Chromatographie en phase gazeuse (CG) couplée à un détecteur à ionisation de flamme

Gas Chromatography (GC) with Flame-Ionization Detection

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Analytical Chemistry

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Gas Chromatography (GC) with Flame-Ionization Detection

3.2: Internal Standards

3.15: Cyclic Voltammetry (CV)

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09:22 min

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April 30, 2023

Overview

Source : Laboratoire du Dr B. Jill Venton – University of Virginia

Chromatographie en phase gazeuse (GC) sert à séparer et à détecter les composés de faible poids moléculaire en phase gazeuse. L’échantillon est un gaz ou un liquide qui est vaporisé dans l’orifice d’injection. En général, les composés analysés sont moins de 1 000 Da, car il est difficile vaporiser les composés plus gros. GC est populaire pour la surveillance de l’environnement et des applications industrielles, car il est très fiable et peut être exécuté presque continuellement. GC est généralement utilisée dans les applications où les petites molécules volatiles sont détectés et avec des solutions non aqueuses. Chromatographie en phase liquide est plus populaire pour les mesures dans des échantillons aqueux et peut être utilisé pour l’étude des molécules plus grosses, parce que les molécules n’ont pas besoin de se vaporiser. GC est favorisée pour les molécules non polaires tandis que LC est plus fréquente pour la séparation des analytes polaires.

La phase mobile pour chromatographie en phase gazeuse est un gaz porteur, généralement hélium en raison de son faible poids moléculaire et d’être chimiquement inerte. Une pression est appliquée et la phase mobile déplace de l’analyte dans la colonne. La séparation se fait en utilisant une colonne enduite avec une phase stationnaire. Colonnes capillaires tubulaires ouverts sont les colonnes plus populaires et la phase stationnaire, enduite sur les parois du capillaire. Phases stationnaires sont souvent dérivés de polydiméthylsiloxane, avec 5 à 10 % des groupes fonctionnalisés pour affiner la séparation. Typique des groupes fonctionnels sont des groupes phényle, cyanopropyl ou trifluoropropyl. Colonnes capillaires sont généralement de 5 à 50 m de long. Des colonnes plus étroites ont une résolution plus élevée, mais nécessitent des pressions plus élevées. Colonne remplie peut également être utilisé où la phase stationnaire est adsorbée sur perles emballés dans la colonne. Colonne remplie est plus courtes, 1 à 5 m. capillaires tubulaires ouverts sont généralement préférés car ils permettent une efficacité accrue, des analyses plus rapides et ont des capacités supérieures.

Détection d’ionisation de flamme (FID) est un bon détecteur général pour les composés organiques en GC qui détecte la quantité de carbone dans un échantillon. Après la colonne, les échantillons sont brûlés dans une flamme d’hydrogène-air chaud. Les ions de carbone sont produites par la combustion. Alors que l’efficacité globale du processus est faible (seulement 1 sur 10⁵ ions de carbone produisent un ion dans la flamme) le montant total des ions est directement proportionnel à la quantité de carbone dans l’échantillon. Électrodes sont utilisées pour mesurer le courant d’ions. FID est un détecteur destructrice, comme l’ensemble de l’échantillon est pyrolysé. FID n’est pas affectée par l’eau et de gaz non combustibles.

Principles

L’équilibre pour chromatographie en phase gazeuse est partitionnement et les composants de l’échantillon vont partitionner (c’est-à-dire distribuer) entre les deux phases : la phase stationnaire et la phase mobile. Les composés qui ont une plus grande affinité pour la phase stationnaire passent plus de temps dans la colonne éluer plus tard et ont un plus long temps de rétention (t_R) que les échantillons qui ont une affinité plus élevée pour la phase mobile. Affinité pour la phase stationnaire est tirée principalement par les interactions intermoléculaires et la polarité de la phase stationnaire peut être choisie pour maximiser les interactions et donc la séparation. Pics idéales sont des distributions gaussiennes et symétrique, en raison du caractère aléatoire des interactions analyte avec la colonne. Caractéristiques du peak asymétrique, comme la pointe donnant ou équeutage, peuvent être due à une surcharge de la colonne, problèmes d’injection ou la présence d’adsorption des groupes fonctionnels tels que les acides carboxyliques.

