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Article de recherche

Effets de la pommade pour brûlures exposées humides sur la néovascularisation de la plaie et le mir-31-5p exosomal plasmatique chez les souris diabétiques

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DOI :

10.3791/68649

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26 août 2025

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1Department of Endocrinology, The Affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities, 2Department of Cardiology, General Hospital of Central Theater Command, 3Key Laboratory for the Prevention and Treatment of Diabetic Chronic Wounds in Baise City, 4Key Laboratory of Metabolic Diseases in Baise City

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Cet article décrit comment la pommade pour brûlures exposée à l’humidité favorise la réparation des plaies diabétiques en régulant dynamiquement la néovascularisation des plaies diabétiques et l’expression du plasma exosomal mir-31-5p.

Résumé

La pommade pour brûlures exposées à l’humidité (MEBO) est une médecine traditionnelle chinoise utilisée pour traiter les plaies diabétiques chroniques ; Cependant, le mécanisme sous-jacent n’est pas clair. Des preuves récentes suggèrent le rôle des exosomes et des miARN fonctionnels dans la néovascularisation des plaies. Ici, nous avons cherché à étudier les effets de MEBO sur la néovascularisation de la plaie et l’expression plasmatique exosomale mir-31-5p (pExo-mir-31-5p) chez des souris diabétiques. Un total de 120 souris C57BL/6 ont été divisées au hasard en un groupe témoin non diabétique (n = 24) et un groupe diabétique induit par la streptozotocine (n = 96), qui a ensuite été randomisé en groupes témoin diabétique, MEBO, beifuxin et MHY1485 (n = 24 chacun). Cinq groupes ont été établis avec des modèles de résection cutanée de pleine épaisseur, qui ont été traités avec une solution saline physiologique, une solution saline physiologique, MEBO, beifuxin et MHY1485, respectivement. Les jours 1, 7, 13 et 18, le taux de fermeture de la plaie, la densité des microvaisseaux et les niveaux d’expression de pExo-mir-31-5p, ainsi que les niveaux d’ARNm et de protéines VPS4a et Rab27a dans les tissus de la plaie, ont été analysés à l’aide d’ImageJ, de la coloration à l’hématoxyline-éosine (HE), de la réaction en chaîne par polymérase quantitative en temps réel (qPCR) et du western blot (WB), respectivement. De plus, les corrélations entre l’expression de VPS4a, de la protéine Rab27a, de pExo-mir-31-5p et la densité des microvaisseaux ont été analysées. Nous avons constaté que MEBO favorisait la réparation des plaies chez les souris diabétiques (p < 0,050). Il a amélioré la néovascularisation de la plaie au cours des stades précoce et intermédiaire de la cicatrisation, mais l’a inhibée au cours de la phase ultérieure (p < 0,050). MEBO régule à la hausse l’expression de l’ARNm et des protéines Vps4a et Rab27a dans les tissus de la plaie, ainsi que pExo-mir-31-5p pendant les stades précoces et intermédiaires de la cicatrisation, tout en les régulant à la baisse dans les stades ultérieurs (p < 0,050). De plus, l’expression de VPS4a, de la protéine Rab27a, de pExo-mir-31-5p et la densité des microvaisseaux étaient positivement corrélées chez les souris traitées par MEBO (p < 0,050). En conclusion, MEBO régule dynamiquement la néovascularisation des plaies et l’expression de pExo-mir-31-5p chez les souris diabétiques, fournissant un nouveau support théorique pour son application clinique.

