Name: Induction chirurgicale dhydrops endolymphatique par oblitération du canal endolymphatique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-22T16:52:00.000+00:00
Duration: 11 min 49 s
Description: Découvrez la technique chirurgicale d'obstruction du conduit endolymphatique chez le cobaye pour modéliser l'hydrops endolymphatique. Cette méthode permet d'étudier la pathologie de la maladie de Menière et les pertes auditives associées.

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Ce travail a été soutenu en partie par une subvention de l&#39;American Society otologique au CAM et par une subvention du Centre de l&#39;University Hospitals Case Medical KNA et CAM. Nous tenons à remercier Jeff Churney à Focus Medical Group, Inc (Hinckley, OH) pour nous avoir fourni une caméra microscope. Services de production vidéo est une gracieuseté de fusion créative Marketing, Inc (Valdosta) Nous remercions Jonathan Frankel et Alex Levitt au CWRU pour leurs commentaires lors de la préparation de la vidéo.

Partie 1: Anesthésie et préparation à la chirurgie <ol><li> Un adulte, femelle Duncan-Hartley de porc Guinée auprès de Charles River Laboratories international, Inc (Wilmington, MA) est anesthésié à la kétamine 60 mg / kg et de xylazine à 12 mg / kg par voie intramusculaire. </li><li> Lubrifiant Petroleum est appliqué sur les yeux afin de protéger l'animal de lésion cornéenne due à la dessiccation. </li><li> L'animal est rasé par le haut de la tête sur les épaules et entre les oreilles. </li><li> La zone rasée est préparée de façon stérile, d'abord avec 7,5% de povidone-iode suivie par 70% d'alcool éthylique. </li><li> L'animal est placé sur une table d'opération avec couverture chauffante et sur une plate-forme qui élève la tête et du cou fléchit. La tête de l'animal est dirigé loin de l'opérateur. La flexion de la nuque adéquate est requise afin de répondre adéquatement exposer la crête occipitale. </li><li> L'animal est drapé d'une façon stérile. </li></ol> Partie 2: L'incision et l'exposition de l'occiput osseuse <ol><li> La bupivacaïne, plus d'adrénaline (marcaïne) 0,25% est appliquée le long du site d'incision prospective (ligne médiane dorsale incision de la peau le long de la protubérance occipitale). Cela provoque une vasoconstriction locale, limitant saignements, et fournit une durée analgésie postopératoire après que l'animal se réveille. </li><li> Incision médiane peau dorsale est faite sur le cuir chevelu le long de la protubérance occipitale. <img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig1.jpg" alt="Figure 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 1"> Figure 1: L'incision cutanée est faite le long de la ligne médiane dorsale, comme indiqué ci-dessus. </li><li> Pour obtenir une exposition adéquate, la peau est écarté en dehors en plaçant une petite pince hémostatique courbe sur chaque côté de l'incision. </li><li> Une incision horizontale est pratiquée le long du muscle du cou pour exposer l'occiput osseux. A ce stade, l'animal peut contraction, malgré une anesthésie adéquate en raison de section transversale du nerf grand occipital. Section de la moelle épinière est un danger avec incision horizontale dans la région sous-occipitale. Cette complication peut être évitée en veillant à ce que l'os sous-jacent est toujours senti sous le bistouri. </li><li> Avec la musculature sous-occipitale incisées à l'os, un hémostatique troisième est utilisé pour rétracter le bord du muscle de qualité supérieure. Cette hémostatique est maintenu en place par l'assistant en chirurgie. </li><li> Un Lempert rugine est