Name: Enregistrement électrophysiologique dans le Drosophile Embryon (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-21T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 31 s
Description: Apprenez l'enregistrement électrophysiologique dans l'embryon de Drosophila pour étudier les propriétés électriques des muscles et neurones en développement. Cette méthode permet de caractériser la synaptogenèse fonctionnelle.

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Les auteurs n'ont rien à divulguer.

L&#39;enregistrement à partir d&#39;embryons de drosophile électrophysiologique nécessite une manipulation manuelle et de dissection. La santé de la préparation, et la qualité conséquente des enregistrements, dépend d&#39;un seul être capable de préparer rapidement et proprement les tissus fragiles embryonnaires à des fins d&#39;enregistrement, et ensuite exécuter l&#39;expérience. Les expérimentateurs doivent être compétents dans les deux dissections embryonnaire et l&#39;électrophysiologie patch clamp avant d...

enregistrement électrophysiologique dans le drosophile embryon

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Drosophile est un modèle de premier génétique pour l&#39;étude du développement embryonnaire et à la fois fonctionnelles en neurosciences. Traditionnellement, ces champs sont assez isolées les unes des autres, avec des histoires largement indépendantes et les communautés scientifiques. Cependant, l&#39;interface entre ces domaines généralement disparates sont les programmes de développement qui sous-tendent l&#39;acquisition de propriétés fonctionnelles électriques de signalisation et de la différenciation des synapses chimiques fonctionnels pendant les phases finales de la formation des circuits neuronaux. Cette interface est une zone cruciale pour l&#39;enquête. Chez la drosophile, ces phases de développement fonctionnel se produisent pendant une période de &lt;8 heures (à 25 ° C) pendant le dernier tiers de l&#39;embryogenèse. Cette période tardive de développement a été longtemps considérés comme insurmontables à cause enquête pour le dépôt d&#39;un dur, la cuticule épidermique imperméable. Une percée a été l&#39;avance de l&#39;application de l&#39;eau-de polymérisation de la colle chirurgicale qui peut être appliqué localement à la cuticule pour permettre une dissection contrôlée des embryons à un stade avancé. Avec une incision dorsale longitudinale, l&#39;embryon peut être posé à plat, ce qui expose la corde nerveuse ventrale et la musculature paroi du corps d&#39;une enquête expérimentale. Whole-cell patch-clamp techniques peuvent alors être employées pour enregistrer à partir de neurones individuellement identifiables et les muscles somatiques. Ces configurations d&#39;enregistrement ont été utilisées pour suivre l&#39;apparition et la maturation des courants ioniques et la propagation du potentiel d&#39;action dans les deux neurones et les muscles. Mutants génétiques affectant ces propriétés électriques ont été caractérisées pour révéler la composition moléculaire des canaux ioniques et complexes de signalisation associés, et pour commencer l&#39;exploration des mécanismes moléculaires de la différenciation fonctionnelle. Un accent particulier a été le montage de connexions synaptiques, à la fois dans le système nerveux central et la périphérie. Le glutamatergique jonction neuromusculaire (JNM) est plus accessible à une combinaison de l&#39;imagerie optique et l&#39;enregistrement électrophysiologiques. Une électrode d&#39;aspiration de verre est utilisé pour stimuler le nerf périphérique, avec excitateur de jonction actuelle (EJC) des enregistrements réalisés dans la tension musculaire serré. Cette configuration de l&#39;enregistrement a été utilisé pour tracer la différenciation fonctionnelle de la synapse, et de suivre l&#39;apparition et la maturation des présynaptique propriétés de libération du glutamate. En outre, les propriétés postsynaptique peut être dosée de façon indépendante par l&#39;intermédiaire d&#39;iontophorèse ou l&#39;application de pression de glutamate directement à la surface du muscle, de mesurer l&#39;apparition et la maturation des champs récepteurs du glutamate. Ainsi, les deux éléments de pré-et post-synaptiques peuvent être suivis séparément ou en combinaison au cours synaptogenèse embryonnaire. Ce système a été largement utilisé pour isoler et caractériser des mutants génétiques qui altèrent la formation des synapses embryonnaire, et révéler ainsi les mécanismes moléculaires qui régissent la spécification et la différenciation des connexions synaptiques fonctionnelles synapse et propriétés de signalisation.

Enregistrements électrophysiologiques de<em&gt; Drosophile</em&gt; Embryons permettent des analyses des muscles en développement et les propriétés électriques des neurones, ainsi que la caractérisation fonctionnelle de la synaptogenèse à la jonction neuromusculaire et glutamatergique cholinergiques centraux et les synapses GABAergiques.

Enregistrement électrophysiologique dans le Drosophile Embryon

Drosophila est un modèle génétique de premier plan pour l'étude du développement embryonnaire et des neurosciences fonctionnelles. Traditionnellement, ces domaines sont assez...

