Les études génétiques des protéines humaines réparation de l'ADN utilisant de la levure comme système modèle

Les plasmides WRN sont digérés avec la restriction endonucléase une et MLU une et les fragments sont purifiés à partir d’un gel. Ces vecteurs d’expression digérés avec les fragments de la cellule un à MLU un WN sont ensuite ligaturés dans les sites de la cellule un à MLU un du vecteur de levure. Le plasmide multicopie contient également un marqueur sélectionnable TRP.

Les constructions W Rrn sont transformées en levure selon des protocoles standard et les transformants sont sélectionnés sur des milieux de glucose complets synthétiques dépourvus de tryptophane. Les transformants individuels sont ensuite striés sur un milieu de glucose synthétique complet dépourvu de tryptophane et les plaques sont incubées à partir de la plaque maîtresse. Pour analyser la restauration du phénotype à croissance lente dans le SGS transformé en WRN, l’un des trois principaux transformants de souche double mutant est strié sur des plaques contenant du glucose ou du galactose.