Introduction

La prévalence du diabète sucré chez les patients âgés est élevée et augmente chaque année. La maladie est associée à des plaies diabétiques chroniques (CDW), qui ont un effet néfaste sur la santé, la fonction et la qualité de vie globale du patient1. En règle générale, la fermeture de la plaie implique quatre phases distinctes : l’hémostase, l’inflammation, la prolifération et la réépithélialisation2. Parmi celles-ci, la phase proliférative est la plus importante. Au cours de la phase proliférative précoce, les cellules endothéliales capillaires prolifèrent et migrent vers la plaie, faisant germer de nouveaux vaisseaux et formant un réseau complexe3. Cependant, dans les derniers stades de la réparation de la plaie, la majeure partie de la lumière capillaire subit une occlusion, une minorité se transformant en petites artères et veines. Chez les patients atteints de CDW, la perte de tissus, la nécrose et la gangrène, ainsi que différents niveaux d’inflammation et d’hyperglycémie, perturbent l’équilibre dynamique entre l’angiogenèse et l’antiangiogenèse, retardant la cicatrisation des plaies, en particulier lorsque l’angiogenèse est altérée 4,5,6. La pommade pour brûlures exposées à l’humidité (MEBO) est une médecine traditionnelle chinoise utilisée pour traiter les CDW, mais son mécanisme reste incertain. Récemment, de nombreuses études ont démontré que les miARN transportés par des exosomes pouvaient favoriser l’angiogenèse et donc favoriser la cicatrisation des plaies diabétiques 7,8. Cependant, peu d’études ont examiné l’association entre MEBO et les miARN portés par des exosomes. Par conséquent, il est nécessaire de révéler le mécanisme par lequel MEBO stimule l’angiogenèse dans les CDW du point de vue des exosomes et des miARN fonctionnels.

Les exosomes sont des vésicules membraneuses sphériques libérées par des cellules vivantes, mesurant une taille de 30 à 200 nm, une densité de 1,1 à 1,2 g/mL et contenant des protéines marqueurs comme CD81 et la susceptibilité tumorale 101 (TSG101)9. La production et la sécrétion d’exosomes sont classées en complexes de tri endosomal requis pour le transport (ESCRT) et en voies non dépendantes de l’ESCRT. Les régulateurs les plus critiques dans ces voies sont le tri des protéines vacuolaires 4 homologue a (VPS4a) et la protéine apparentée à Ras Rab-27a (Rab27a)10,11,12. Vps4a agit comme une ATPase, catalysant le processus de remodelage membranaire dépendant de l’ESCRT, qui régule la taille de l’exosome et le taux de formation de l’exosome13,14. Rab27a est une petite GTPase essentielle qui régule l’amarrage des corps multivésiculaires à la membrane plasmique15. La sécrétion d’exosomes est régulée négativement par la cible mammifère du complexe de rapamycine 1 (mTORC1)16, qui est activée par MHY1485 liaison compétitive au domaine structurel ATP de la rapamycine17. Dans l’ensemble, MHY1485 pourrait inhiber indirectement la synthèse et la sécrétion d’exosomes. Les exosomes peuvent être détectés dans presque tous les fluides corporels. Les exosomes plasmatiques sont plus productifs que les exosomes dérivés d’autres fluides corporels18. De plus, les exosomes protègent les acides nucléiques qu’ils transportent de la dégradation19.

Les miARN sont de petites molécules d’ARN non codantes qui régulent l’activité cellulaire20. Des exosomes ont été découverts en abondance dans de nombreux miARN cruciaux pour améliorer l’angiogenèse des plaies, en particulier mir-126, mir-125a et mir-31-5p. Une étude antérieure a démontré que les exosomes dérivés de cellules souches mésenchymateuses de la moelle osseuse surexprimant mir-126 favorisaient la prolifération, la migration et la formation de tubes de cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine in vitro en transférant mir-12621. Une autre étude a indiqué que les exosomes sécrétés par les cellules souches mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux humain transféraient le mir-125a aux cellules endothéliales et favorisaient l’angiogenèse en réprimant l’inhibiteur angiogénique delta-like 4 dans les plaies9. Yan et al. ont rapporté que mir-31-5p chargé dans les exosomes du lait améliorait les fonctions des cellules endothéliales in vitro, favorisait l’angiogenèse et améliorait la cicatrisation des plaies diabétiques in vivo22. Parmi ces miARN, mir-31-5p était le seul miARN qui était significativement régulé à la baisse dans les plaies de souris diabétiques par rapport à celui dans les plaies de souris normales22.