Dans GC, la température est réglée pour modifier l’équilibre et donc les temps d’élution. Séparations en GC sont basées sur la volatilité parce que des substances de point d’ébullition plus élevés peuvent se condenser sur une colonne si la température est basse, donc ils ne sont pas éluées ou prennent un certain temps pour éluer. Isothermes séparations sont effectuées à une température ou dégradées séparations sont effectuées lorsque la température est inclinée lors de la séparation. Rampes de température permettent les deux composés de point bas et haut-point d’ébullition à séparer la séparation même.

L’affichage produit par GC est un chromatogramme qui donne le signal au fil du temps. Pics sont observés pour chacun des composés dans l’échantillon. Pour chaque sommet, une hauteur et une surface de pic peuvent être calculées. Aire du pic est généralement utilisé pour faire des courbes d’étalonnage et de calculer les concentrations des échantillons à inconnues. Le nombre de plateaux théoriques (N) est calculé à partir de chaque pic pour donner une mesure de l’efficacité de la colonne. Une équation pratique pour mesure N est N = 16(t_R/W)² où_R est le temps de rétention de l’analyte et W est la largeur du bas de la crête. N est utilisé pour comparer les séparations sur des colonnes différentes.

Le détecteur à ionisation de flamme est masse sensible. Ainsi, la quantité de signal est proportionnelle à la masse de carbone dans l’échantillon, pas le nombre de moles. Composés avec plus de carbone donnent des signaux plus. La combustion du carbone produit des ions qui sont détectées comme un courant. FID est un des plus sensibles détecteurs générales pour GC avec une limite de détection de l’ordre du picogramme. La réponse est linéaires sur sept ordres de grandeur, ce qui lui donne une large gamme de linéaire.

Procedure

1. initialisation de la GC

Le gaz vecteur hélium et air et régler les manomètres sur l’instrument.
Allumez le four à colonne à une température élevée (typiquement 250 ° C ou plus) à cuire dans la colonne. Ne pas dépasser la température maximale de la colonne. Cela supprimera tous les contaminants. Laissez-le cuire pendant au moins 30 min avant d’exécuter un échantillon.

2. faire un fichier de méthodes

Dans le logiciel de contrôle de l’instrument, entrée toutes les valeurs souhaitées pour un fichier de méthodes. Tout d’abord, définir les paramètres de l’échantillonneur automatique. Définir le nombre de rinçages avant exécution, post-exécution rinçages et rince avec l’échantillon. Ces rinçages nettoyer la colonne entre les différents échantillons.
La quantité injectée est généralement de 1 µL. Un coefficient de fractionnement est généralement définie car injecter tout d’un échantillon peut surcharger la colonne. Si le coefficient de fractionnement est 100 : 1, cela signifie que pour chaque 1 partie qui est injecté dans l’instrument 100 parties va perdre.
Les phase mobile des paramètres d’entrée. Le débit est contrôlé par le jeu de pression. Des débits plus rapides conduisent à des séparations plus rapides, mais il y a moins de temps pour l’analyte et interagir avec la colonne.
Entrer dans la programmation de température. Pour une course isotherme, réglez la température de la séparation et puis une fois pour la séparation. Pour une gradient d’élution, entrez la température de départ et indisponibilité, la température de finale et temps et la vitesse de la rampe en ° C/min. Un temps d’équilibrage est également défini qui permet à la colonne de cool dos vers le bas la température originale entre les exécutions.
Entrez les paramètres du détecteur. Un taux d’échantillonnage et de la température détecteur sera inscrite. Le détecteur doit toujours être une température plus élevée que la température de la colonne afin qu’aucun analyte se condense sur le détecteur.
Enregistrez le fichier de méthodes. Les paramètres peuvent doivent également être téléchargé alors qu’ils sont lus par le GC.

