Efficacité des revêtements antiviraux de surface
Les tests de viabilité en surface ont confirmé que tous les matériaux de revêtement testés possédaient des propriétés antivirales, le revêtement VS démontrant le taux d’inactivation viral le plus lent (Figure 2A). L’analyse statistique a confirmé une diminution significative des concentrations de virus infectieux à 1 min et 5 min par rapport à la concentration initiale pour chaque revêtement et contrôle (p < 0,001, Figure 2B, Tableau supplémentaire 5). Le revêtement expérimental de surface à base de cuivre B4 a obtenu la réduction la plus rapide, réduisant le nombre de virus infectieux jusqu’à trois ordres de grandeur en 5 minutes, et les virus sont devenus indétectables après 15 minutes (limite de détection : 100 PFU/mL). D’autres revêtements, A6 et VS-B, ont également permis l’inactivation complète de Phi6 en 25 et 60 minutes respectivement (Figure 2A).

Figure 2 : Effet antiviral des revêtements de surface sur l’infectiosité virale. (A) Perte de particules infectieuses en fonction du temps. (B) Rapport de perte de particules virales infectieuses comparé au point de temps de 0 min. Les spécifications de revêtement sont listées dans le Tableau 1 et dans le Tableau Supplémentaire 3. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.
Comparé au témoin, dans les 5 premières minutes, l’inactivation du virus a été la moins efficace avec le revêtement A6 (p = 0,006 à 1 min et p = 0,012 à 5 min, Tableau Supplémentaire 6), suivi de près par le revêtement VS (p = 0,001 à 1 min et p = 0,017 à 5 min, Tableau Supplémentaire 6). Le revêtement B4 présentait une inactivation réduite par rapport au contrôle au point temporel de 1 minute (p = 0,001, Tableau Supplémentaire 6) mais ne différait pas significativement du contrôle au point de 5 minutes (p > 0,05, Tableau Supplémentaire 6). Sur une période plus longue, le VS-B a montré une inactivation du virus accrue, similaire à celle de B4 et A6. Les résultats détaillés de l’analyse statistique sont fournis dans le Tableau Supplémentaire 6.
Effet du revêtement antiviral VS-B sur l’efficacité du filtre/pré-filtre
Les expériences ont montré que les trois préfiltres étudiés, BP-6, S-11 et FMR-5, étaient également efficaces pour réduire significativement le nombre de virus infectieux passant à travers eux de 1,5 à 2,0 ordres de grandeur par rapport à la configuration sans filtre (Figure 3A, Tableau supplémentaire 7). Les filtres GF-2 ont réduit la charge virale d’au moins six ordres de grandeur, et aucune plaque infectieuse du virus Phi6 n’a été détectée dans la limite de détection (indiquée comme données non détectées (*) dans la Figure 3A).
Le revêtement VS-B n’a pas affecté de manière significative l’efficacité de la filtration du virus infectieux (Figure 3B). Pour les pré-filtres S-11 et FMR-5, la différence dans le nombre de virus infectieux passant par les préfiltres recouverts et non revêtus se situait dans l’écart-type (SD), indiquant l’insignifiance de cette différence (Tableau Supplémentaire 8). Étonnamment, le préfiltre BP-6 non revêtu a mieux performé que le préfiltre BP-6 recouvert durant les 90 premières minutes. Cependant, les différences entre les préfiltres revêtus et non revêtus se sont révélées statistiquement insignifiantes (p > 0,05, Tableau supplémentaire 8).

Figure 3 : Concentrations moyennes du virus infectieux nébuleux Phi6 sur les plaques d’impaction. (A) Pour le filtre GF-2, configuration sans filtre et préfiltres pré-filtres. (B) Pour les pré-filtres uniquement. Les barres d’erreur représentent l’écart-type (SD), et les types de filtres sont listés dans le Tableau 1. VS-B indique des filtres revêtus. Les données du filtre GF-2 sont passées en dessous de la limite de détection et sont indiquées par une ligne pointillée. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.
Les résultats de l’expérience qRT-PCR ont montré que les préfiltres réduisaient le nombre de copies du génome des virus passant par les préfiltres jusqu’à deux ordres de grandeur, tandis que le filtre GF-2 a montré une diminution allant jusqu’à quatre ordres de grandeur par rapport à la configuration sans filtre (Figure 4A, Tableau supplémentaire 9). Pendant les 30 premières minutes, les différences entre les préfiltres et la configuration sans filtre sont restées minimes, tandis qu’à partir des 60 minutes, les préfiltres ont montré une efficacité de filtrage mécanique accrue (Figure 4A, Tableau Supplémentaire 10). Le revêtement VS-B n’a pas affecté le nombre de copies du génome viral passant à travers le filtre (Figure 4B). Les différences dans le nombre de copies du génome se situaient dans l’écart-type (p > 0,05, Tableau supplémentaire 10).