Des enregistrements électrophysiologiques provenant des muscles et des motoneurones peuvent être obtenus à partir de la paroi corporelle d’un embryon oph correctement préparé. Les muscles 6, 7, 12 ou 13 peuvent facilement être enregistrés en configuration d’enregistrement en tout-ouvert, et des courants de faible amplitude robustes peuvent être mesurés après obtention d’un scellement de gigaohm pour l’enregistrement à la jonction neuromusculaire. Une électrode à aspiration peut être utilisée pour aspirer un nerf moteur près du point de sortie du SNC et délivrer une stimulation présynaptique, tandis que les courants en tout-ouvert sont mesurés dans le muscle postsynaptique.Alternativement, une pipette peut être utilisée pour délivrer des neurotransmetteurs excitateurs près de l'électrode d'enregistrement par iontophorèse ou éjection sous pression. Bonjour, je suis Ton du laboratoire de Dave au Département des sciences biologiques de l'Université de l'Illinois à Chicago. Aujourd'hui, je vais vous montrer comment enregistrer électrophysiologiquement la jonction neuro-musculaire au stade embryonnaire et les neurones centraux.Ces procédures que nous utilisons permettent d'étudier la fon

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Cette vidéo montre la procédure pour isoler cerveaux entiers de l'adulte de drosophile en préparation pour l'enregistrement à partir de neurones unique en utilisant la technologie standard de cellules entières. Il comporte des images de cellules GFP étiqueté et les neurones considérés lors de l'enregistrement.

Enregistrements à partir de cellules entières du cerveau d&#39;adulte drosophile

Nous décrivons ici les méthodes électrophysiologiques pour mesurer la transmission synaptique à la jonction neuromusculaire de larve de drosophile. Libération évoquée est initiée artificiellement par la stimulation des axones des neurones moteurs et la transmission à travers la JNM peut être mesurée par la réponse postsynaptique évoquée dans le muscle.

Méthodes électrophysiologiques pour l&#39;enregistrement du potentiel synaptique de la JNM des larves de drosophile

Cette technique expose les neuromusculaire Drosophila embryonnaire pour l'immunohistochimie ou l'enregistrement électrophysiologiques. Il est utile pour étudier les événements précoces de développement neuromusculaire ou d'effectuer l'électrophysiologie dans des mutants qui ne peuvent pas éclore.

La récolte et la préparation Drosophile Les embryons destinés à l&#39;enregistrement électrophysiologique et autres procédures

Nous présentons différentes manières de surveiller la fonction cardiaque chez la larve...

Surveillance de la fonction cardiaque chez les larves Drosophila melanogaster Pour les études physiologiques

Le système de fibre Giant est un simple circuit neuronal de...

Enregistrements électrophysiologiques de la voie des fibres Géant de D. melanogaster</em

Cette vidéo décrit le protocole d’enregistrement électrophysiologique de l’activité des photorécepteurs dans l’œil d’une drosophile immobilisée, permettant une mesure précise des changements de tension en réponse à des stimuli lumineux.

Enregistrement électrophysiologique des réponses en tension des photorécepteurs rétiniens de la drosophile à des stimuli lumineux

La vidéo démontre l’enregistrement extracellulaire de l’activité neuronale du système nerveux central (SNC) de larves de drosophile. Le SNC transecté est positionné dans une chambre d’enregistrement, et l’activité électrique d’un nerf descendant est enregistrée pour établir la fréquence de décharge de base. Un agent d'essai est ensuite introduit et la variation de la fréquence de décharge est enregistrée pour déterminer l'effet excitateur ou inhibiteur de l'agent.

Enregistrement extracellulaire de l’activité électrique dans le système nerveux central de la drosophile

Ce protocole décrit l'enregistrement extracellulaire des réponses potentielles d'action tirés par les neurones gustatifs labellar chez la drosophile.

Enregistrement électrophysiologique De<em&gt; Drosophila</em&gt; Labellar Goût Sensilles

Des microélectrodes tranchantes permettent une caractérisation électrophysiologique précise des photorécepteurs et de la sortie d’interneurones visuels chez la drosophile vivante. Nous montrons ici comment utiliser cette méthode pour enregistrer les réponses en tension de haute qualité de cellules individuelles à une stimulation lumineuse contrôlée. Cette méthode est idéale pour étudier le traitement de l’information neuronale dans les yeux composés d’insectes.

Méthode électrophysiologique de réponses d&#39;enregistrement intracellulaire tension de<em&gt; Drosophila</em&gt; Photorécepteurs et Interneurones à Light Stimuli<em&gt; In Vivo</em

Les enregistrements de cellules entières des photorécepteurs de Drosophila melanogaster permettent de mesurer des bosses sombres spontanées, des bosses quantiques, des réponses macroscopiques à la lumière et des relations courant-tension dans diverses conditions. En combinaison avec des outils de manipulation génétique de D. melanogaster, cette méthode permet d’étudier la voie de signalisation inositol-lipidique ubiquitaire et sa cible, le canal TRP.

Méthode électrophysiologique pour les enregistrements de la pince à tension intégrale à partir de<em&gt; Drosophila</em&gt; Photorécepteurs

Ce protocole décrit une méthode pour enregistrer l’activité électrique descendante du système nerveux central Drosophila melanogaster pour permettre le rapport coût-efficacité et pratique essais d’agents pharmacologiques, les mutations génétiques des protéines neuronales, et/ou le rôle des voies physiologiques inexplorées.

Enregistrement électrophysiologique de l’activité du système nerveux Central du troisième stade de Drosophila Melanogaster

Apprenez l'enregistrement électrophysiologique dans l'embryon de Drosophila pour étudier les propriétés électriques des muscles et neurones en développement. Cette méthode permet de caractériser la synaptogenèse fonctionnelle.

Enregistrement électrophysiologique dans le Drosophile Embryon

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