3. collecte de données de GC

Allumez le gaz d’hydrogène et veillez à ce que le manomètre est correctement défini. Allumer la flamme de l’analyseur FID.
Sur la grille de l’échantillonneur automatique, remplir le flacon de lavage avec le solvant de lavage, comme l’acétonitrile ou méthanol. Assurez-vous que le flacon de déchets est vide.
Préparation des échantillons. Si il n’y a aucune chance de particules présentes dans l’échantillon, filtrer l’échantillon. Parce que les résidus de plastique peuvent parfois être vu avec GC, utilisation seul verre seringues et flacons pour préparer votre échantillon de verre.
Remplir le flacon au moins la moitié d’échantillon ainsi la seringue de l’échantillonneur automatique est assurée pour ramasser de l’échantillon. Flacons pour échantillonneur automatique sont généralement 2 mL, mais si le volume de l’échantillon est limité, flacon plaquettes sont disponibles pour réduire le volume de l’échantillon nécessaire.
Chargez l’exemple vial(s) dans le rack pour échantillonneur automatique. Garder une trace de quelle position chaque échantillon est dans.
Avant la course, zéro à la référence de l’enregistreur sur le logiciel de l’ordinateur.
Les fichiers peuvent être collectées comme un même essai ou utiliser une table de lots pour essais multiples. Veillez à spécifier le nombre correct de flacon pour l’échantillon. Cliquez sur le bouton « Démarrer » et en faire un fichier.
Sont généralement analysé les données avec un logiciel. Les paramètres qui peuvent être mesurées incluent temps de rétention, hauteur de pic, surface de pic et nombre de plateaux théoriques.

4. résultats : GC analyse des échantillons de café

Dans cet exemple, analyse de GC-FID a été réalisée pour la caféine et l’acide palmitique, deux composés présents dans le café. La caféine est moins polaire que l’acide palmitique, qui a une queue d’alcane à chaîne longue. Ainsi, la caféine est moins conservée et élue tout d’abord sur la colonne non polaire de 95 % diméthylpolysiloxane et 5 % phényl-ARYLÈNE (Figure 1).
Partir du chromatogramme, on peuvent calculer la surface des pics. La surface des pics sont proportionnelles à la masse de carbone qui passe par le détecteur et ils peuvent être utilisés pour faire une courbe d’étalonnage de concentration de vs réponse instrument. Pour la Figure 1, la surface du pic est 27 315 pour la caféine et 18 852 pour l’acide palmitique.
Une mesure de l’efficacité de la colonne est N, le nombre de plateaux théoriques. N peut être calculé à partir du chromatogramme pour chaque pic. Pour la Figure 1, N est de 283 000 pour la caféine et 261 000 pour l’acide palmitique.
Figure 2 illustre l’effet de la température sur les séparations isothermes. Deux séparations sont recouvertes du même échantillon caféine et l’acide palmitique. Le premier est à 180 ° C et le second à 200 ° C. Les temps de rétention sont beaucoup plus petites pour l’exécuter une température plus élevée.

Figure 1. L’analyse des échantillons de la caféine et l’acide palmitique GC-FID. La caféine 5 mM standard élue tout d’abord, suivie de l’échantillon de l’acide palmitique 1 mM. La rampe de température était de 0,1 min à 150 ° C, suivie d’une rampe à 10 ° C/min à 220 ° C où la température est gardée pendant 5 min.

Figure 2. Analyse de GC-FID de courses isothermes d’un échantillon de café de torréfaction foncée. Une comparaison des GC-FID tourne à 180 ° C et 200 ° C pour un échantillon de café de torréfaction foncée. Les pics éluer beaucoup plus rapidement à une température de 200 ° C.

