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Terfezia claveryi est une truffe comestible du désert, traditionnellement consommée dans les régions arides. Ces dernières années, elle a suscité un intérêt scientifique croissant en raison de ses propriétés potentielles antioxydantes, antimicrobiennes et thérapeutiques, suggérant des applications possibles dans les domaines de l’alimentation et de la santé. Cependant, malgré les preuves croissantes de son potentiel biologique, l’influence des différentes stratégies d’extraction sur la récupération des composés bioactifs et le profil de bioactivité in vitro résultant de Terfezia claveryi n’a pas encore été clarifiée dans la littérature. Dans cette étude, la bioactivité in vitro des extraits de Terfezia claveryi obtenus à l’aide de différentes méthodes d’extraction et solvants de polarité variable a été évaluée. Le rendement d’extraction a été déterminé, et les extraits obtenus ont été évalués pour leurs activités antioxydantes, antimicrobiennes, antibiofilms et cytotoxiques à l’aide de systèmes de test établis. La capacité antioxydante a été mesurée à l’aide de tests 2,2-diphényl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2′-azino-bis (3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique) (ABTS) et du pouvoir antioxydant réduction ferrique (FRAP), tandis que les effets cytotoxiques ont été étudiés dans les cellules neuroblastomes SH-SY5Y. Le rendement d’extraction variait selon la méthode et la polarité du solvant, le rendement le plus élevé étant obtenu à partir de l’extrait aqueux préparé par la méthode d’extraction assistée par ultrasons (EAU) (18,40 %). Il a été déterminé que l’activité antioxydante présentait des différences significatives selon la méthode d’extraction, et que les extraits aqueux obtenus par la méthode d’extraction assistée par macération (MAE) présentaient un profil riche en composés phénoliques ainsi qu’une capacité de récupération radicale la plus forte. L’analyse LC-MS/MS de cet extrait a révélé la présence de neuf composés phénoliques ; L’acide quinique et l’acide chlorogénique ont été identifiés comme les composants dominants. En revanche, les extraits dérivés de Soxhlet ont induit des effets cytotoxiques plus importants dans les cellules SH-SY5Y. Les réponses antimicrobiennes et antibiofilms ont montré une variation relativement limitée entre les méthodes d’extraction, indiquant une dépendance moindre à la stratégie d’extraction pour ces activités. Dans l’ensemble, ces résultats démontrent que la méthode d’extraction biophysique et la sélection des solvants sont des déterminants critiques du profil bioactif in vitro des extraits de Terfezia claveryi , avec des effets marqués observés pour les activités antioxydantes et cytotoxiques.