22 janvier 2010
Cette vidéo montre comment chirurgicalement obstruction conduit endolymphatique le cochon de Guinée pour produire hydrops endolymphatique.
Bonjour, je m'appelle Chris Edden. Je suis chercheur à l'Université Case Western Reserve, au sein du département d'oto-rhino-laryngologie et de chirurgie cervico-faciale. Aujourd'hui, je vais décrire le blocage chirurgical du canal endolymphatique chez le cobaye, lequel provoque une hydrosérosité endolymphatique et sert à modéliser de nombreuses pathologies auriculaires liées à des maladies. Ando.
L'hydros hydrosique est un gonflement du compartiment endo-lymphatique de la cochlée et constitue un marqueur histologique clé de la maladie de Ménière. Ici, vous voyez une image en coupe transversale d'une cochlée normale avec deux compartiments péri-lymphatiques, la rampe vestibulaire et la rampe tympanique, ainsi qu'une rampe médiane non dilatée, qui est continue avec le canal endo-lymphatique, la structure sur laquelle nous intervenons. Quelques semaines après la procédure chirurgicale, la rampe endo-lymphatique devient dilatée comme indiqué ici, et la membrane de Reissner devient distendue. Les animaux présentent également une perte auditive progressive et fluctuante au niveau de l'oreille opérée.
Tout comme pour de nombreuses maladies de l’oreille, l’induction chirurgicale d’hydropisies chez le cobaye est devenue le modèle animal de référence pour la maladie de Ménière humaine depuis sa première description en 1965 par Robert Kor et Harold Schneck. Bien que cette procédure ait initialement été réalisée selon une approche plus invasive intradurale, notre centre préfère une approche extradurale car elle entraîne une morbidité et une mortalité moindres chez l’animal. Ce qui suit est une description des matériaux, des soins aux animaux et de l’abord chirurgical nécessaires pour réaliser avec succès et humanité cette procédure relativement complexe.
Tout d'abord, je décrirai les matériaux chirurgicaux nécessaires. L'animal est une cobaye femelle adulte, de souche Duncan Hartley, albinos, provenant de Charles River International Laboratories Incorporated. Pour la préparation de la salle et la mise en place stérile, vous aurez besoin d'une tenue chirurgicale stérile, d'un microscope opératoire muni d'une housse stérile et de Mars, d'un champ opératoire petit et fenêtré, ainsi que d'un coussin chauffant intraopératoire et d'un appareil d'aspiration.
Un aspirateur numéro cinq, une aspiration de solution saline stérile numéro 40, un bassin en acier inoxydable et un support de tête. Pour l'anesthésie, vous aurez besoin de kétamine à 60 milligrammes par kilogramme et de xylazine à 12 milligrammes par kilogramme en préopératoire. Vous aurez besoin d'un lubrifiant ophtalmique à base de pétrolatum, d'un rasoir électrique, de la Bétadine et d'alcool éthylique à 70 %. En peropératoire, vous aurez besoin de 0,6 millilitre de marcaine à 0,25 %, d'un bistouri jetable de sécurité numéro 11, de trois pinces hémostatiques courbes, d'un élévateur périosté de type Lier, de pointes chirurgicales WEX, d'un trépan otologique, d'une fraise diamantée de 1,5 millimètre et d'une fraise diamantée de 0,5 millimètre.
Une curette droite pour os, une seringue de 10 cm³, de la cire à os, de la mousse gélatineuse, un fil de suture résorbable 4-0 avec une aiguille à pointe triangulaire P 13, une pince d'adduction, un porte-aiguille à mâchoire diamantée et des ciseaux à suture. Pour les soins postopératoires, vous aurez besoin d'une cage propre munie d'un tapis chauffant. Deux dixièmes de millilitre d'énrofloxacine à 22,7 milligrammes par millilitre.
0,05 millilitre de buprénorphine à 0,3 milligramme par millilitre. Anesthésiez d'abord le cobaye avec du kéramine à 60 milligrammes par kilogramme et de la xylazine à 12 milligrammes par kilogramme, par voie intramusculaire. Ce protocole permet une anesthésie de 60 à 90 minutes sans dépression respiratoire, ce qui est généralement suffisant pour réaliser cette procédure.
