Le présent protocole décrit une méthode d’hybridation in situ par fluorescence de l’ARN pour localiser les ARNlnc dans les cellules d’ostéosarcome humain.
Article de méthode
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Compteur automatique de cellules | Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd | IC1000 | Comptage des cellules |
| Plaque de culture cellulaire-12 | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 3513,corning | Placez les lamelles dans la plaque |
| ; Lignée cellulaire (143B) | Banque de cellules de l’Académie chinoise des sciences | CRL-8303 | Lignée cellulaire du cancer de l’ostéosarcome |
| Tube à centrifuger (15 mL, 50 mL) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | ; 430790, Corning | Centrifuge les cellules |
| Coverslips | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | abs7026 | Les cellules sont ensemencées sur les lamelles |
| Cy3 mark-SNHG6 Sonde d’ADN | Shanghai GenePharma Co.,Ltd | A10005 | Détecter l’emplacement SNHG6 |
| Média DMEM | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | LM-E1141 | Milieu de culture cellulaire |
| Incubateur | à bain secHaimen Kylin-Bell Lab Instruments Co., Ltd. | DKT200-2 ; | Incubation à différentes températures élevées |
| Éthanol 100 % ; | Sinopharm Chemical ReagentCo., Ltd | 10009218 | déshydratation |
| Microscope à fluorescence | Shanghai Waihai Biotechnology Co., LTD | Olympus BX43 équipé d’une caméra de Olympus U-TV0.5XC-3 (SN : 5J01719),olympus | Observation et positionnement |
| Incubateur | Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., LTD | DHP-9051 | Les échantillons ont été incubés à 37 ° ;C. |
| Support de montage | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | E675004 | Fixez les lamelles à la lame |
| Shaker | Haimen Kylin-Bell Lab Instruments Co., Ltd. | TS-8S | Échantillon de lavage |
| Diapositive | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 188105 | Les lamelles sont placées sur la diapositive |
| Triton X-100 | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | A600198 | Membrane perméable et membrane nucléaire |
| ; Trypsine (0,25 %) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 25200056, Gibco | traitement à la trypsine des cellules |
| Tween-20 | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | A600560 | détergent |
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