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Article de méthode

Établir un modèle porcin pour étudier la préservation dynamique et la transplantation de la greffe d’œil entier

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DOI :

10.3791/69179

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25 novembre 2025

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Dans cet article

Résumé

Un modèle détaillé et reproductible de transplantation complète de l’œil porcin (WET) est décrit, de la prélèvement chirurgical à l’initiation de la perfusion machine, permettant l’étude de la préservation dynamique de la WET lors de la transplantation.

Résumé

La toute première greffe de l’œil entier (WET) chez l’humain a ravivé un nouvel espoir chez les patients ayant perdu la vue à cause d’une lésion ophtalmique majeure, mais d’importants défis restent à relever avant que la restauration de la vision par la WET ne devienne réalisable. Parmi ceux-ci, l’un des défis les plus critiques est la préservation ex vivo . Le globe oculaire, en particulier ses composantes neuronales telles que la rétine et le nerf optique, subit une dégénérescence rapide et irréversible en quelques minutes à moins qu’une préservation adéquate ne soit assurée. Le stockage statique à froid (SCS) reste la référence en allotransplantation composite vascularisée (VCA), mais n’est pas adapté à la préservation ex vivo à l’humidité en raison de son incapacité à supprimer ou soutenir suffisamment le métabolisme, entraînant une perte de viabilité et de fonction du greffon. La perfusion sous-normotherme de machines (SNMP) s’est imposée comme une alternative prometteuse au SCS, offrant le potentiel non seulement de préserver les greffons mais aussi de les reconditionner. Notre groupe a réussi à traduire SNMP de la transplantation d’organes solides à plusieurs modèles VCA, démontrant sa faisabilité et ses avantages. Nous rapportons ici l’application de SNMP pour préserver un WET chez les porcs, détaillant le modèle anatomique et le protocole de préservation. Cette approche représente une avancée majeure dans l’optimisation des techniques de conservation et de transplantation de l’humidité.

Introduction

Les allotransplantations composites vascularisées (ACV) représentent une avancée significative en chirurgie reconstructive, offrant des résultats esthétiques et fonctionnels inégalés pour les patients présentant des lésionscomplexes 1,2. Cependant, la perte de vision liée au globe oculaire reste une source majeure d’altération des blessures au visage. La récente première greffe complète de l’œil (WET) a ravivé un nouvel espoir chezles patients 3,4. Bien que la vue n’ait pas été retrouvée, l’imagerie fonctionnelle a dém....

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Protocole

L’approbation institutionnelle pour cette étude a été obtenue du comité local de soins et d’utilisation des animaux institutionnels (protocole #2024N000205). Tous les travaux sur les animaux suivaient les directives31 de l’Animal Research : Reporting of In Vivo Experiments et étaient conformes aux recommandations du Bureau américain de révision des soins et de l’utilisation des animaux (ACURO)32. Tous les WET ont été acquis auprès de porcs en instance de prélèvement d’organes terminaux, selon les principes « 3-R» 33. Les animaux pesant entre 30 kg et 50 k....

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Résultats

Un test de faisabilité préliminaire a été réalisé sur une période de 6 heures de SNMP, suivi de 2 heures de perfusion machine normotherme (PNN) avec du sang total afin d’évaluer la bonne reprise de l’ensemble du greffon et de simuler la replantation. Pendant la phase SNMP, un écoulement régulier a été observé, et la simulation de réperfusion sanguine totale a démontré une recoloration réussie de l’ensemble du greffon. Les paramètres de perfusion ont également confirmé la faisabilité de l.......

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Discussion

Plus de vingt ans après les premiers cas cliniques, l’ACV continue de faire face à d’importants défis de préservation immunologique et ex vivo , limitant sa disponibilitégénéralisée à 37. Ces défis sont encore plus marqués dans le cas du WET, qui offre des perspectives passionnantes pour la restauration de la vision mais présente des obstacles uniques, tels que la réussite de la reconnexion du nerf optique, la préservation de la fonctionnalité des segment.......

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Déclarations de divulgation

Certains auteurs déclarent des intérêts concurrents. Les Drs Uygun, Lellouch et Cetrulo ont déposé des demandes de brevet pertinentes pour cette étude. Les Drs Korkut Uygun et Basak Uygun ont un intérêt financier et siègent au conseil consultatif scientifique de Sylvatica Biotech Inc., une entreprise axée sur le développement de technologies de préservation des organes à taux élevé de zéro. Les intérêts concurrents pour les enquêteurs du MGH sont gérés par le MGB conformément à leurs politiques de conflit d’intérêts. Tous les auteurs restants déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts.