utilisée pour exposer la suture temporo-occipitale. </li></ol> Partie 3: Forage de la suture temporo-occipitale <ol><li> Lors de l'exposition de la suture temporo-occipital (figure 2), une perceuse otologiques avec 1,5 mm de bavures diamant est utilisée pour forer inferio-latéralement à la suture. </li><li> Ci-dessous la table externe du crâne, la texture spongieuse du diploé (L'os spongieux intervenant entre les tables du crâne) va devenir visible. Une fois le diploé a été foré loin, la table interne du crâne apparaît, avec une teinte bleu pâle qui est le sinus sigmoïde. </li><li> Les marges du sinus sigmoïde sont définies sans pénétrer dans le navire. </li><li> Une fois l'os recouvrant le sinus sigmoïde a été suffisamment éclaircis, plus fort grossissement est utilisée et un choix de droite est utilisé pour enlever soigneusement l'os recouvrant le sinus sigmoïde. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig2.jpg" alt="Figure 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 2"> Figure 2 La zone à être forés partie recouvre la suture temporo-occipitale. Partie 4: l'obstruction du canal <ol><li> Le sinus sigmoïde squelette est rentré dedans pour révéler l'opercule. </li><li> Un diamant de 0,5 mm bavure est utilisée pour forer dedans de l'opercule et dans le sac endolymphatique et le canal. </li><li> Le canal endolymphatique est ensuite emballé avec de la cire d'os à l'aide un pick droite. </li><li> Le défaut crâne est ensuite renforcée avec Gelfoam (Pfizer, New York, NY). </li><li> 4-0 POLYSORB (United States Surgical, Norwalk, CT) de suture est utilisée pour amener le muscle ensemble. Il ya donc une transition en douceur à une technique de suture sous-cutanée pour la fermeture de l'incision cutanée. Avec cette fermeture il n'est pas nécessaire d'enlever les sutures après et il n'ya aucun risque que l'animal griffe sur le site et tirez un fil de suture. </li></ol> Partie 5: Soins postopératoires Le cochon de Guinée est mis dans un incubateur pour maintenir la température du corps et vérifié à intervalles de 30 minutes jusqu'à ce éveillé et capable de maintenir une position sternale. L'animal est inspecté pour le taux de respiration et de la couleur du corps. Ce centre utilise l'enrofloxacine (0,2 mL à 22,7 mg / ml, sous-cutanée) et la buprénorphine (0,05 ml à 0.3mg/mL, sous-cutanée) pour la prophylaxie des infections post-opératoires et contrôle de la douleur, respectivement. Analgésique est administré une fois le jour de la chirurgie et deux fois le jour post-opératoire un et deux. Bien que les antibiotiques ne sont pas nécessaires pour su aseptiquesrgery, une durée de cinq jours, deux fois par jour bien sûr des antibiotiques à titre prophylactique peut être givenonce sur le post-opératoire de trois jours. Complications et de gestion <ol><li> La dépression respiratoire Le chirurgien doit toujours être conscient de la respiration de l'animal s. Si la respiration ralentit ou s'arrête, arrêter la chirurgie et d'inspecter visuellement le mouvement thoracique. Si l'animal éprouve de la difficulté respiratoire ou une respiration laborieuse, vérifier que la bouche et des voies respiratoires ne sont pas obstruées. </li><li> Utilisez des sinus sigmoïde Gelfoam pénétration et de compression ainsi que la pointe d'aspiration jusqu'à ce saignement est arrêté. </li><li> Pénétration de Dural couvrir le défaut d'Gelfoam. </li><li> Lésions vestibulaires Ne pas percer plus de 1 mm latéral du sinus sigmoïde. Cela risque en blessant le canal semi-circulaire postérieur, ce qui invaliderait toutes les données pour le cochon de Guinée. </li></ol>