Chromatographie en phase gazeuse ou GC, est une technique qui sert à séparer, détecter et quantifier les petits composés volatils en phase gazeuse.

GC, échantillons liquides sont vaporisés, puis transportés par un gaz inerte dans une colonne de long et mince. Analytes sont séparés selon leur affinité chimique avec un revêtement à l’intérieur de la colonne.

Parce que GC exige que les analytes sont vaporisés à la phase gazeuse, l’instrument est parfaitement adapté pour des produits chimiques volatils, non polaires inférieurs à 1 000 daltons en masse. Pour des molécules plus grandes, aqueux ou polaires qui sont difficiles à vaporiser, chromatographie en phase liquide est une alternative intéressante. Cette vidéo va introduire les bases de la chromatographie en phase gazeuse et illustrer les étapes nécessaires pour analyser les espèces chimiques dans un échantillon de mélange non aqueux à l’aide d’un chromatographe en phase gazeuse.

L’instrument GC comprend cinq composantes essentielles. Tout d’abord, un orifice d’injection est utilisé pour introduire l’échantillon dans l’instrument. Ensuite, une chambre de chauffe vaporise l’échantillon et mélange avec un gaz inerte. Le gaz inerte, comme l’hélium ou l’azote, transporte l’échantillon vaporisé par le système. Combinés, le gaz vecteur et l’échantillon représentent la phase mobile. Ensuite, la phase mobile pénètre dans la colonne chauffée, séparant l’analyser comme elles passent. Enfin, un détecteur enregistre les gaz comme ils sortir de la colonne, ou éluent et envoie des données vers un ordinateur pour analyse. L’élément le plus critique de l’instrument est la colonne. La colonne est un capillaire avec une matrice de phase stationnaire, revêtement des murs intérieurs. Alternativement, les colonnes peuvent être emballés avec matrice recouvertes de perles. La phase stationnaire est généralement mis à jour le polydiméthylsiloxane, ce qui est idéal pour résoudre les molécules non polaires. Ses propriétés de séparation sont raffinées en ajoutant des groupes phényle, cyanopropyl ou trifluoropropyl de 5 à 10 %.

Analyser avec faible affinité chimique pour la phase stationnaire se déplacer rapidement à travers la colonne, tandis que les molécules avec une haute affinité sont ralentis comme ils s’adsorber sur les parois de la colonne. La durée de qu’un composé passe à l’intérieur de la colonne s’appelle son temps de rétention, ou R_tet permet d’identifier les composés. Le détecteur se trouve à la fin des gaz colonne et enregistrements car ils éluer. Détection à ionisation de flamme, ou FID, est largement utilisé car il détecte les ions de carbone, ce qui lui permet de détecter n’importe quel composé organique. En FID, brûler des analytes dans un hydrogène-air flamme leur sortie de la colonne, produisant des ions de carbone qui induisent un courant dans les électrodes voisines. Le courant est directement proportionnelle à la masse de carbone, par conséquent, la concentration du composé peut être déterminé. Le résultat final est un chromatogramme, qui est une parcelle de temps de vs signal FID, montrant chaque composant éluée leur sortie de la colonne. Idéalement, chaque pic auront une forme symétrique, gaussienne. Caractéristiques asymétriques, telles que les résidus de pic et pic en face, peuvent être due à une surcharge, problèmes d’injection ou la présence de groupements fonctionnels qui collent à la colonne, tels que les acides carboxyliques.

Maintenant que les principes de chromatographie en phase gazeuse ont été discutées, nous allons jeter un coup d’oeil à la façon de réaliser et d’analyser une analyse chromatographie en phase gazeuse dans le laboratoire.

Avant d’exécuter une expérience, allumez le réservoir de gaz d’hélium. Ouvrir le logiciel sur l’ordinateur, puis cuire sur la colonne pour éliminer tous les contaminants potentiels. Régler le four à haute température, typiquement 250 ° C ou au-dessus et cuire la colonne pendant au moins 30 min.

