Name: Sélection daptamères pour amyloïde β-protéine, lagent causal de la maladie dAlzheimer (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-13T17:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 23 s
Description: Découvrez la sélection d'aptamères ARN ciblant la protéine bêta-amyloïde impliquée dans la maladie d'Alzheimer. Cette méthode in vitro utilise transcription, liaison sur filtre et amplification pour isoler des molécules spécifiques.

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Ce travail a été soutenu par des subventions du NIH AG030709 / NIA et 07-65798 du California Department of Public Health. Nous reconnaissons Margaret M. Condron pour la synthèse peptidique et de l&#39;analyse des acides aminés, le Dr Elizabeth F. Neufeld pour les aider et de soutenir les premières étapes du projet, le Dr Chi-Hong Chen B. de fournir un soutien et des réactifs, et le Dr Andrew D . Ellington pour les discussions utiles.

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<li>Luhrs, T., Zahn, R., Wuthrich, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amyloid+formation+by+recombinant+full-length+prion+proteins+in+phospholipid+bicelle+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Amyloid formation by recombinant full-length prion proteins in phospholipid bicelle solutions.</a> J. Mol. Biol. 357, 833-841 (2006).</li>
<li>Bunka, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+and+characterization+of+RNA+aptamers+specific+for+amyloid+fibril+epitopes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Production and characterization of RNA aptamers specific for amyloid fibril epitopes.</a> J. Biol. Chem. 282, 34500-34509 (2007).</li>
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<li>Rahimi, F., Murakami, K., Summers, J. L., Chen, C. H., Bitan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+aptamers+generated+against+oligomeric+A%CE%B240+recognize+common+amyloid+aptatopes+with+low+specificity+but+high+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">RNA aptamers generated against oligomeric Aβ40 recognize common amyloid aptatopes with low specificity but high sensitivity.</a> PLoS ONE. 4, e7694-e7694 (2009).</li>
<li>Bitan, G., Lomakin, A., Teplow, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amyloid+%CE%B2-protein+oligomerization%3A+prenucleation+interactions+revealed+by+photo-induced+cross-linking+of+unmodified+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Amyloid β-protein oligomerization: prenucleation interactions revealed by photo-induced cross-linking of unmodified proteins.</a> J. Biol. Chem. 276, 35176-35184 (2001).</li>
<li>Rahimi, F., Maiti, P., Bitan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photo-induced+cross-linking+of+unmodified+proteins+%28PICUP%29+applied+to+amyloidogenic+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Photo-induced cross-linking of unmodified proteins (PICUP) applied to amyloidogenic peptides.</a> J. Vis. Exp. , (2009).</li>
<li>Bitan, G., Fradinger, E. A., Spring, S. M., Teplow, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurotoxic+protein+oligomers-what+you+see+is+not+always+what+you+get%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Neurotoxic protein oligomers-what you see is not always what you get.</a> Amyloid. 12, 88-95 (2005).</li>
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</ol>

Le point de départ du processus SELEX est la synthèse d&#39;une bibliothèque d&#39;oligonucléotides aléatoires contenant typiquement 10 12 -10 15 séquences. Dans l&#39;ADN SELEX, cette bibliothèque est utilisée directement après une piscine ADNss est généré, alors que dans l&#39;ARN SELEX, démontré ici, la bibliothèque ADNss est convertie d&#39;abord à un pool d&#39;ARN enzymatiquement par transcription in vitro. Puis, SELEX est réalisé itérativement lequel chaque cycle comprend l...

