Imagerie d'échantillons biologiques par microscopie optique et confocale

1. Imagerie confocale

1. Chargez l'échantillon sur la scène. Centrez-le sous l'objectif. Il ne doit pas dépasser la limitation de poids de l'étape, qui dans ce cas est de 5 kg. L'échantillon ne doit pas avoir plus de 100 mm d'épaisseur.
2. Ouvrez le logiciel d'imagerie et sélectionnez « Créer de l'emploi ».
3. Sous la colonne Topographies, choisissez le bouton assistant.
4. Créez une image d'aperçu au grossissement le plus bas, 2.5X. Avant de changer les grossissements, assurez-vous que l'échantillon est au point en changeant la position Z jusqu'à ce que vous voyez une image claire. Cela peut être fait en poussant vers le bas ou en tirant vers le haut sur le manipulateur de microscope 3D. Le mouvement Z plus fin est atteint en engageant le bouton sur le côté, ce qui provoque une lumière bleue sur les bords.
5. Augmentez lentement le grossissement de la lentille, en continuant à jouer avec l'intensité lumineuse et la mise au point jusqu'à ce que vous soyez au grossissement désiré. Si vous le souhaitez, choisissez un autre domaine d'intérêt en déplaçant la scène dans les directions x et y en utilisant le manipulateur.
6. Une fois qu'une image d'aperçu est prise au grossissement bas, appuyez sur le bouton suivant pour passer à l'étape du point de référence. Si vous le souhaitez, spécifiez un certain point de référence pour des raisons de mesure (c.-à-d. le coin de l'échantillon), bien qu'à cette fin le point de référence par défaut soit très bien.
7. Appuyez sur la flèche suivante pour passer à la partie suivante de l'assistant.
8. Modifier l'objectif souhaité pour voir une résolution appropriée à votre échantillon. Dans ce cas, la lentille objective 50X est utilisée pour visualiser les cellules de l'échantillon. Le 50X est l'objectif qui est le plus proche de l'échantillon, donc progressivement passer à l'objectif 50X en veillant à ce qu'il ya encore de la place pour diminuer la distance de travail après l'objectif 20X.
9. Sur la page "Measuring Range Definition", déplacez légèrement la position Z (en cliquant sur le bouton latéral sur le manipulateur pour des réglages fins) de sorte que seul le haut de l'échantillon est au point et cliquez sur "Set Last". Déplacez ensuite la scène dans la direction Z (vers le bas) jusqu'à ce que seul le bas de l'échantillon soit mis au point et appuyez sur "Set First". Assurez-vous que le nombre de tranches calculées ne dépasse pas 1000 ou que le programme échouera.
10. Assurez-vous que l'intensité de la lumière ne sursatrate pas (cause pixels rouges) dans l'image à l'un des niveaux, puis a frappé fait. Cela prendra l'image de tomographie et d'ouvrir le logiciel de tomographie.
11. Dans le logiciel de tomographie, ouvrez des onglets tels que l'onglet Études pour afficher les données en 3D et prendre des mesures dans l'espace 2D ou 3D.

2. Imagerie au microscope optique numérique

1. Chargez l'échantillon sur la scène. Centrez l'échantillon sous la lentille. Le poids de l'échantillon ne doit pas dépasser la limitation de poids de l'étape, qui dans ce cas est de 4 kg. L'échantillon ne doit pas dépasser 12 cm.
2. Ouvrez le logiciel d'imagerie.
3. Sélectionnez un Job à partir de la liste des modèles fournis. Il est également possible de travailler en dehors d'un emploi en appuyant sur l'examen gratuit, ce qui vous permet d'étudier un échantillon en dehors d'un emploi.
4. Acquérir une image de vue d'ensemble qui montre toute la scène. Cela servira de carte plus tard pour afficher la partie de l'échantillon qui est consultée. Lors de l'acquisition de l'image, utilisez le contrôleur pour changer la mise au point et la position de l'image.
5. Placez un système de coordonnées. Le système de coordonnées par défaut est à partir du coin arrière gauche de la scène et est très bien pour cette application. Si l'échantillon est tordu, vous pouvez ajuster les coordonnées ici.
6. Nommez l'échantillon et l'emploi, ce qui l'ajoute à la liste des emplois afin que d'autres utilisateurs puissent y retourner.
7. Sélectionnez le bouton de l'appareil photo sous Acquérir. Prenez une image initiale, puis appuyez sur le bouton en direct lorsque vous naviguez dans l'échantillon.
8. Déplacez la mise au point vers le bas jusqu'à ce que l'échantillon soit clairement au point. Il peut également être nécessaire d'ajuster l'éclairage sous l'onglet Éclairage et ouverture.
9. Optimisez l'image avec les outils sous le panneau d'optimisation d'image. Vous pouvez jouer avec différents paramètres sous l'onglet Améliorations d'image, tels que l'inclinaison de l'objectif, les niveaux d'éclairage sur l'échantillon, et la luminosité et le contraste, jusqu'à ce que l'image ait la netteté désirée.
10. Effectuez des mesures en appuyant sur l'outil Crayon sur le logiciel. De là, vous avez accès à plusieurs outils de mesure, y compris les distances, les angles et la zone. Utilisez la distance et les outils de zone pour mesurer la taille de l'échantillon.
11. Passez à l'onglet Résultats de flux de travail et vérifiez la disposition du flux de travail pour configurer la mise en page du rapport
12. Appuyez sur le bouton enregistrer pour enregistrer votre travail afin que d'autres puissent utiliser le même flux de travail.