<ol><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).</li>
<li>Kimura, R., Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membranous+hydrops+in+the+inner+ear+of+the+guinea+pig+after+obliteration+of+the+endolymphatic+sac%5BTitle%5D)+AND+%22Pract+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac.</a> Pract Otolaryngol. , (1965).</li>
</ol>

Expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec les directives et les règlements énoncés par le soin des animaux et du Comité institutionnel Utilisez à la Case Western Reserve University.

Dans les semaines qui suivent l'obstruction chirurgicale du canal endolymphatique, le sujet des expériences animales fluctuant perte auditive neurosensorielle telle que mesurée par la réponse évoquée auditive évoquée. Un échantillon de auditifs du tronc cérébral (ABR) l'enregistrement est montré dans la figure 3. L'oreille gauche sert de contrôle non opérés. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1728/1728fig4.jpg"><img border="0" src="/files/ftp_upload/1728/1728fig3tmb.jpg" alt="Fin 3" data-altupdatedat="1...

induction chirurgicale d&#39;hydrops endolymphatique par oblitération du canal endolymphatique

Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

L&#39;induction chirurgicale d&#39;hydrops endolymphatique (ELH) dans le cochon Guinée par l&#39;oblitération et l&#39;obstruction du canal endolymphatique est un modèle animal bien accepté de l&#39;état et une importante corrélation entre la maladie humaine de Ménière. En 1965, Robert Kimura et Harold Schuknecht décrite pour la première une approche intradurale d&#39;obstruction du canal endolymphatique (Kimura 1965). Bien qu&#39;efficace, cette technique, qui nécessite la pénétration du revêtement protecteur du cerveau, engagés un niveau indésirable de la morbidité et de mortalité chez les sujets animaux. Par conséquent, Andrews et Bohmer développé une approche extradural, qui produit moins de façon prévisible des complications associées au système nerveux central (SNC) la pénétration. (Andrews et Bohmer 1989) L&#39;approche décrite ici extradural exige d&#39;abord une incision médiane dans la région de l&#39;occiput pour exposer la couche musculaire sous-jacent. Nous intervenons uniquement sur le côté droit. Après rétraction du tissu appropriés sus-jacente, une incision horizontale est pratiquée dans la musculature de l&#39;occiput droit d&#39;exposer la ligne de suture temporo-occipital droit. Les os immédiatement inferio-latérale de la ligne de suture (Fig. 1) est ensuite percé avec une perceuse otologiques jusqu&#39;à ce que le sinus sigmoïde devient visible. Rétraction médiale du sinus sigmoïde révèle l&#39;opercule du conduit endolymphatique, qui abrite le sac endolymphatique. Forage en dedans de l&#39;opercule dans la région du sac endolymphatique révèle le canal endolymphatique, qui est ensuite emballée avec de la cire osseuse à produire une obstruction et finalement ELH. Dans les semaines suivantes, l&#39;animal montrent le développement progressif, la perte d&#39;audition fluctuante et la preuve histologique d&#39;ELH.

Cette vidéo montre comment chirurgicalement obstruction conduit endolymphatique le cochon de Guinée pour produire hydrops endolymphatique.

Induction chirurgicale d&#39;hydrops endolymphatique par oblitération du canal endolymphatique

L'induction chirurgicale de l'hydropisie endolymphatique (ELH) chez le cobaye, par oblitération et obstruction du canal endolymphatique, est un modèle animal bien accepté...