<table><tbody><tr><td>A&amp;#946;40</td><td>Laboratoire des biopolymères de l'UCLA</td><td></td><td>Poudre lyophilisée</td></tr><tr><td>MX5 Automated-S Microbalance</td><td>Mettler Toledo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubes de 1,6 ml revêtus de silicium</td><td>Denville Scientific</td><td>C19033 ou C19035</td><td></td></tr><tr><td>1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (HFIP)</td><td>TCI America</td><td>H0424</td><td>Utiliser sous une hotte chimique.</td></tr><tr><td>Persulfate d'ammonium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-7460</td><td>Agiter vigoureusement jusqu'à ce que la solution devienne limpide. Le APS est préparé frais à chaque utilisation et doit être utilisé dans les 48 heures.</td></tr><tr><td>Tris(2,2-bipyridyl)dichlororuthénium(II) hexahydraté</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>224758-1G</td><td>Agiter vigoureusement jusqu'à ce que la solution devienne limpide. Recouvrir le tube de RuBpy d'une feuille d'aluminium pour protéger le réactif de la lumière ambiante. Le RuBpy est préparé frais à chaque utilisation et doit être employé dans les 48 heures.</td></tr><tr><td>Dithiothréitol (DTT)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>43815</td><td></td></tr><tr><td>D-Salt&amp;#8482; Excellulose&amp;#8482; colonnes de désalinisation</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>20449</td><td></td></tr><tr><td>acétate d'ammonium</td><td>Fisher Scientific</td><td>A637-500</td><td></td></tr><tr><td>Tubes de 0,6 ml revêtus de silicium</td><td>Denville Scientific</td><td>C19063</td><td></td></tr><tr><td>Gels Novex Tricine (10&amp;#8211;20%)</td><td>Invitrogen</td><td>EC6625B0X</td><td>10 puits ; format mini (8 cm x 8 cm) ; 25 &amp;#x03BC;l volume de chargement par puits ; plage de séparation de 5 kDa à 40 kDa</td></tr><tr><td>Cuvette en quartz</td><td>Hellma</td><td>105.250-QS</td><td></td></tr><tr><td>Beckman DU 640 spectrophotomètre</td><td>Beckman Coulter Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>bibliothèque d'ADN simple brin</td><td>Integrated DNA Technologies</td><td>Sur commande personnalisée</td><td>La bibliothèque a été conçue pour contenir 49 nucléotides aléatoires encadrés par deux régions constantes comprenant des sites de liaison des amorces et de clonage : 5&amp;rsquo;-TAA TAC GAC TCA CTA TAG GGA ATT CCG CGT GTG C (N : 25 : 25 : 25 : 25 %) (N)&lt;sub&gt;49&lt;/sub&gt; G TCC GTT CGG GAT CCT C-3&amp;rsquo;</td></tr><tr><td>Taq polymérase ADN</td><td>USB Corp., Affymetrix</td><td>71160</td><td>Recombinant &lt;em&gt;Thermus aquaticus&lt;/em&gt; ADN polymérase fournie avec 10&amp;#215; Tampon PCR et un tube séparé de MgCl₂ 25 mM&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; pour la PCR courante.</td></tr><tr><td>PCR Nucleotide Mix, solution 10 mM</td><td>USB Corp., Affymetrix</td><td>77212</td><td>(10 mM chacun de dATP, dCTP, dGTP, dTTP)</td></tr><tr><td>Amorce avant</td><td>Integrated DNA Technologies</td><td>Sur commande personnalisée</td><td>5&amp;rsquo;-TAA TAC GAC TCA CTA TAG GGA ATT CCG CGT GTG C-3&amp;rsquo;</td></tr><tr><td>Amorce reverse</td><td>Integrated DNA Technologies</td><td>Sur commande</td><td>5&amp;rsquo;-GAG GAT CCC GAA CGG AC-3&amp;rsquo;</td></tr><tr><td>Thermostat de PCR</td><td>Denville Scientific</td><td>Techne TC-312</td><td></td></tr><tr><td>Kit de purification QIAquick PCR (50)</td><td>Qiagen</td><td>28104</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Denville Scientific</td><td>CA3510-8</td><td></td></tr><tr><td>Tubes coniques stériles de 1,6 ml avec bouchons munis de joints toriques</td><td>Denville Scientific</td><td>C19040-S</td><td></td></tr><tr><td>RiboMAX&amp;#8482; Système de production d'ARN à grande échelle&amp;#8211;T7</td><td>Promega Corp.