Ensuite, réglez les paramètres de l’échantillonneur automatique. Définir le nombre de rinçages avant et après exécution de nettoyer la colonne entre les échantillons.

Utiliser un volume d’échantillon de 1 μL et régler la ratio de split pour programmer l’instrument de n’accepter qu’une fraction de l’entrée. Régler le débit du gaz vecteur et utiliser les paramètres établis ou tâtonnement pour trouver la pression idéale.

Maintenant, entrez les paramètres de température pour l’expérience. Pour une course isotherme, entrez la température et le temps de la séparation. Alternativement, pour un gradient de température, entrez la température de départ et tenir le temps, la température de finale et tenir le temps et la vitesse de la rampe en ° C / min.

Réglez l’heure pour la colonne refroidir entre pistes pour un dégradé ou isotherme exécuter.

Enfin, définissez la fréquence d’échantillonnage et la température du détecteur. Le détecteur doit toujours être plus chaud que la colonne pour éviter la condensation. Après que tous les paramètres sont programmés, enregistrez le fichier de méthodes.

Activer le détecteur en ouvrant le robinet du réservoir d’hydrogène et allumer la flamme de l’analyseur FID. L’instrument est prêt pour l’analyse de l’échantillon.

Pour exécuter l’exemple sur la GC, tout d’abord remplir un flacon avec un solvant de lavage, comme l’acétonitrile ou méthanol. Préparation des échantillons, en étant certain d’utiliser le verre seringues et flacons en verre sous forme de résidus de plastique peuvent contaminer la GC.

Maintenant ajoutez l’échantillon dans un flacon avec une pipette. Remplissez au moins à mi-chemin, de sorte que la seringue de l’échantillonneur automatique sera entièrement immergée. Ensuite, chargez les flacons de lavage et l’échantillon dans le rack pour échantillonneur automatique. Avant d’exécuter l’exemple, zéro le le chromatogramme sur le logiciel de l’ordinateur de référence. Données peuvent être recueillies comme un même essai ou utiliser une table de lots pour essais multiples. Appuyez sur « start » pour exécuter l’exemple.

Dans cet exemple, les niveaux de caféine et l’acide palmitique dans le café ont été analysés avec GC FID. La caféine est plus petit et moins polaire, donc il est moins attirés par la colonne et élue première. L’acide palmitique, qui a une queue de chaîne longue alcane, élue plus tard en raison d’une plus grande affinité avec la phase stationnaire.

Dimensions max. étant proportionnelles à la masse de carbone, la concentration de chaque composant peut être déterminée à partir de sa surface de pic respectifs sur le chromatographe et par rapport aux normes de concentration connue.

L’effet de la température de la colonne a été également exploré. À 200 ° C, les échantillons ont traversé la colonne deux fois plus vite que l’échantillon de tourner à 180 °C. Notez que tandis que les hauteurs des pics de changer, l’aire sous la courbe reste constant.

GC est une technique importante pour l’analyse chimique et est largement utilisé dans les applications scientifiques, commerciales et industrielles.

En raison de la simplicité du GC, les chimistes il utilisent couramment pour surveiller les réactions chimiques et la pureté des produits. Les réactions peuvent être dégustées au fil du temps pour montrer la formation des produits et l’appauvrissement des réactifs. Le chromatographe révèle des concentrations du produit et également la présence d’imprévus ou produits secondaires.

GC est couramment utilisé en tandem avec la spectrométrie de masse, appelée GS-MS, d’identifier sans ambiguïté les substances chimiques dans les échantillons ou air. Spectrométrie de masse, ou MS, sépare les molécules basées sur leur masse pour charger le rapport et permet la détermination des identités composées. GC-MS est un outil puissant, comme le GC sépare tout d’abord des mélanges complexes en composants individuels, et MS donne des informations précises de massives et de la dénomination chimique.

