle (OVX), un groupe progynova et des groupes BZBS (1, 2 et 4 d/kg/j). Une ovariectomie a été pratiquée sur tous les rats, à l’exception de ceux du groupe opéré par placebo. La microtomodensitométrie (micro-TDM), la coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (H&E), l’immunohistochimie et la détection par immuno-enzymatique (ELISA) ont été réalisées après 4 mois de traitement par BZBS. En conséquence, par rapport au groupe OVX, les rats traités avec BZBS ont montré une augmentation du nombre et de la surface des cellules trabéculaires de l’os et de la moelle osseuse, et une diminution du nombre de cellules adipeuses. Le volume osseux, le nombre trabéculaire et l’épaisseur trabéculaire du tibia droit dans les groupes de médicaments ont augmenté et l’espace trabéculaire a diminué. Les taux de 17β-œstradiol et de calcium sérique dans les groupes de médicaments étaient élevés, mais les taux de phosphore sérique, de sclérostine, de β-CTX et de TRACP-5b ont diminué. Dans les groupes médicamenteux, les taux de RANKL et de sclérostine ont diminué, tandis que le taux d’ostéoprotégerine (OPG) a augmenté. En conclusion, ce protocole a systématiquement évalué les effets thérapeutiques et les mécanismes moléculaires potentiels des composés à base de plantes chinoises chez des rats ovariectomisés avec une variété de techniques.

Introduction

L’ostéoporose postménopausique (PMOP) est une maladie du système squelettique causée par une fonction ovarienne inadéquate, une diminution des œstrogènes et une augmentation de l’activité des ostéoclastes1, caractérisée par une faible masse osseuse, une dégénérescence microarchitecturale du tissu osseux et des lésions de la trabécule osseuse. Le PMOP est susceptible de provoquer des fractures et peut avoir des effets graves sur la qualité de vie des patients. L’ostéoporose touche environ 200 millions de personnes dans le monde2 ; environ 40 % des femmes ménopausées souffrent d’ostéoporos....

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Protocole

Les expériences sur les animaux ont été approuvées par le Comité de la recherche animale et de l’éthique de l’Institut de recherche médicale Hebei Yiling (numéro d’approbation : N2020150). Les 36 rats femelles Sprague-Dawley (SD) (âgés de 3 mois, pesant 180-200 g) (voir tableau des matériaux) ont été nourris avec de la nourriture normale et de l’eau propre dans le nouveau centre d’évaluation des médicaments de l’Institut de recherche médicale Hebei Yiling et ont été exposés à la lumière artificielle pendant 12 heures par jour dans des pièces à température contrôlée (20-26 °C) et à humidité relative (40 %-70 %).

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Résultats

La microstructure osseuse du tibia a été évaluée par micro-tomodensitométrie
Le traitement de rats ovariectomisés avec du BZBS a considérablement réduit les changements structurels trabéculaires induits par les OVX. Comme le montrent les images micro-TDM reconstruites du tibia droit (figures 1A, B), l’os trabéculaire du groupe OVX a montré une diminution significative de la DMO (figure 1C), de la VB/TV (f.......

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Discussion

Après l’ovariectomie, les niveaux d’œstrogènes ont fortement diminué en raison de la réduction continue de l’os spongieux et de l’augmentation du renouvellement osseux. Essentiellement, une diminution de la sécrétion d’œstrogènes après la ménopause pourrait entraîner une perte osseuse significative18, entraînant une perte de Ca2+ chez les rats ovariectomisés19,20. Il a été rapporté que la prise .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le projet de conseil stratégique de l’Académie chinoise d’ingénierie : recherche stratégique sur l’effet anti-âge de la médecine traditionnelle chinoise (subvention n° : 2022-XY-45), la Fondation des sciences naturelles de la province du Hebei en Chine (subvention n° : 2022106065), le programme S&T du Hebei, Chine (subvention n° : 22372502D) et le projet de talent de haut niveau en matière d’innovation et d’entrepreneuriat en S&T de Shijiazhuang, Hebei, Chine (N° de subvention : 07202203).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Formol tamponné neutre à 10 %Proteintech Group, Inc.23408-1AP-100
Kits ELISA 17-bêta-estradiolProteintech Group, Inc.21933-1-AP
3 %H2O2ShanDong LIRCON Medical Technology Incorporated Company20221027
Anticorps anti-ostéoprotégeineAbcamab203061
Bazibushen gélulesShijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co. Ltd.
Biotine chèvre anti-lapin IgGAbcamab207995
Kits de dosage du calciumNanjing Jiancheng Bioengineering InstituteC004-2-1
DiaminobenzidineZSGB-BIOZLI-9018
Comprimés de valérate d’œstradiolBayer AG156A
Gene 1580R centrifugeuseGENE Co. Ltd.
Image-Pro PlusMedia CyberneticsIPP 6.0
Leica DM6000B Microscope (système de microscope vertical entièrement automatisé)Leica361715
Normal Goat Sérum Bloquant SolutionVector LaboratoriesS-1000-20
Kits de dosage du phosphateNanjing Jiancheng Bioengineering InstituteC006-1-1
Solution saline tamponnée au phosphateServicebio, Wuhan, ChineCR10201M
Système d’imagerie microCT Quantum GX2PerkinElmerCLS149276
RANKL Anticorps polyclonal de lapinElabscience Biotechnology Co. Ltd.E-EL-R3032-96T
Rat SOST (Sclérostine) Kit ELISAElabscience Biotechnology Co., Ltd.E-EL-R1405C-96T
Rat TRACP-5b (Phosphatase Acide Résistante au Tartrate 5b) Kit ELISAAbcamab108667
Rat &beta ;-CTx (Beta Crosslaps) Kit ELISAElabscience Biotechnology Co., Ltd.E-EL-R0939c-96T
Anticorps polyclonal de lapin SclerostinBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.SCXK(JING)2016-0006
Scanner de lamesHamamatsu Photonics K.K.Nano Zoomer-SQ
Sprague Dawley rats femellesBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.ZLI-9381
XB2103001GZ422515090077

Références

  1. Zhai, X., et al. Muscone ameliorates ovariectomy-induced bone loss and receptor activator of nuclear factor-κb ligand-induced osteoclastogenesis by suppressing TNF receptor-associated factor 6-mediated signaling pathways. Frontiers in Pharmacology. 11, 348(2020).
  2. Wang, S., et al.

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Réimpressions et autorisations

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