Article de méthode

Etablissement et validation d’un modèle chez le rat d’hypertension artérielle pulmonaire associée à une fibrose pulmonaire

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DOI :

10.3791/67747

23 mai 2025

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ici, la méthode d’induction de l’hypertension artérielle pulmonaire associée à la fibrose pulmonaire (PF-PH) modèle de rat par injection de bléomycine dans les voies respiratoires est introduite. Nous proposons également une approche étape par étape pour valider ce modèle animal.

Résumé

Les patients atteints de fibrose pulmonaire courent un risque plus élevé de développer une hypertension pulmonaire, une complication de mauvais pronostic. À l’heure actuelle, le mécanisme de ce lien est encore mal compris. L’un des principaux obstacles aux progrès dans ce domaine est l’absence d’un modèle animal fiable pour reproduire la PF-PH. Cette étude visait à établir un modèle stable de rat PF-PH. Les rats ont été à jeun pendant la nuit avant l’intervention. Sous anesthésie au pentobarbital sodique (45 mg/kg), la trachée a été intubée à l’aide d’un tube PE50 inséré à une profondeur de 3 cm (la distance entre la glotte et le tube). La bléomycine (BLM) a été administrée par voie intratrachéale en une seule dose (5 mg/kg, dissoute dans 0,2 mL de NaCl à 0,9 %). Après l’injection, les rats ont immédiatement été tournés pour assurer une distribution uniforme du BLM. À 35 jours après l’injection de BLM, les rats présentaient une altération progressive de la fonction pulmonaire et une augmentation de la pression systolique ventriculaire droite et de l’hypertrophie ventriculaire droite, révélant les caractéristiques pathologiques de l’hypertension pulmonaire. Nous fournissons une méthode générale et fiable pour établir un modèle de PF-PH chez le rat.

Introduction

L’hypertension pulmonaire (HTP) due à une pneumopathie interstitielle (MPI) est fréquente cliniquement, avec une prévalence estimée de 10 % à 80 % chez les patients atteints de fibrose pulmonaire idiopathique (FPI), et elle est également fréquemment observée dans d’autres MPI fibrotiques 1,2. De nombreuses études ont montré que le développement de l’HTP est lié à une morbidité importante et à une survie réduite 3,4,5. Par rapport à l’hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) du groupe....

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Protocole

Les expériences sur les animaux décrites dans cette étude ont été approuvées par le Comité de soin et d’utilisation des animaux du premier hôpital affilié de l’Université de médecine de Guangzhou (numéro d’approbation éthique : 2018-456).

1. Acquisition de rats expérimentaux

  1. Divisez les rats en deux groupes : le groupe témoin normal et le groupe modèle, avec 7 rats dans chaque groupe. Utiliser des rats Sprague-Dawley (SD) mâles de 10 semaines pesant 200 ± 20 g pour l’étude

2. Induction du modèle de rat PF-PH

  1. Afin d’....

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Résultats

Fibrose pulmonaire induite par la bléomycine chez le rat
La bléomycine a été signalée comme un inducteur classique de la fibrose pulmonaire dans des modèles animaux7. Ici, les indices de fibrose pulmonaire ont été évalués après stimulation BLM. Tout d’abord, après 35 jours de traitement par BLM, nous avons effectué des tests de la fonction pulmonaire et avons constaté que la CVF (Figure 1E) et la compliance pulmonaire dynamique (

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Discussion

La fibrose pulmonaire idiopathique est une maladie progressive et mortelle avec une survie médiane de 2 à 3 ans à compter du diagnostic, ce qui suggère un pronostic sombre9. L’hypertension pulmonaire est une comorbidité fréquente de la FPI, qui détériore rapidement la FPI avec un pronostic aggravé15. De plus, les options thérapeutiques pour l’IPF-PH7 étaient limitées. Il est donc essentiel d’acquérir une compréhensio.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont pas de divulgations financières pertinentes.

Remerciements

Ce travail a été soutenu en partie par les subventions de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (82370063, 82170069, 82120108001, 82241012), du programme de R&D du laboratoire national de Guangzhou (GZNl2023A02013), du programme national de R&D clé de la Chine (2022YFE0131500), du département des sciences et de la technologie du Guangdong (2024A1515011208, 2022A1515012052, 2024A1515013104, 202102020019, 202201020538, 202201010069, 2023A03J0334), le projet indépendant du laboratoire clé d’État des maladies respiratoires (SKlRD-Z-202513), la Fondation de recherche médicale du Guangdong (A2023379) de l’Université médic....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
BleomycinMedChemExpressHY-17565A
Agent de couplageHYNAUTBX-CSRH
Fixateur de formolBiosharp)BL401B
Crème dépilatoireLUSENLS-B-TMG-50
Kit de coloration à l’hématoxyline eosine (HE)BeyotimeC0189S
IsofluraneRWD Life Science( Chine)R510-22-10
Masson Kit de teinture tricoloreBeyotimeC0189S
Saline normaleKERONGSLYS-001
seringueBeyotimeFS701-50pcs

Références

  1. Sm, N., et al. Clinical significance of pulmonary hypertension in interstitial lung disease: A consensus statement from the Pulmonary Vascular Research Institute's innovative drug development initiative-Group 3 pulmonary hypertension. Pulm Circ. 12 (3), e12127(2022).
  2. Nathan, S. D., et al.

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Mots-clés

Induction la bl omycinepression ventriculaire droitefonction pulmonaireremodelage vasculaire pulmonaireintubation trach alecapacit vitale forc ecoloration histologique

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