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La technologie de résonance plasmonique de surface (SPR) est une technique de détection optique qui élimine le besoin de marquer l’analyte. Il permet une surveillance dynamique et en temps réel de l’affinité de liaison quantitative, de la cinétique et de la thermodynamique. Cette capacité à haut débit est très sensible et reproductible, ce qui permet de mesurer divers taux d’ouverture, taux de désactivation et affinité. De plus, la petite quantité d’échantillon requise renforce encore l’utilité de cette méthode 1,2. La méthode de détection biomoléculaire à réponse rapide3, qui surveille l’affinité de liaison entre les biomolécules, est devenue un domaine de recherche de premier plan.
La technologie SPR a diverses applications dans le domaine de la recherche et du développement de médicaments4. L’une de ses utilisations est de découvrir la base structurelle de cibles médicamenteuses spécifiques. Il peut également être utilisé pour identifier les ingrédients actifs des herbes chinoises qui possèdent des activités pharmacologiques importantes et étudier leurs mécanismes de dépistage et de vérification des médicaments. Gassner et al. ont établi une courbe dose-réponse linéaire pour les anticorps bispécifiques par détermination SPR, ce qui permet l’analyse de la concentration et le contrôle de la qualité5. De plus, la SPR peut être utilisée pour effectuer des tests d’immunogénicité cliniques dans la pharmacopée et le développement de vaccins6.
Il peut être utilisé dans la détection des résidus de pesticides, des résidus de médicaments vétérinaires, des additifs illégaux, des bactéries pathogènes et des métaux lourds 7,8,9,10 dans les produits agricoles et les tests de sécurité alimentaire. En utilisant la technologie SPR, la précision et l’efficacité de ces tests peuvent être améliorées.
La technologie SPR peut également être appliquée dans la détection rapide des toxines et des antibiotiques. Cette technologie permet de fixer des anticorps viraux, des composés à petites molécules et des aptamères à la puce du biocapteur SPR. La puce du biocapteur SPR détecte ensuite différentes concentrations d’ARN viral sous forme d’analyte11. Cette méthode a été utilisée avec succès dans la détection rapide de virus tels que le virus H5N1, le virus de la grippe aviaire H7N9 et le nouveau coronavirus 12,13,14. En plus de ces applications, la technologie SPR est également utile en protéomique, en criblage de médicaments, en détection en temps réel de la pharmacocinétique associée et à l’étude des protéines et récepteurs viraux et pathogènes 15,16,17,18. Il est particulièrement adapté à la recherche scientifique et aux expériences d’enseignement dans les universités et les instituts de recherche et constitue un outil précieux dans divers contextes scientifiques et de recherche.
Le principe de la SPR est le mouvement oscillatoire collectif des électrons libres à l’interface entre un film métallique et un diélectrique, provoqué par des ondes lumineuses incidentes19. Il s’agit essentiellement de la résonance entre l’onde évanescente et l’onde plasma sur la surface métallique20. Lorsque la lumière passe d’un milieu photodense à un milieu photophobe, une réflexion totale se produit dans certaines conditions. Du point de vue de l’optique ondulatoire, lorsque la lumière incidente atteint l’interface, elle ne génère pas immédiatement de lumière réfléchie. Au lieu de cela, il traverse d’abord le milieu optiquement phobique à une profondeur d’environ une longueur d’onde. Il s’écoule ensuite le long de l’interface sur environ une demi-longueur d’onde avant de retourner dans le milieu optiquement dense. Cette onde traversant le milieu optiquement phobique est appelée onde évasive, tant que l’énergie totale de la lumière reste constante. Étant donné que le métal contient du gaz d’électrons libres, il peut être considéré comme du plasma. La lumière incidente excite la vibration longitudinale du gaz d’électrons, conduisant à la génération d’une onde de densité de charge le long de l’interface métal-diélectrique, connue sous le nom d’onde plasma de surface. Cette résonance se propage sous la forme d’une atténuation exponentielle dans les deux milieux. Par conséquent, l’énergie de la lumière réfléchie est considérablement réduite. L’angle d’incidence correspondant auquel la lumière réfléchie disparaît complètement est connu sous le nom d’angle de résonance21. Le SPR est très sensible à l’indice de réfraction du milieu adhérant à la surface du film métallique20. L’angle SPR varie avec l’indice de réfraction de la surface du film métallique, le changement de l’indice de réfraction étant principalement proportionnel à la masse moléculaire de la surface du film métallique22. Toute modification des propriétés du milieu de surface ou de la quantité d’adhérence entraînera des angles de résonance différents. Ainsi, l’interaction moléculaire peut être analysée en examinant les changements dans l’angle de résonance.
Cette analyse SPR optique non destructive, sans marquage et en temps réel, basée sur les principes ci-dessus, convient à la recherche dans divers domaines. Par conséquent, nous avons démontré le déplacement angulaire de la courbe SPR et les résultats expérimentaux par analyse multi-cycles, en prenant l’exemple de la combinaison de la quercétine et de la calycosine avec la protéine recombinante KCNJ2.