Figure 4 : Concentrations moyennes de copies du génome viral du virus Phi6 nébulisé sur les plaques d’impaction. (A) Pour le filtre GF-2, la configuration sans filtre et les préfiltres. (B) Pour les pré-filtres uniquement. Les barres d’erreur représentent l’écart-type (SD), et les types de filtres sont listés dans le Tableau 1. VS-B indique des filtres revêtus. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.
Les figures 3 et 4 montrent que le nombre de virus infectieux (PFU/mL) par rapport au nombre total de copies du génome viral passant par le filtre est environ deux ordres de grandeur plus petit pour les pré-filtres et le filtre GF-2, et seulement un ordre de grandeur plus petit sans filtre. Cela suggère que l’effet du filtrage, même avec un flux d’air doux, peut être mécaniquement destructeur pour les particules virales, entraînant une perte d’infectivité.
Sur la base du débit d’air expérimental (2 L/min) et de la surface estimée du filtre (~20cm 2), la vitesse de face était d’environ 0,01 à 0,02 m/s. Les valeurs typiques de porosité pour les filtres fibreux varient d’environ 0,7 à 0,98, selon le matériau et la densité d’emballage, les filtres de type HEPA en fibre de verre présentant généralement une porosité plus faible (~0,7–0,9) comparée aux préfiltres synthétiques plus ouverts (~0,85–0,98)47,48. En tenant compte de la porosité du filtre et des conditions d’écoulement interne, la vitesse interstitielle dans la matrice du filtre a été estimée à être légèrement supérieure à la vitesse de face (0,02–0,03 m/s). En utilisant les épaisseurs du filtre et en intégrant les facteurs de tortuosité (1,2–2,0), le temps de résidence effectif des particules d’aérosol dans la structure du filtre a été estimé à environ 0,03 à 0,4 s49. Ces temps d’interaction inférieurs à la seconde indiquent que le contact virus–surface est très transitoire, limitant la contribution des revêtements antiviraux lors de la filtration en un seul passage.
Effet du revêtement antiviral VS sur les filtres utilisés
Les filtres GF-2 recouverts et non revêtus utilisés dans les purificateurs d’air pendant 3 mois dans les deux restaurants choisis (Figure 3 et Figure 4 supplémentaire) ont été étudiés pour leur capacité de filtration. Dans les mêmes conditions expérimentales, des filtres non recouverts (témoins) non recouverts sont passés à travers 1,23 × 102 PFU/mL de virus infectieux. Des filtres utilisés et non revêtus provenant du restaurant gastronomique et de la cafétéria du personnel ont délivré respectivement ~3 PFU/mL et 2,3 × 101 PFU/mL de virus infectieux. En revanche, les filtres recouverts de VS provenant d’un restaurant gastronomique et d’une cafétéria du personnel ont dépassé respectivement 5,3 × 101 PFU/mL et 4,6 × 101 PFU/mL de virus infectieux (Figure 5). Des différences statistiquement significatives dans le nombre de virus infectieux ont été observées entre les filtres, les filtres GF-2 non recouverts utilisés sur 3 mois montrant la réduction la plus marquée (Figure 5 ; χ2(2) = 11,432, p = 0,022, Tableau supplémentaire 11). Les résultats obtenus avec les filtres GF-2 revêtus de 3 mois ont donné des résultats similaires à ceux des filtres GF-2 non revêtus non revêtus à p > 0,05 (Tableau supplémentaire 12).

Figure 5 : Concentrations de virus infectieux après avoir testé des filtres usagés âgés de trois mois. Chaque point de données représente la moyenne de trois expériences et l’écart-type calculé sur trois répétitions. VS = Agent de surface en cuivre et argent Viral Safe ; GF-2 = filtre à fibre de verre double couche GF-2, non revêtu (filtre de type HEPA) ; Les cases représentent un intervalle de confiance à 95 % pour la moyenne, qui est la ligne noire entre l’intervalle inférieur et supérieur. Les barres d’erreur représentent l’écart-type (DE) pour chaque type de filtre. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.