Après avoir anesthésié l'animal, un lubrifiant à base de pétrole est appliqué sur les yeux. Ensuite, la région postérieure de la tête est rasée à l’aide d’un tondeur électrique, de la région thoracique supérieure jusqu’au sommet du crâne. Puis le site est préparé avec du Bétadine, suivi d’alcool.
L'animal est désormais prêt pour l'intervention chirurgicale. Je m'appelle le Dr Cliff McGillion. Je suis professeur d'oto-rhino-laryngologie et de chirurgie cervico-faciale au sein des hôpitaux de l'Université Case Western Reserve à Cleveland, ainsi que directeur d'Otologie et de Neurotologie.
Ce dont je souhaite vous parler aujourd'hui est la technique chirurgicale permettant d'induire une hydros de l'endo-lymphatique chez le cobaye. Nous procédons par voie extra-orale et exposons le sinus sigmoïde, juste en avant et en latéral par rapport au sinus sigmoïde. Nous localisons l'orifice du système endo-lymphatique, retirons le matériel ductal et le matériel de la sac, puis nous fraisons effectivement le canal sous visualisation directe.
La partie la plus importante, selon moi, de la procédure consiste à désosser le sinus sigmoïde, puis à aller médialement à celui-ci et à visualiser directement l'orifice du conduit endolymphatique. Une fois le site chirurgical préparé, l'animal est transféré au bloc opératoire et placé sur un support pour la tête. Le cou est fléchi afin d'obtenir une exposition adéquate de la crête occipitale et est recouvert de champs stériles de manière aseptique pour assurer la santé et la sécurité de l'animal.
Observez la même technique stérile que celle requise pour un patient humain afin de maintenir une température corporelle adéquate pendant l'intervention ; assurez-vous de placer un tapis chauffant sous la surface opératoire avant la première incision. Injectez un produit de marquage autour du site chirurgical. Commencez la procédure chirurgicale par une incision cutanée dorsale médiane au niveau du cuir chevelu, le long de l'occiput, afin d'obtenir une exposition adéquate. Rétractez la peau en plaçant une pince hémostatique de chaque côté de l'incision. La cautérisation électrique n'est pas nécessaire, car le cobaye possède un mécanisme hémostatique robuste.
Ensuite, une incision horizontale est pratiquée le long du muscle du cou. Pour exposer l'occipital osseux, une incision bien positionnée peut immédiatement mettre au jour la suture temporale occipitale, comme illustré ici. La section du nerf occipital majeur, qui se situe fréquemment sous le muscle, peut provoquer un tressaillement de l'animal.
Bien qu'une anesthésie adéquate soit administrée lors de la section du muscle, il est important de sentir l'os sous la lame. Dans le cas contraire, l'incision pourrait être trop basse, ce qui pourrait entraîner une section de la moelle épinière une fois traversé le muscle du cou. Un troisième hémostat est utilisé pour saisir la portion supérieure de l'incision et est maintenu en place par l'assistant chirurgical.
La dissection émoussée est utilisée pour exposer l'os occipital. Veillez à rester constamment du côté droit de la crête occipitale externe et à considérer l'oreille gauche comme témoin. Dans ce modèle, un levier périosté alumper est ensuite utilisé pour exposer davantage le crâne, ainsi que la crête occipitale externe et la ligne de suture occipito-temporale. Le perçage avec une fraise diamantée de 1,5 millimètre commence juste en dessous de la ligne de suture.
L'objectif est d'exposer la fosse postérieure et le sinus sigmoïde. Tout perçage doit rester sur ou en dessous de la ligne de suture temporale occipitale à tout moment. Utilisez un tube d'aspiration numéro cinq pour aspirer le sang.
Faites également en sorte qu'un assistant maintienne l'irrigation du champ avec du sérum physiologique stérile, goutte à goutte à partir d'une seringue de 10 cc. Le perçage provoquera un saignement provenant de la moelle, mais la fraise diamantée peut être utilisée pour arrêter les saignements à une profondeur d'environ un millimètre.
Une ligne bleue pâle deviendra visible. Il s'agit du sinus sigmoïde. Restez simplement ici.
Votre position est latérale par rapport au sinus sigmoïde. Une expansion du canal endolymphatique peut être observée. Il est important de définir les limites du sinus sigmoïde sans le pénétrer.
