Article de méthode

Un modèle murinaire standardisé avec un flux de travail à trois personnes pour étudier le rejet cellulaire aigu et médié par anticorps lors de la xénotransplantation

DOI :

10.3791/68756

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20 mars 2026

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1Department of Urology, Beijing Jishuitan Hospital Affiliated to Capital Medical University, 2Beijing Key Laboratory of Organ Xenotransplantation, Fuwai Hospital, National Center for Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, 3State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Fuwai Hospital, National Center for Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, 4First Teaching Hospital of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, 5Department of Cardiac Surgery, Fuwai Hospital, National Center for Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, 6Department of Cardiac Surgery, Fuwai Yunnan Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences, Affiliated Cardiovascular Hospital of Kunming Medical University, 7Shenzhen Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Fuwai Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences, 8Sanya Institute of China Agricultural University

Dans cet article

Résumé

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Cette étude établit deux modèles standardisés de xénotransplantation murine pour reproduire spécifiquement le rejet cellulaire aigu et le rejet aigu médié par anticorps. Ces modèles constituent une plateforme fiable pour étudier les mécanismes du rejet immunitaire des xénogreffes, évaluer les stratégies immunosuppressives et faire progresser la recherche préclinique sur la xénotransplantation.

Résumé

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Malgré les avancées récentes en xénotransplantation, le rejet aigu reste un obstacle majeur à son application clinique. Le rejet cellulaire aigu (ACR) et le rejet aigu médié par anticorps (RAM) sont les principales réponses immunitaires conduisant à l’échec précoce des greffons chez les receveurs de xénogreffes. Bien que de grands modèles animaux tels que les primates non humains et les porcs génétiquement modifiés aient apporté des informations précieuses, leur utilisation est limitée par des coûts élevés, des contraintes éthiques et une variabilité expérimentale significative. Les modèles de petits animaux offrent une alternative pratique et reproductible aux études mécanistes du rejet immunitaire. Dans cette étude, deux modèles standardisés de xénotransplantation murine ont été développés pour imiter spécifiquement l’ACR et la RAM (AMR). Pour garantir la reproductibilité et minimiser la variabilité liée à l’opérateur, un protocole chirurgical structuré à trois personnes avec un flux de travail en chaîne de montage a été mis en place, permettant une génération cohérente de modèles avec une grande efficacité et qualité. Les modèles résultants non seulement reproduisent les principales caractéristiques immunopathologiques du rejet clinique des xénogreffes, mais offrent également une plateforme solide pour étudier les mécanismes immunitaires et évaluer des stratégies immunosuppressives ciblées. Ces modèles aideront à accélérer le développement préclinique des thérapies de xénotransplantation.

Introduction

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La xénotransplantation est apparue comme l’une des stratégies les plus prometteuses pour remédier à la pénurie d’organes de donneurs destinés à la transplantation. Ces dernières années, les avancées rapides dans les technologies d’édition génétique, les stratégies de régulation immunitaire et le génie biomédical ont conduit à des avancées significatives dans cedomaine 1. Au cours des trois dernières années, plusieurs équipes de recherche à travers le monde ont mené des essais cliniques portant sur la xénotransplantation chez l’humain, notamment deux cas de transplantation de cœur de porc génétiquement modifié à....

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Protocole

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Ce protocole peut être réalisé par un seul opérateur ou par une équipe de trois personnes, chaque membre étant responsable respectivement du prélèvement du cœur du donneur, de la préparation du receveur et de l’anastomose du cœur du donneur. L’ensemble de la procédure est réalisé en 10 minutes, permettant une génération de modèles rapide, à haut débit et standardisée.

Les expériences animales de cette étude ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’hôpital Fuwai, Académie chinoise des sciences médicales (Approbation n° 0108-1-70-ZX(X)-41). Toutes les ....

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Résultats

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La figure 1 montre le flux de travail collaboratif standardisé à trois personnes pour générer un modèle de xénotransplantation murine. Dans ce système, trois opérateurs travaillent en parallèle, chacun accomplissant une tâche désignée à plusieurs reprises : préparation du receveur, prélèvement de cœur par donneur ou anastomose cardiaque par donneur. Cette division du travail permet de terminer un modèle complet de greffe toutes les 10 minutes. Alors qu’un se.......

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Discussion

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La xénotransplantation murine est une procédure hautement invasive qui exige un haut niveau de compétence technique et de constance de la part de l’opérateur. Lors de l’établissement du modèle, l’opérateur a un impact significatif sur les résultatsexpérimentaux 14,15. Dans un flux de travail monopersonnel, la complexité et la durée de la procédure entraînent un temps de fonctionnement approximatif de 30 minutes par modèle, ce qui.......

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Déclarations de divulgation

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Les auteurs déclarent ne pas exister de conflit d’intérêts.

Remerciements

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Ce travail a été financé par le Frontier Biotechnology Key Project du National Key R&D Program du ministère chinois des Sciences et de la Technologie (2023YFC3404300), le National Key Research and Development Program de Chine (2023YFF0724701), les fonds de recherche clinique pour les hôpitaux centraux de haut niveau de l’hôpital de Fuwai, l’Académie chinoise des sciences médicales, une étude préclinique sur les cœurs de porc de donneurs xénogènes multi-gènes modifiés par plusieurs gènes pour la transplantation orthotopique cardiaque chez les enfants atteints de cœur Échec (2025-GSP-ZD-4), et le projet du Laboratoire clé d’État des mal....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Anti-CD3 antibodyAbcamab16669
Anti-CD68 antibodyBiossbs-1432R
DAPIThermofisherP36971
Crème dépilatoireVeet-
Stylo électrocautèreYuyan Instrument-
Anticorps secondaires fluorescentsThermofisherA-11008
Kit de coloration HEBeyotimeC0105S
Machine à glaçonsShjingmiIMS-20
Seringues à insulineKDLU-40
Gel de lidocaïneTide Pharm
MéloxicamSigma-Aldrich444800
Pinces microchirurgicalesZHENHAOFS217
Porte-aiguilles microchirurgicalBIOFIVENHH01231
Ciseaux microchirurgicauxZHENHAOFS237
Sérum physiologiqueKelun Pharmaceutical-
Tuyaux en polyimideGuangzhou Wanlixin Metal Products Co., Ltd.-Diamètre intérieur : 0,3-0,5 mm
Tuyaux en polyimideGuangzhou Wanlixin Metal Products Co., Ltd.-Diamètre intérieur : 0,4-0,7 mm
Solution de povidone-iodeINOHV-
Héparine sodiqueQianhong bio-pharma-
StéréomicroscopeMurziderMSD204
Fils chirurgicauxJinhuan MedicalFils de soie 8-0 et 4-0
Coussin de réchauffement chirurgicalHani Pet-
TribromoéthanolJitianbioJT0781
Solution du WisconsinBelzer-
Pinces vasculairesRWD LifeR31005-10

Références

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  1. Ali, A., Kemter, E., Wolf, E. Advances in organ and tissue xenotransplantation. Annu Rev Anim Biosci. 12, 369-390 (2024).
  2. Griffith, B. P., et al. Genetically modified porcine-to-human cardiac xenotransplantation. N Engl J Med. 387 (1), 35-44 (2022).

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Mots-clés

X notransplantation murinerejet cellulaire aigurejet de x nogreffemod les animaux de petite taillerejet immunitairestrat gies immunosuppressivesd faillance de greffex notransplantation pr clinique

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