MEBO est une pommade huileuse qui peut être utilisée pour traiter les plaies réfractaires telles que les CDW 23,24. Cependant, le mécanisme de MEBO favorisant la cicatrisation des plaies n’a pas été élucidé. Des études antérieures ont montré que MEBO favorise la néovascularisation des plaies en régulant à la hausse l’expression du facteur de croissance de l’endothélium vasculaire chez les rats diabétiques25. Cependant, seules quelques études ont abordé cette question du point de vue des miARN portés par des exosomes. Dans cette étude, pour étudier les effets de MEBO sur les CDW, nous avons induit un modèle de plaie pleine épaisseur chez des souris diabétiques en utilisant la streptozotocine (STZ) et un régime riche en graisses. Nous avons montré que MEBO accélérait significativement la cicatrisation des plaies chez les souris diabétiques. De plus, nous avons étudié les effets de MEBO sur la densité des microvaisseaux, les niveaux d’expression de pExo-mir-31-5p, ainsi que l’ARNm VPS4a et Rab27a et la protéine dans les tissus des plaies. Par conséquent, nous avons émis l’hypothèse que MEBO favorisait la cicatrisation des plaies en régulant pExo-mir-31-5p pour réguler l’angiogenèse des plaies chez les souris diabétiques. La figure 1 présente un aperçu schématique de la conception de l’étude.

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Protocole

Tous les protocoles d’expérimentation animale ont été approuvés par le Comité de soin et d’utilisation des animaux de l’Université médicale de Youjiang pour les nationalités, à Baise, en Chine (2018051501). Des souris mâles C57BL/6 exemptes d’agents pathogènes spécifiques (FPS) (âgées de 7 semaines) ont été hébergées au Centre des animaux de laboratoire SPF du Collège médical de Youjiang pour les nationalités et nourries avec un régime ordinaire ou riche en graisses et de l’eau propre. Tout au long de l’étude, la température de la salle d’alimentation des animaux a été maintenue à 23 °C à 25 °C, l’humidité était de 40 % à 60 % et le cycle lumière/obscurité était de 12 h. Les soins aux animaux ont été prodigués conformément aux directives des National Institutes of Health des États-Unis et de l’Institut national de la santé de Chine (Beijing, Chine). Toutes les interventions chirurgicales ont été réalisées sous anesthésie avec du pentobarbital sodique (0,3 %, 50 mg/kg) selon un protocole standardisé établi dans notre laboratoire. Tous les efforts ont été déployés pour réduire le nombre d’animaux utilisés et pour minimiser l’inconfort des animaux. Toutes les sections de ce rapport sont conformes aux lignes directrices d’ARRIVE pour la déclaration de la recherche sur les animaux.

Modèle et traitement d’une plaie chez la souris
Au total, 120 souris ont été assignées au hasard à un groupe témoin non diabétique (NDB-CTR ; n = 24) ou diabétique (n = 96). Pour simuler le diabète de type 2 humain, les souris du groupe diabétique ont été nourries avec un régime riche en graisses et en sucre raffiné pendant 4 semaines, puis ont reçu une injection intrapéritonéale (ip) de STZ (100 mg / kg), une fois par jour, pendant 2 jours consécutifs après un jeûne de 16 heures. La glycémie à jeun a été mesurée les 5e et 6e jours après l’injection de STZ. Des souris dont la glycémie à jeun était supérieure à 16,7 mmol/L à deux reprises et qui présentaient des symptômes tels que la polyphagie, la polydipsie, la polyurie et la perte de poids ont été considérées comme des modèles de diabète efficaces26. Après 1 semaine, les poils dorsaux ont été rasés et une plaie cutanée ronde de pleine épaisseur (diamètre = 15 mm) a été générée sur le dos de chaque souris après l’administration intrapéritonéale de pentobarbital sodique (0,3 %, 50 mg / kg). Les souris du groupe diabétique ont été assignées au hasard aux groupes MEBO, BFX (beifuxin), DB-CTR (contrôle diabétique) ou MHY1485 (MHY). Les souris des groupes MEBO et BFX ont été traitées avec du gel MEBO (0,2 g/cm2) et BFX (0,2 g/cm2) appliqués sur la plaie une fois par jour, respectivement. Le gel BFX, dont le nom générique est le gel de facteur de croissance des fibroblastes de base bovin, est un médicament topique utilisé pour traiter les plaies chroniques27. Les souris des groupes NDB-CTR, DB-CTR et MHY ont été traitées avec une solution saline physiologique. Le groupe MHY a également été traité avec MHY1485 (10 mg/kg, ip) pendant 2 jours consécutifs. Les souris diabétiques ont reçu une injection sous-cutanée d’insuline à une dose de 2 à 4 UI/kg une fois par jour pour contrôler la glycémie.