Bonjour, je m'appelle Chris Edden. Je suis chercheur à l'Université Case Western Reserve, au sein du Département d'oto-rhino-laryngologie et de chirurgie cervico-faciale. Aujourd'hui, je vais décrire le blocage chirurgical du canal endolymphatique chez le cobaye, une intervention qui provoque une hydrosérosité endolymphatique et sert à modéliser de nombreuses pathologies auriculaires liées à des maladies. Ando.L'hydros hydrosique est un gonflement du compartiment endo-lymphatique de la cochlée et constitue un marqueur histologique clé de la maladie de Ménière. Ici, vous voyez une image en coupe transversale d'une cochlée normale avec deux compartiments péri-lymphatiques, la rampe vestibulaire et la rampe tympanique, ainsi qu'une rampe médiane non dilatée, qui est continue avec le canal endolymphatique, la structure sur laquelle nous intervenons. Dans les semaines suivant l'intervention chirurgicale, la rampe médiane devient dilatée comme indiqué ici, et la membrane de Reissner devient distendue. Les animaux présentent également une perte auditive progressive et fluctuante au niveau de l'oreille opérée.Tout comme pour de nombreuses maladies de l’oreille, l’induction chirurgicale d’hydropisies chez le cobaye est devenue le modèle animal de référence pour la maladie de Ménière humaine depuis sa première description en 1965 par Robert Kor et Harold Schneck. Bien que cette procédure ait été initialement réalisée selon une approche plus invasive intradurale, notre centre préfère une approche extradurale car elle entraîne une morbidité et une mortalité moindres chez l’animal. Ce qui suit est une description des matériaux, des soins aux animaux et de l’abord chirurgical nécessaires pour réaliser avec succès et humanité cette procédure relativement complexe.Tout d'abord, je vais décrire les matériaux chirurgicaux nécessaires. L'animal est une cobaye femelle adulte, souche Duncan Hartley, albinos, provenant de Charles River International Laboratories Incorporated. Pour la préparation de la pièce et la mise en place stérile, vous aurez besoin d'une tenue chirurgicale stérile, d'un microscope opératoire muni d'une housse stérile et d'un système Mars, d'un champ opératoire petit et fenêtré, ainsi que d'un coussin chauffant et d'un appareil d'aspiration utilisés pendant l'intervention.Un aspirateur de taille 5, une solution saline stérile pour aspiration de taille 40, un bassin en acier inoxydable et un support pour la tête. Pour l'anesthésie, vous aurez besoin de kétamine à raison de 60 milligrammes par kilogramme et de xylazine à raison de 12 milligrammes par kilogramme préopératoirement. Vous aurez également besoin d'un lubrifiant ophtalmique à base de pétrole, d'un rasoir électrique, de Bétadine et d'alcool éthylique à 70 %. Pendant l'intervention, vous aurez besoin de 0,6 millilitre de marcain à 0,25 %, d'un scalpel jetable de sécurité de taille 11, de trois hémostats courbes, d'un élévateur périosté de Lieber, de mèches chirurgicales WEX, d'une fraise otologique, d'une fraise diamantée de 1,5 millimètre et d'une fraise diamantée de 0,5 millimètre.Une curette droite pour os, une seringue de 10 cm³, de la cire à os, de la mousse gélatineuse, du fil de suture résorbable 4-0 avec une aiguille coupeuse P 13, une pince adin, un porte-aiguille à mâchoire diamantée et des ciseaux à suture. Pour les soins postopératoires, vous aurez besoin d'une cage propre munie d'un tapis chauffant. Deux dixièmes de millilitre d'énrofloxacine à 22,7 milligrammes par millilitre.0,05 millilitre de buprénorphine à 0,3 milligramme par millilitre. Anesthésiez d'abord le cobaye avec du kéamine à 60 milligrammes par kilogramme et de la xylazine à 12 milligrammes par kilogramme, par voie intramusculaire. Ce protocole permet une anesthésie de 60 à 90 minutes sans dépression respiratoire, ce qui est généralement suffisant pour réaliser cette procédure.Après avoir anesthésié l'animal, un lubrifiant à base de pétrole est appliqué sur les yeux. Ensuite, la nuque est rasée à l’aide d’un tondeur électrique, de la région thoracique supérieure jusqu’au sommet du crâne. Puis le site est préparé avec du Betadine, suivi d’alcool.L'animal est désormais prêt pour la chirurgie. Je m'appelle le Dr Cliff McGillion. Je suis professeur d'oto-rhino-laryngologie et de chirurgie cervico-faciale au sein des hôpitaux de l'Université Case Western Reserve à Cleveland, ainsi que directeur de l'otologie et de la neuro-otologie.Ce dont je souhaite vous parler aujourd'hui est la technique chirurgicale permettant d'induire une hydrosé lymphatique endolymphatique chez le cobaye. Nous procédons par voie extra-orale et exposons le sinus sigmoïde, juste en avant et sur le côté du sinus sigmoïde. Nous localisons l'orifice du système lymphatique endolymphatique, retirons le matériel ductal et le matériel de la gaine, puis nous procédons effectivement au fraisage du canal sous vision directe.La partie la plus importante, selon moi, de la procédure consiste à désosser le sinus sigmoïde, puis à aller médialement à ce niveau et à visualiser directement l'orifice du conduit endolymphatique. Une fois le site chirurgical préparé, l'animal est transféré au bloc opératoire et placé sur un support pour la tête. Le cou est fléchi afin d'obtenir une exposition adéquate de la crête occipitale et est recouvert de champs stériles de manière aseptique pour assurer la santé et la sécurité de l'animal.Observez la même technique stérile que celle requise pour un patient humain afin de maintenir une température corporelle adéquate pendant l'intervention ; assurez-vous de placer un tapis chauffant sous la surface opératoire avant