Remerciements

Ce travail a été partiellement financé par les National Institutes of Health sous la subvention n° R01AR082825 (BEU), R01EB028782 (KU), DoD RTRP RT240044 (KU, AGL, CLC), Shriners Children’s 84308 (YB), et ARPA-H sous-subvention FY25.1065.001 (CLC), ainsi que par la National Science Foundation sous la subvention n° EEC 1941543 (KU). HO et YB ont reçu des financements de la Fondation des Gueules Cassées. Le soutien de la Société Française de Chirurgie Plastique, Reconstructrice et Esthétique (SOFCPRE, France) à HO et YB est grandement reconnu.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Pinces AdsonOutils scientifiques finement11019-12Outil chirurgical
Système d’oxygénation Affinity PixieMedtronicBBP241Oxygénateur
Angiocath (24 G)Becton Dickinson381112Cathéter de canulation
Albumine sérique de BovinSigma-AldrichA9647Composante de perfusation
Chlorure de calcium dihydréSigma-Aldrich223506Composante de perfusation
Dioxyde de carbone, oxygèneAirgasUN3156Mélange de dioxyde de carbone oxygène   ; GAS  ;
Cathéter 24 GDutscher921048Canulation artérielle
D-(+)-Glucose monohydrateSigma-Aldrich49159Composante de perfusation
DexaméthasoneSigma-AldrichD2915Composante de perfusation
DextranThermosciences406271000Composante de perfusation
Pinces dilatatricesAROSurgical11.946.1102Outil chirurgical
Excel  ;MicrosoftTableau Excel
Injection d’héparine sodiqueEugia Pharma63739-953-25Composante de perfusation
Humulin Insuline régulière humaineLilly0002-8215-01Composante de perfusation
Hydrocortisone sodique succinatePfizer0009-0011-03Composante de perfusation
LigaclipEthiconMCS20Clips vasculaires chirurgicaux
Coupe-os ListonOutils scientifiques finement16104-19Outil chirurgical
Chlorure de magnésium hexa-hydrateSigma-AldrichM9272Composante de perfusation
MasterFlex L/SCole-Parmer77200-32Pompe à rouleaux
Pinces microchirurgicalesOutils scientifiques finement11253-20Outil chirurgical
Élévateur périostéAROSurgical46.415.18Outil chirurgical
Polyéthylène glycol 35000Sigma-Aldrich25322-68-3Composante de perfusation
Chlorure de potassiumSigma-Aldrich7447-40-7Composante de perfusation
Moniteur de pression, portable, PM-P-1Instrumentation des systèmes vivantsPM-P-1Capteur de pression
Prism  ;GraphPadv. 10.1.1Logiciels d’analyse statistique
Radnoti  ; Chambre de conformité du piège à bullesRadnoti130149Piège à bulles
RAPIDPoint 500Siemens500Système de gaz sanguins
Scie réiproquanteStryker5100-37Outil chirurgical
RongeurOutils scientifiques finement16002-18Outil chirurgical
Lame de scalpel (n15)Outils scientifiques finement10015-00Outil chirurgical
Lame de scalpel (n23)Outils scientifiques finement10023-00Outil chirurgical
Suture en soie 3-0EthiconP683HSuture
Bicarbonate de sodiumSigma-AldrichS5761Composante de perfusation
Chlorure de sodiumSigma-AldrichS9888Composante de perfusation
Hydroxyde de sodiumSigma-Aldrich72068Composante de perfusation
Phosphate de sodium monobasique dihydrate   ;Sigma-Aldrich71505Composante de perfusation
Ciseaux StevensAROSurgical07.367.13Outil chirurgical
Seringue 1 mLBD309659Acquisition d’échantillons
Seringue 10 mLDutscher300912Rinçage de greffe
Caméra thermiqueFlir Onehttps://www.flir.fr/products/flir-one-gen-3/?vertical=condition+monitoring&segment=solutionsSurveillance de la température de perfusion
Tubulure (n° ; 16)Masterflex13-310-282Installation de perfusion machine
Chlorhydrate de vancomycineSlate Run Pharmaceuticals70436-021-82Composante de perfusation

Références

  1. Lellouch, A. G., Lantieri, L. A second chance at life. Camb Q Healthc Ethics. 28 (3), 463-467 (2019).
  2. Tchiloemba, B., et al. Long-term outcomes after facial allotransplantation: Systematic review of the literature. Transplantation. 105 (8), 1869-1880 (2....

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Réimpressions et autorisations

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