Prélèvement d’échantillons
Les jours 1, 7, 13 et 18, six souris de chaque groupe ont été sélectionnées au hasard pour l’euthanasie par luxation cervicale, et des échantillons de tissus épidermiques en forme d’anneau, y compris la plaie, ont été prélevés à 0,5 cm du bord de la plaie avec des ciseaux à tissus stériles. Ensuite, les tissus de la plaie ont été collectés pour la coloration HE, l’analyse qPCR et les tests WB. Des échantillons de sang ont été prélevés sur des souris des groupes DB-CTR et MEBO en utilisant la méthode rétro-orbitale sous anesthésie au pentobarbital sodique. Des échantillons de sang ont été mélangés à de l’héparine dans des tubes anticoagulants et centrifugés à 3 000 x g pendant 15 minutes pour récupérer le surnageant plasmatique. Tous les échantillons ont été conservés à -80 °C. Pour calculer le taux de fermeture de la plaie, un appareil photo numérique a été utilisé pour capturer des images de la cicatrisation de la plaie à un point temporel fixe et à une distance égale avec une échelle graduée sur le côté. La zone de la plaie a été mesurée à l’aide du logiciel ImageJ. Le taux de fermeture de la plaie a été calculé comme suit :

taux de fermeture de la plaie ( %) = [W1-Wn] / W1 x 100 %

où W1 et Wn font référence aux zones de plaie aux jours 1 et n, respectivement.

Dosage histopathologique
Une coloration HE a été réalisée pour observer dynamiquement la cicatrisation pathologique des plaies. Après une fixation avec une solution de paraformaldéhyde à 4 % pendant 16 h, les tissus de la plaie ont été déshydratés, noyés dans de la paraffine, puis coupés en sections de 3 μm. La coloration HE a été réalisée sur des lames de tissus. Pour explorer la densité des microvaisseaux des tissus de la plaie, des lames de tissus ont été imagées à l’aide d’un microscope optique. Pour quantifier la densité des microvaisseaux de chaque échantillon, nous avons sélectionné la zone avec la densité capillaire la plus élevée sous un microscope 10x, puis sélectionné et photographié trois zones non chevauchantes sous un microscope 20x. Les densités des microvaisseaux ont été calculées et moyennées à l’aide d’ImageJ.

Isolement et caractérisation des exosomes plasmatiques
Une ultracentrifugation a été réalisée pour isoler les exosomes plasmatiques selon un protocole publié avec des modifications mineures28. Brièvement, 2 mL de plasma ont été centrifugés à 2 000 x g à 4 °C pendant 30 min. Le surnageant a été centrifugé à nouveau à 10 000 x g à 4 °C pendant 45 min pour éliminer les vésicules les plus grosses. Le surnageant a été filtré à travers une membrane filtrante de 0,45 μm, et le filtrat a été recueilli. Le filtrat a ensuite été centrifugé à 100 000 x g à 4 °C pendant 70 min. Après avoir retiré le surnageant, la pastille a été remise en suspension avec 10 mL de PBS 1x prérefroidi et centrifugée à 4 °C, 100 000 x g, pendant 70 min. Le surnageant a été retiré et la pastille a été remise en suspension avec 150 μL de PBS 1x prérefroidi et stocké à -80 °C. Pour confirmer les exosomes plasmatiques collectés ci-dessus, nous avons utilisé la microscopie électronique à transmission (TEM) pour déterminer la morphologie des exosomes, un système de cytométrie en nano-flux pour analyser la taille et la concentration des exosomes, et la WB pour détecter les niveaux d’expression des marqueurs d’exosomes CD81 et TSG101.

Extraction d’ARN, transcription inverse (RT) et qPCR
La qPCR a été réalisée pour quantifier les niveaux d’expression de l’ARNm de Vps4a, Rab27a et pExo-mir-31-5p. Des tissus de la plaie ont été prélevés pour extraire l’ARN total à l’aide d’un réactif d’extraction d’ARN. Une concentration totale d’ARN comprise entre 400 et 700 ng/μL a été jugée acceptable. Les échantillons d’ARN ont été transcrits en ADNc à l’aide de la transcriptase inverse avec la dsDNase conformément aux instructions du fabricant. La qPCR a été réalisée à l’aide du mélange SYBR Green qPCR (sans ROX). Comme pour mir-31-5p, l’ARN des exosomes plasmatiques a été extrait à l’aide du mini-kit, transcrit en sens inverse à l’aide du kit de synthèse d’ADNc First Strand et amplifié à l’aide de SYBR Green qPCR Master Mix. Les expressions des ARNm et des miARN ont été analysées à l’aide de la méthode 2-ΔΔCt par rapport à la β-actine et au cel-mir-39, respectivement. Les amorces utilisées sont présentées dans le tableau 1.

