Visualisation des micro-organismes du sol grâce aux lames de contact et à la microscopie

1. sol microcosme préparation

1. Recueillir le sol de jardin de la surface (0-6 "profondeur), et peser 150 g de sol dans deux tasses distinctes.
   1. Si le sol a haute densité de la matière organique, peser 100 g.
2. Une tasse de l’étiquette « traitement » et l’autre « contrôle. »
3. Calculer la quantité d’eau nécessaire pour modifier la teneur en humidité.
   1. Teneur en eau est souvent à proximité de la capacité au champ.
      
4. Quantité de mesure d’eau distillée avec une éprouvette graduée.
5. Versez la quantité d’eau distillée dans deux flacons.
6. Étiquette un flacon « Traitement » et l’autre « contrôle. »
7. Modifier l’eau dans le flacon de « Traitement » avec suffisamment de glucose pour une concentration de glucose sol finale de 1 %, selon une base de poids sec dans le sol de « Traitement ».
8. Ajouter 200 mg NH₄NO₃ dans le flacon de « Traitement » et remuez pour dissoudre les modifications. Le nitrate sert de source d’azote de nutriments pour les microbes du sol.
9. Modifier pas le flacon de « Contrôle ».
10. Dans de petites parties aliquotes d’environ 50 mg, mélanger le contenu de la fiole de « Traitement » dans la tasse de « Traitement ». Remuez avec une spatule après chaque addition aliquote.
11. Dans de petites parties aliquotes, mélanger le contenu de la fiole de « Contrôle » dans la tasse de « Contrôle ». Remuez avec une spatule après chaque addition aliquote.
12. Étiquette de quatre lames de microscope propre : deux « traitement » et deux lames de « Contrôler ».
13. Insérez les deux glissières de « Traitement » dans la coupe de sol « Traitement » et insérer les deux glissières de « Contrôle » dans la coupe de sol « Control ». Laisser 2 cm de chaque diapositive projetant au-dessus de la surface du sol et n’oubliez pas de laisser un espace entre les deux glissières.
14. Couvrir les coupes d’une pellicule plastique et le fixer avec un élastique.
15. Perforer l’enveloppe plusieurs fois pour permettre à l’air, mais toujours éviter une évaporation excessive.
16. Noter le poids de deux tasses.
17. Incuber les tasses remplies de sol à température ambiante dans une zone désignée/incubateur pendant 7 jours.

2. faire glisser la coloration et la microscopie

1. Noter le poids de deux tasses.
2. Calculer l’humidité du sol au moment de l’enlèvement de la diapositive.
3. Retirez les deux glissières de chaque tasse en appuyant sur chaque diapositive pour une position inclinée et en retirant donc la face supérieure de la lame n’est pas perturbée.
4. Identifier et marquer le côté de la diapositive à être colorés et observés.
5. Tapotez doucement les diapositives sur le dessus de banc pour éliminer les saletés importantes.
6. À l’aide d’un essuie-tout humide, nettoyer la face inférieure des diapositives. Sécher les lames à température ambiante.
7. Portant des lunettes de protection et tenant chaque diapositive avec une pince, plonger les lames dans 40 % (v/v) d’acide acétique pendant 1-3 min sous une hotte aspirante.
8. Nettoyez l’excès d’acide sous un léger courant d’eau.
9. À l’aide d’un compte-gouttes, couvrir la surface des lames avec phénoliques Rose Bengale. Soutenir la diapositive sur une coloration grille au-dessus d’un récipient pour attraper la tache d’excès. Attention, ne pas laver avec une force qui peut supprimer les micro-organismes de la surface des lames.
10. Tache les diapositives pour 5-10 min. ne laissez pas la diapositive devenir sec. Ajouter une tache plus que nécessaire.
11. Laver délicatement les lames pour enlever tache excédentaire.
12. Laissez que les lames sécher à température ambiante.
13. À l’aide de l’objectif à immersion d’huile, observer la diapositive à l’aide d’un microscope (Figure 1).

La figure 1. Une lame sous un microscope.