GC est utilisée couramment dans la surveillance pour détecter les composés organiques volatils, ou COV, qui peut-être découler de la pollution de l’environnement, pesticides et explosifs de l’air. GC peut servir à repérer et identifier les COV tant à l’intérieur pour l’analyse et à l’extérieur, pour la santé et la sécurité.

Vous avez juste regardé introduction de JoVE pour chromatographie en phase gazeuse avec FID. Vous devez maintenant comprendre les principes fondamentaux de la chromatographie en phase gazeuse et détection de la FID.

Merci de regarder !

Applications and Summary

GC est utilisé pour une variété d’applications industrielles. Par exemple, il est utilisé pour tester la pureté d’un produit chimique de synthèse. GC est également populaire dans des applications environnementales. GC est utilisé pour détecter les pesticides, les hydrocarbures aromatiques polycycliques et des phtalates. Plupart des applications de qualité air utilisent GC-FID pour surveiller les polluants de l’environnement. GC est également utilisé pour l’analyse, où les volatiles qui sont évaporation d’un liquide sont collectés et mesurées. Ceci est utile pour les industries cosmétiques et des aliments et des boissons. GC est utilisé pour les applications médico-légales ainsi, telles que la détection de drogues d’abus ou d’explosifs. En outre, le GC est utile dans l’industrie pétrolière pour la mesure des hydrocarbures. Les applications étendues rend GC 1 milliard de dollars par le marché mondial de l’année.

La figure 3 montre un exemple de comment GC puisse être utilisé dans l’industrie alimentaire. La figure 3 montre un chromatographe de vanille artificielle (noir) et la vraie vanille (rouge). GC peut être utilisé pour identifier l’échantillon réel, qui contient un gros pic de vanilline, mais ne contient-elle pas un second pic pour éthylvanilline.

Figure 3. Chromatogramme de la GC-FID des échantillons vanille. Imitation et vraie vanille montrent des pointes grands à 4,7 min en raison de la vanilline, le composant de principe de la vanille. Toutefois, l’imitation vanille a aussi un pic important à 5,3 min, qui est due à l’éthylvanilline, un composé non présents en grandes quantités dans la vraie vanille.

Transcript

Gas Chromatography, or GC, is a technique that is used to separate, detect, and quantify small volatile compounds in the gas phase.

In GC, liquid samples are vaporized, then carried by an inert gas through a long, thin column. Analytes are separated based on their chemical affinity with a coating on the inside of the column.

Because GC requires that analytes are vaporized to the gas phase, the instrument is ideally suited for volatile, nonpolar chemicals less than 1,000 daltons in mass. For larger, aqueous, or polar molecules that are difficult to vaporize, liquid chromatography is a useful alternative. This video will introduce the basics of gas chromatography, and illustrate the steps required to analyze the chemical species in a non-aqueous mixture sample using a gas chromatograph.

The GC instrument has five essential components. First, an injection port is used to introduce the sample into the instrument. Next, a heating chamber vaporizes the sample and mixes it with an inert gas. The inert gas, such as helium or nitrogen, carries the vaporized sample through the system. Combined, the carrier gas and sample make up the mobile phase. Next, the mobile phase enters the heated column, separating the analytes as they flow through. Lastly, a detector records the gases as they exit the column, or elute, and sends data to a computer for analysis. The most critical component of the instrument is the column. The column is a capillary with a stationary phase matrix coating the inner walls. Alternatively, columns can be packed with matrix-coated beads. The stationary phase is usually modified polydimethylsiloxane, which is ideal for resolving nonpolar molecules. Its separation properties are refined by adding 5–10% phenyl, cyanopropyl, or trifluoropropyl groups.