Transfert Western
Le test WB a été utilisé pour détecter les niveaux d’expression des protéines Vps4a et Rab27a, ainsi que les niveaux des marqueurs d’exosomes CD81 et TSG101. Les niveaux totaux de protéines des tissus de la plaie et des exosomes plasmatiques ont été extraits par le tampon de lyse RIPA, et la concentration en protéines a été déterminée par le kit de dosage des protéines de l’acide bicchoninique. Au total, 50 μg de protéines ont été séparés par du dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide. Après avoir été appliquées sur des membranes de fluorure de polyvinylidène, les membranes ont été bloquées avec de l’albumine sérique bovine, puis incubées à 4 °C pendant la nuit avec des anticorps contre Vps4a (1:3000), Rab27a (1:1000), glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogénase (GAPDH) (1:5000), CD81 (1:3000), TSG101 (1:3000), puis incubées avec des anticorps secondaires, conjugués à l’IgG peroxydase anti-lapin (1:3000), à 37 °C pendant 1 h. Les membranes ont été visualisées à l’aide d’un kit de chimiluminescence amélioré.

Analyse statistique
Toutes les données présentées dans cette étude ont été analysées pour en déterminer la signification statistique à l’aide du logiciel SPSS. Tous les résultats obtenus lors de ces analyses ont été visualisés à l’aide du logiciel GraphPad Prism. Les différences entre les deux groupes ont été examinées à l’aide d’un test t sur échantillon indépendant. Pour les comparaisons de groupes multiples, l’analyse à un facteur de variance a été utilisée pour les données de variance homogène, tandis que le test de Welch a été appliqué aux données de variance hétérogènes. De plus, nous avons utilisé le test de différence la moins significative pour la comparaison par paires de données de variance égale et le test T2 de Tamhane pour les données de variance inégale. Les données quantitatives sont présentées sous forme de moyenne ± d’écart-type. Les corrélations ont été analysées à l’aide de l’analyse de corrélation de Spearman pour des variables non normalement distribuées et ont été décrites comme des coefficients de corrélation et des intervalles de confiance à 95 %. P < 0,050 a été considéré comme statistiquement significatif. Toutes les expériences ont été répétées au moins trois fois.

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Résultats

MEBO accélère la cicatrisation des plaies chez les souris diabétiques
Pour valider l’efficacité de MEBO dans les plaies diabétiques, nous avons établi un modèle de plaie diabétique et pris des photos aux jours 1, 7, 13 et 18. Les plaies de chaque groupe ont cicatrisé progressivement au fil du temps (Figure 2A). Les plaies dans le groupe NDB-CTR ont complètement cicatrisé au 18e jour. Les plaies du groupe MEBO ont guéri le plus rapidement parmi les plaies diabétiques, form...

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Discussion

Les TCD, une complication du diabète, peuvent entraîner une mortalité et une invalidité importantes, et sont souvent associées à des troubles vasculaires29. MEBO est efficace dans le traitement des CDW ; Cependant, son mécanisme sous-jacent n’est pas clair30. Par conséquent, nous avons cherché à l’examiner du point de vue des exosomes et des miARN fonctionnels. Dans cette étude, nous avons constaté que le taux de fermeture de la plaie et la...

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts concurrents.

Remerciements

Cette étude a été soutenue par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine dans le cadre de la subvention [numéro 81960875], la Fondation des sciences naturelles du Guangxi dans le cadre de la subvention [numéro 2023GXNSFDA026008], le projet de développement et d’application de technologies médicales et de santé appropriées du Guangxi dans le cadre de la subvention [numéro S2022134], le projet de recherche autofinancé de la Commission de la santé de la région autonome Zhuang du Guangxi de médecine occidentale dans le cadre de la subvention [numéro 20210234], et le Bureau de la médecine traditionnelle chinoise du Guangxi projet de recherche dans le cadre de la subvention [numéro GZZC2020255].