la première incision. Injectez un produit de marquage autour du site chirurgical. Commencez la procédure chirurgicale par une incision cutanée dorsale médiane au niveau du cuir chevelu, le long de l'occiput, afin d'obtenir une exposition adéquate. Rétractez la peau en plaçant une pince hémostatique de chaque côté de l'incision. La cautérisation électrique n'est pas nécessaire, car le cobaye possède un mécanisme hémostatique robuste.Ensuite, une incision horizontale est pratiquée le long du muscle du cou. Pour exposer l'occipital osseux, une incision bien positionnée peut immédiatement mettre au jour la suture temporale occipitale, comme illustré ici. La section du nerf occipital majeur, qui se situe fréquemment sous le muscle, peut provoquer un tressaillement de l'animal.Bien qu'une anesthésie adéquate soit administrée lors de la section du muscle, il est important de sentir l'os sous la lame. Dans le cas contraire, l'incision pourrait être trop basse, ce qui pourrait entraîner une section de la moelle épinière une fois traversé le muscle du cou. Un troisième clamp hémostatique est utilisé pour saisir la portion supérieure de l'incision et est maintenu en place par l'assistant chirurgical.La dissection émoussée est utilisée pour exposer l'os occipital. Veillez à rester en permanence du côté droit de la crête occipitale externe et à considérer l'oreille gauche comme témoin. Dans ce modèle, un élévateur périosté de type lumper est ensuite utilisé pour exposer davantage le crâne, ainsi que la crête occipitale externe et la ligne de suture temporale occipitale. Le perçage avec une fraise diamantée de 1,5 millimètre commence juste en dessous de la ligne de suture.L'objectif est d'exposer la fosse postérieure et le sinus sigmoïde. Tout perçage doit rester sur la ligne de suture temporale occipitale ou en dessous, à tout moment. Utilisez un tube d'aspiration numéro cinq pour aspirer le sang.Faites également en sorte qu'un assistant maintienne l'irrigation du champ avec du sérum physiologique stérile, goutte à goutte à partir d'une seringue de 10 ml. Le perçage provoquera un saignement provenant de la moelle, mais la fraise diamantée peut être utilisée pour arrêter les saignements à une profondeur d'environ un millimètre.Une ligne bleue pâle deviendra visible. Il s'agit du sinus sigmoïde. Restez simplement ici.Votre position unilatérale par rapport au sinus sigmoïde. Le bourgeon du conduit endolympathique peut être identifié. Il est important de délimiter les bords du sinus sigmoïde sans le pénétrer.Une fois que l'os sus-jacent est suffisamment mince, le perçage est arrêté et l'aspiration est changée pour un instrument numéro 40. Un grossissement plus élevé est également utilisé. Un curetage droit est employé pour retirer délicatement l'os sus-jacent.Le sinus sigmoïde est doucement rétracté vers la médiale, mettant ainsi en évidence l'opercule, qui peut ne pas être clairement visible car il est souvent obscurci par le sang. Le sinus sigmoïde dénudé est maintenant doucement rétracté vers la médiale, révélant l'opercule. La rainure est ensuite fraisée avec une mèche de coupe plus petite de 0,5, ce qui détruit le sac endolymphatique et conduit finalement au canal endolymphatique.Le canal apparaît comme une ovale sombre au sein de la blancheur de l'os environnant. Environ un millimètre du canal est foré avant d'être obturé avec de la cire osseuse. La cire osseuse est introduite dans le canal à l'aide d'une éponge de gel.L'occlusion du conduit endolymphatique induit une hydrogoutte endolymphatique. Une suture en polyshorb 4.0 est utilisée pour rapprocher le muscle. Ensuite, on passe sans discontinuité à une technique de suture sous-cutanée pour l'incision cutanée. Grâce à cette fermeture, il n'est pas nécessaire de retirer les sutures par la suite, et il n'y a aucun risque que l'animal gratte le site ou arrache une suture ou un agrafe.Postopératoirement, le cobaye est placé dans une couveuse afin de maintenir sa température corporelle, avec des contrôles toutes les 30 minutes jusqu'à son réveil. L'animal est examiné pour évaluer sa fréquence respiratoire et la couleur de son corps. Ce centre utilise l'antibiotique à large spectre inin et la buprénorphine pour les complications douloureuses.Comme pour toute chirurgie, il existe des risques pour l'animal. Je vais maintenant passer en revue certaines complications intraopératoires possibles et la manière de les éviter. En cas de dépression respiratoire, le chirurgien doit toujours être attentif à la respiration de l'animal, notamment si celle-ci s'arrête ou ralentit.Interrompre la chirurgie et inspecter visuellement la présence de mouvements thoraciques. Si l'animal est apnéique, vérifier que la bouche et les voies respiratoires ne sont pas obstruées. En cas de pénétration du sinus sigmoïde, utiliser de la gaze hémostatique et une compression accompagnée de l'embout d'aspiration jusqu'à l'arrêt du saignement.La pénétration de la dure-mère recouverte d'une mousse de gel endommage le vestibule ; ne percez pas à plus d'un millimètre latéralement par rapport au sinus sigmoïde, sinon le canal semi-circulaire postérieur pourrait être lésé, ce qui invaliderait toutes les données pour ce cobaye particulier. Le blocage chirurgical du canal endolymphatique chez le cobaye est une intervention techniquement exigeante, mais avec les outils adéquats, des instructions précises et une connaissance approfondie de l'anatomie concernée, elle peut être réalisée de manière à la fois respectueuse du bien-être animal et utile comme modèle de la maladie de Ménière humaine.

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