Les résultats qRT-PCR des filtres utilisés, non utilisés, revêtus et non revêtus sont présentés à la Figure 6. les données qRT-PCR des filtres non revêtus (témoins) non recouverts ont montré 2,7 × 10copies de 3 copies/mL de copies du génome viral. Les données des filtres utilisés non revêtus provenant du restaurant gastronomique et de la cafétéria du personnel affichaient respectivement 3,6 × 10copies de 2 mL et 2,4 × 10copies de 3 mL de copies virales, tandis que les filtres VS usagés provenant du restaurant gastronomique et de la cafétéria du personnel affichaient respectivement 2,8 × 10copies de 3 mL et 4,6 × 10copies de 3 mL (Figure 6). Le filtre GF-2 utilisé, non revêtu, provenant du restaurant gastronomique a été significativement plus efficace pour réduire le nombre de copies du génome viral comparé au filtre utilisé non revêtu de la cafétéria du personnel (p = 0,012), ou au filtre VS utilisé recouvert dans un restaurant gastronomique (p < 0,001), ou au filtre VS utilisé de la cafétéria du personnel (p = 0,005) (Tableau supplémentaire 13 et Tableau supplémentaire 14)). Cependant, comparé au filtre GF-2 non utilisé et non revêtu, le filtre GF-2 non revêtu utilisé du restaurant gastronomique n’a montré aucune différence statistiquement significative (p>0,05). Les résultats détaillés de l’analyse statistique sont présentés dans le tableau supplémentaire 14.

Figure 6 : Concentration des nombres de copies du génome viral après avoir testé des filtres usagés âgés de trois mois. Chaque point de données représente la moyenne de trois expériences et l’écart-type calculé. VS = Agent de surface en cuivre et argent Viral Safe ; GF-2 = filtre à fibre de verre double couche GF-2, non revêtu (filtre de type HEPA) ; Les cases représentent un intervalle de confiance à 95 % pour la moyenne, qui est la ligne noire entre l’intervalle inférieur et supérieur. Les barres d’erreur représentent l’écart-type (DE) pour chaque type de filtre. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.
Pour clarifier les différences observées dans la performance du filtre, des tests d’hydrophobicité et de lipophilité ont été réalisés. Tous les filtres utilisés dans le restaurant gastronomique et la cafétéria du personnel présentaient une forte hydrophobicité sur les deux surfaces (côté intérieur — flux d’air entrant ; côté extérieur — flux d’air sortant), l’angle de contact initial des gouttelettes d’eau dépassant systématiquement 120 degrés, comme capturé sur les photographies (non montrées). Les mesures du temps de pénétration des gouttes d’eau (WDPT) ont indiqué une forte propriété hydrofuge, toutes les valeurs dépassant 7200 s. La variabilité entre les tests répétés était plus grande que celle entre les types de filtres, potentiellement due à des perturbations mécaniques des filtres utilisés. Par conséquent, aucune différence significative n’a été détectée entre les filtres utilisant ces méthodes.
La lipophilicité a été évaluée en appliquant des gouttelettes d’huile de colza sur les surfaces du filtre. Les filtres non revêtus ont constamment montré une faible lipophilité, l’angle de contact des gouttelettes restant au-dessus de 120 degrés tout au long du test. En revanche, les filtres Viral Safe recouverts ont montré une propagation rapide des gouttelettes, avec un angle approximatif inférieur à 30 degrés enregistré 60 s après application (Figure supplémentaire 5). Il reste incertain si cette augmentation de la lipophilité résulte du revêtement lui-même ou du processus d’application.
DISPONIBILITÉ DES DONNÉES
Les données brutes soutenant les résultats de cette étude sont disponibles dans le Fichier Supplémentaire 1.