Contribution de l’auteur :
Yuanyuan Xu : Rédaction - ébauche originale, Logiciel, Méthodologie, Enquête, Analyse formelle, Conceptualisation. Jianchang Xu : Ressources, méthodologie, enquête. Anbang Zhou : Enquête, Analyse formelle. Nimiao Cen : Visualisation, Lina Huang : Supervision. Biaoliang Wu : Rédaction-révision et édition, Ressources, Administration de projet, Méthodologie, Acquisition de financement, Conservation de données, Conceptualisation.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
1& fois ; PBS  ;Solarbio (Pékin, Chine)#P1020Solution tamponnée
Solution de paraformaldéhyde à 4 %Solarbio (Pékin, Chine)#P1110Fixer les tissus
IgG peroxydase anti-lapin conjuguée  ;Affinité#S0001Anticorps secondaires
Gel BeifuxinEssexbio (Zhuhai, Chine)#042404A06Une pommade pour traiter les plaies chroniques
Anticorps CD81Anticorps Signalway#41779Anticorps primaire
Kit de chimiluminescence améliorée  ;Epizyme(Chine)#SQ101Kit de chimiluminescence pour bande protéique
Anticorps anti-glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogénase (GAPDH)Affinité#AF7021Anticorps primaire
Prisme GraphPadhttps://www.graphpad.com/prism/Visualisation
ImageJ  ;https://imagej.net/ij/Mesurer la surface de la plaie
Kit de dosage instantané des protéines d’acide bicchoninique (BCA)  ;Epizyme(Chine)#ZJ102Déterminer la concentration en protéines
Système LightCycler96RocheÉquipement qPCR
MHY1485MedChemExpress (États-Unis)#326914-06-1Un activateur de la cible mammifère du complexe de rapamycine 1 (mTORC1)  ;
kit miRNeasy Mini  ;Tiangen (Chine)#217004Extraction d’ARN (miARN)
Pommade pour brûlures exposées à l’humiditéMebo (Shantou, Chine)#2403103BUne pommade pour traiter les plaies chroniques
Mélange qPCR MonAmp SYBR Green (sans ROX)  ;Monade (Chine)#MQ10101SKit qPCR (ARNm)
MonScript RTIII Mixage tout-en-un avec dsDNase  ;Monade (Chine)#MR05101SKit de transcription inverse (ARNm)
Système de cytométrie en flux nanoN30E (Chine)Un équipement pour analyser la taille et la concentration des exosomes
microscope optiqueOlympus (Tokyo, Japon)Observer la pathomorphologie tissulaire
solution saline physiologiqueKelun (Sichuan, Chine)#L24041709Solution saline physiologique
Membranes en fluorure de polyvinylidèneMillipore(États-Unis)#IPVH00010Membrane western blot
AmorcesGeneray Biotech Co., Ltd. (Shanghai, Chine)
Anticorps anti-Rab27aTechnologie de signalisation cellulaire#69295Anticorps primaire
Kit de synthèse d’ADNc RevertAid First StrandThermo Fisher (États-Unis)#K1622Kit de transcription inverse (miARN)
Tampon de lyse RIPASolarbio (Pékin, Chine)#R0010Extraction totale des protéines
dodécylsulfate de sodium&ndash ; polyacrylamide  ;Epizyme(Chine)#PG222Tampon d’électrophorèse
Pentobarbital de sodiumMerck (Shanghai, Chine)#P3761Anesthésique
Souris mâles C57BL/6 spécifiques exemptes d’agents pathogènesGuangdong Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd (Guangdong, Chine)Animaux d’expérimentation
SPSShttps://www.ibm.com/spssAnalyse statistique
StreptozotocineSolarbio (Pékin, Chine)#S8050Induire un modèle de souris diabétique  ;
SYBR Green qPCR Master Mix  ;Roche (Suisse)#4943914001-SRKit qPCR (miARN)
Microscopie électronique à transmissionHitachi (Japon)HT-7700Un équipement pour déterminer la morphologie des exosomes
TRIZOL  ;Invitrogen (États-Unis)#15596026CNExtraction d’ARN (ARNm)
Anticorps TSG101Abcam# AB125011Anticorps primaire
Anticorps Vps4aAbcam# AB197896Anticorps primaire

Références

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