Une fois que l'os sus-jacent est suffisamment mince, le perçage est arrêté et l'aspiration est changée pour un diamètre numéro 40. Un grossissement plus élevé est également utilisé. Un curetage droit sert à retirer délicatement l'os sus-jacent.
Le sinus sigmoïde est doucement rétracté vers la médiale, mettant ainsi en évidence l'opercule, qui peut ne pas être clairement visible car il est souvent obscurci par le sang. Le sinus sigmoïde dénudé est maintenant doucement rétracté vers la médiale, révélant l'opercule. La rainure est ensuite fraise avec une mèche de coupe plus petite de 0,5, oblitérant le sac endolymphatique et conduisant finalement au canal endolymphatique.
Le canal apparaît comme une ovale sombre au sein de la blancheur de l'os environnant. Environ un millimètre du canal est foré avant d'être obturé avec de la cire osseuse. La cire osseuse est introduite dans le canal à l'aide d'une éponge de gel.
L'occlusion du canal lymphatique interne induit une hydrogoutte lymphatique interne. Une suture en polyshorb 4.0 est utilisée pour rapprocher le muscle. Ensuite, on passe sans interruption à une technique de suture sous-cutanée pour l'incision cutanée. Grâce à cette fermeture, il n'est pas nécessaire d'enlever les fils de suture par la suite, et il n'y a aucun risque que l'animal gratte le site ou arrache un fil ou une agrafe.
Postopératoirement, le cobaye est placé dans une couveuse afin de maintenir sa température corporelle, avec des contrôles toutes les 30 minutes jusqu'à son réveil. L'animal est examiné pour évaluer sa fréquence respiratoire et la couleur de son corps. Ce centre utilise l'antibiotique à large spectre inin et la buprénorphine pour les complications douloureuses.
Comme pour toute chirurgie, il existe des risques pour le sujet. Je vais donc passer en revue certaines complications intraopératoires possibles et la manière de les éviter. En cas de dépression respiratoire, le chirurgien doit toujours être attentif à la respiration de l'animal, notamment si celle-ci s'arrête ou ralentit.
Interrompre la chirurgie et inspecter visuellement la présence de mouvements thoraciques. Si l'animal est apnéique, vérifier que la bouche et les voies respiratoires ne sont pas obstruées. En cas de pénétration du sinus sigmoïde, utiliser de la gaze hémostatique et une compression accompagnée de l'embout d'aspiration jusqu'à l'arrêt du saignement.
La pénétration de la dure-mère recouverte d'une éponge de gel comporte un risque de lésion vestibulaire ; ne percez pas à plus d'un millimètre latéralement par rapport au sinus sigmoïde, sinon le canal semi-circulaire postérieur pourrait être endommagé, ce qui invaliderait toutes les données pour ce cobaye particulier. Le blocage chirurgical du canal endolymphatique chez le cobaye est une intervention techniquement exigeante, mais avec les outils appropriés, des instructions précises et une connaissance approfondie de l'anatomie concernée, elle peut être réalisée de manière à la fois respectueuse du bien-être animal et utile comme modèle de la maladie de Ménière humaine.
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Ce vidéo montre l'obstruction chirurgicale du canal endolymphatique du cobaye, entraînant la formation d'un hydropis endolymphatique. Ce modèle est important pour l'étude des pathologies de l'oreille liées à la maladie de Ménière.
Ce modèle chirurgical fournit une méthode reproductible pour induire une hydropisie endolymphatique chez le cobaye, permettant des études mécanistiques de la dysrégulation des fluides de l'oreille interne liée à la physiopathologie de la maladie de Ménière. L'abord extradural réduit la morbidité chirurgicale tout en préservant la fidélité du modèle, soutenant ainsi la validation préclinique de cibles thérapeutiques et le développement d'essais pour des traitements otiques. Il constitue un système pertinent pour évaluer les effets de composés sur l'homéostasie endolymphatique et la fonction auditive.
Le modèle s'intègre à la chaîne de découverte, de la validation de la cible à l'identification de composés précurseurs et aux tests d'efficacité préclinique, en particulier pour les troubles otiques impliquant une dysrégulation de l'équilibre hydrique.