Figure supplémentaire 1 : Chambre aérosol sur mesure et ses composants.Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Figure 2 complémentaire : Photos de filtres, pré-filtres et revêtements. (A) préfiltre FMR-5 en polyester, (B) préfiltre BP-6 Bulpren, (C) préfiltre S-11 en polyester, (D) filtre GF-2 en fibre de verre double couche. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Figure complémentaire 3 : La disposition de la salle de restaurant gastronomique où les purificateurs d’air (voir Table of Materials) étaient utilisés, marquée par des rectangles bleus. Des rectangles jaunes marquent les tables, et un rectangle gris foncé marque la porte. Un carré dans la grille représente 1m 2. Taille de la chambre ~60m2. Environ 30 invités viennent chaque jour. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Figure supplémentaire 4 : La disposition de l’usine de confiserie, de la cafétéria du personnel, où étaient utilisés des purificateurs d’air (voir Tableau des matériaux), marqués par des rectangles bleus. Les rectangles jaunes marquent les tables, les rectangles gris foncé marquent les portes, les rectangles gris marquent les tables en libre-service, et les rectangles noirs marquent les colonnes de soutien. Un carré dans la grille représente 1m 2. Taille de la chambre ~160m2. Environ 20 à 50 invités viennent par jour. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Figure complémentaire 5 : Gouttelettes d’huile de colza (50 μL) sur les surfaces filtrantes GF-2 utilisées lors des tests au restaurant. Les filtres recouverts d’un revêtement Viral Safe (VS) (1–5) étaient nettement moins répulsifs aux lipides que les filtres non recouverts (1, 6–7). Des photos ont été prises à l’œil d’un microscope de préparation avec un grossissement de 40 x 60 secondes après l’application d’une gouttette. « In » désigne le côté du filtre par lequel le flux d’air entre ; « out » désigne l’air qui sort du côté. Le revêtement VS-B est à l’extérieur. 1 fait référence à un ancien filtre usagé provenant d’un restaurant gastronomique ; 2 et 3 étaient des filtres revêtus de VS-B utilisés dans le restaurant gastronomique ; Les 4 et 5 étaient des filtres revêtus VS-B utilisés dans la cafétéria du personnel ; et les 6 et 7 étaient des filtres non recouverts utilisés dans la cafétéria du personnel. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 1 : informations sur le cycle qRT-PCR. Température du couvercle 105 °C, 45 cycles, acquisition de données en 62 °C. Adapté de Gregorova et al.43. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 2 : informations sur les amorces qRT-PCR. Adapté de Gregorova et al.43. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 3 : Description détaillée des matériaux de revêtement utilisés dans cette étude. Les compositions chimiques exactes des revêtements sont propriétaires du fabricant (Clean Touch Medical Ltd.). Les descriptions sont basées sur la classification fonctionnelle et les composants actifs connus (cuivre et/ou argent). Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 4 : Description détaillée des matériaux filtrants utilisés dans cette étude. Les compositions exactes des matériaux des préfiltres commerciaux ne sont pas entièrement divulguées par les fabricants ; les descriptions sont basées sur les matériaux typiques utilisés dans les systèmes de filtration CVC et sur les propriétés structurelles observées. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 5 : Statistiques de test : Analyse de Kruskal–Wallis de l’infectiosité virale à travers les revêtements antiviraux de surface. La variable de regroupement correspond au type de revêtement. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 6 : Différences statistiquement significatives d’infectivité virale entre les revêtements aux moments de 1 minute et 5 minutes selon les résultats post-hoc des tests multiples Games-Howell. La signification statistique est indiquée comme Oui dans les deux premiers panneaux du tableau, aux moments de 1 minute et 5 minutes. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 7 : Statistiques de test : analyse de Kruskal–Wallis de l’infectiosité virale à travers les types de filtres et de la condition sans filtre. La variable de regroupement est le type de filtre. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 8 : Résultats des comparaisons multiples testent l’infectiosité virale entre pré-filtres et la configuration sans filtre aux 30 min, 60 min, 90 min, 120 min, 150 min et 180 min selon le test post-hoc de comparaisons multiples de Games-Howell.Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 9 : Statistiques de test : résultats des tests de Kruskal–Wallis évaluant les différences dans le nombre de copies du virus entre les types pré-filtres, le filtre GF-2 et la configuration sans filtre. La variable de groupement est le type de filtre. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 10 : Résultats pour le test de comparaisons multiples du nombre de copies de virus entre les préfiltres, le filtre GF-2 et la configuration sans filtre à 30 min, 60 min, 90 min, 120 min, 150 min et 180 min selon le test post-hoc des comparaisons multiples Games-Howell.Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 11 : Statistiques de tests : résultats de Kruskal–Wallis comparant l’infectivité virale entre les filtres GF-2 non utilisés et les filtres utilisés dans les restaurants. La variable de groupement est le type de filtre. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 12 : Résultats du test de comparaison multiple de l’infectivité virale entre les pré-filtres et la configuration sans filtre selon le test post-hoc Games-Howell Multiple comparisons.Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau supplémentaire 13 : Résultats des tests de Kruskal–Wallis comparant le nombre de copies de virus entre les types pré-filtres, le filtre GF-2 et la configuration sans filtre. La variable de groupement est le type de filtre. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Tableau complémentaire 14 : Résultats du test de comparaison multiple du nombre de copies de virus entre les préfiltres, le filtre GF-2 et la configuration sans filtre selon le test post-hoc des comparaisons multiples Games-Howell.Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Fichier supplémentaire 1 : Données brutes de cette étude.Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.