Analytes with low chemical affinity for the stationary phase move quickly through the column, while molecules with high affinity are slowed as they adsorb to the column walls.The length of time a compound spends inside the column is called its retention time, or Rt, and allows compounds to be identified. The detector sits at the end of the column and records gases as they elute. Flame-ionization detection, or FID, is widely used because it senses carbon ions, allowing it to detect virtually any organic compound. In FID, analytes combust in a hydrogen-air flame as they exit the column, producing carbon ions that induce a current in nearby electrodes. The current is directly proportional to the carbon mass, thus, the concentration of the compound can be determined. The final result is a chromatogram, which is a plot of FID signal vs time, showing each eluted component as they exit the column. Ideally, each peak will have a symmetrical, Gaussian shape. Asymmetrical features, such as peak tailing and peak fronting, can be due to overloading, injection problems, or the presence of functional groups that stick to the column, such as carboxylic acids.

Now that the principles of gas chromatography have been discussed, let’s take a look at how to carry out and analyze a gas chromatography analysis in the laboratory.

Before running an experiment, turn on the helium gas tank. Open the software on the computer, then bake out the column to remove any potential contaminants. Set the oven to a high temperature, typically 250 °C or above, and bake the column for at least 30 min.

Next, adjust the autosampler settings. Set the number of pre- and post-run rinses to clean the column between samples.

Use a sample volume of 1 μL and set the split ratio setting to program the instrument to accept only a fraction of the input. Adjust the flow rate of the carrier gas, and use established settings or trial and error to find the ideal pressure.

Now enter the temperature settings for the experiment. For an isothermal run, enter the temperature and the time for the separation. Alternatively, for a temperature gradient, enter the starting temperature and hold time, the ending temperature and hold time, and the ramp speed in °C per min.

Set the time for the column to cool between runs for either a gradient or isothermal run.

Finally, set the sampling rate and the detector temperature. The detector must always be hotter than the column to prevent condensation. After all the settings are programmed, save the methods file.

Activate the detector by opening the hydrogen tank valve and ignite the flame of the FID. The instrument is now ready for sample analysis.

To run the sample on the GC, first fill a vial with a wash solvent, such as acetonitrile or methanol. Prepare the sample, being certain to use glass syringes and glass vials as plastic residues can contaminate the GC.

Now add the prepared sample to a vial with a pipette. Fill at least half way, so that the autosampler syringe will be fully submerged. Then, load the wash and sample vials into the autosampler rack. Before running the sample, zero the baseline of the chromatogram on the computer software. Data can be collected either as a single run or using a batch table for multiple runs. Press “start” to run the sample.

In this example, caffeine and palmitic acid levels in coffee were analyzed using GC with FID. Caffeine is smaller and less polar, so it is less attracted to the column, and elutes first. Palmitic acid, which has a long alkane chain tail, elutes later due to a higher affinity with the stationary phase.

Because peak dimensions are proportional to carbon mass, the concentration of each component can be determined from its respective peak area on the chromatograph and compared to standards of known concentration.

The effect of column temperature was also explored. At 200 °C, samples moved through the column twice as fast as the sample run at 180 °C. Note that while peak heights change, the area under the curve remains constant.

GC is an important technique for chemical analysis, and is widely used in scientific, commercial, and industrial applications.

Due to the simplicity of GC, chemists routinely use it to monitor chemical reactions and product purity. Reactions can be sampled over time to show product formation and reactant depletion. The chromatograph reveals product concentrations and also the presence of unintended or side products.

GC is commonly used in tandem with mass spectrometry, called GS-MS, to unambiguously identify chemicals in samples or air. Mass spectrometry, or MS, separates molecules based on their mass to charge ratio, and enables the determination of compound identities. GC-MS is a powerful tool, as GC first separates complex mixtures into individual components, and MS gives precise mass information and chemical identity.

GC is routinely used in air monitoring to detect volatile organic compounds, or VOCs, which may arise from environmental pollution, pesticides and explosives. GC can be used to track and identify VOCs both indoors for headspace analysis and outdoors, for health, safety, and security.

You’ve just watched JoVE’s introduction to gas chromatography with FID. You should now understand the basic principles of gas chromatography and FID detection.

Thanks for watching!