</td><td>P1300</td><td>Le kit contient : 120 &amp;#x03BC;l'enzyme mix (ARN polymérase, RNasin recombinante)&amp;#174; inhibiteur de ribonucléase et pyrophosphatase inorganique recombinante) ; 240 &amp;#x03BC;tampon de transcription 5 ; 100 &amp;#x03BC;l chacun des 4 rNTPs, 100 mM ; 110 U de DNase RQ1 sans RNase, 1 U/&amp;#x03BC;l; 10 &amp;#x03BC;ADN témoin linéaire, 1 mg/ml ; 1 ml d'acétate de sodium 3 M (pH 5,2) ; 1,25 ml d'eau sans nucléase</td></tr><tr><td>&amp;alpha;-&lt;sup&gt;32&lt;/sup&gt;P-cytidine 5&amp;rsquo;-triphosphate, 250 &amp;mu;Ci (9,25 MBq) </td><td>PerkinElmer, Inc.</td><td>BLU008H250UC</td><td>Activité spécifique : 3000 Ci (111 TBq)/mmol, Tricine 50 mM (pH 7,6)</td></tr><tr><td>Phénol saturé au citrate : chloroforme : alcool isoamylique (125:24:1, pH 4,7)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>77619</td><td></td></tr><tr><td>Chloroforme : alcool isoamylique (24:1)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0549</td><td></td></tr><tr><td>Éthanol absolu pour biologie moléculaire</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>centrifugeuse microcentrifuge réfrigérée Z216-MK</td><td>Denville Scientific</td><td>C0216-MK</td><td></td></tr><tr><td>illustra ProbeQuant&amp;#8482; Colonnes micro G-50</td><td>GE Healthcare</td><td>Obtenu auprès de Fisher Scientific (45-001-487)</td><td>Préemballé avec du Sephadex&amp;#8482; G-50 de qualité ADN, pré-équilibré dans un tampon STE contenant 0,15 % de Kathon comme biocide</td></tr><tr><td>Compteur de scintillation de table Triathler</td><td>Hidex Oy, Turku, Finlande</td><td>Modèle Triathler LSC : 425-034</td><td></td></tr><tr><td>Novex&amp;#174; Tampon d'échantillonnage TBE-Uréa (2&amp;#215;)</td><td>Invitrogen</td><td>LC6876</td><td></td></tr><tr><td>Gels TBE-Uréa 6 %, 1,0 mm, 10 puits</td><td>Invitrogen</td><td>EC6865BOÎTE</td><td></td></tr><tr><td>Novex&amp;#174; Tampon de migration TBE (5&amp;#215;)</td><td>Invitrogen</td><td>LC6675</td><td></td></tr><tr><td>Désinfectant contre la radioactivité</td><td>Fisher Scientific</td><td>04-355-67</td><td></td></tr><tr><td>Embouts de chargement pour gel</td><td>Denville Scientific</td><td>P3080</td><td></td></tr><tr><td>XCell &lt;em&gt;SureLock&lt;/em&gt; Mini-cellule</td><td>Invitrogen</td><td>EI0001</td><td>XCell &lt;em&gt;SureLock&lt;/em&gt; Mini-cellule</td></tr><tr><td>Film d'autoradiographie</td><td>Denville Scientific</td><td>E3018</td><td>Utilisation en totale obscurité</td></tr><tr><td>film d'autoradiographie, Hyperfilm&amp;#8482; ECL</td><td>Amersham</td><td>RPN3114K</td><td>Peut être utilisé sous lumière rouge de sécurité.</td></tr><tr><td>Disques membranaires</td><td>EMD Millipore</td><td>GSWP02500</td><td>Ester mixte de cellulose, hydrophile, 0,22-&amp;#x03BC;membranes de disque m</td></tr><tr><td>Base de support en verre fritté pour flacon de 125 ml</td><td>VWR international</td><td>26316-696</td><td></td></tr><tr><td>Plaques de Pétri</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-757-11YZ</td><td></td></tr><tr><td>Urée</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC32738-0050</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher Scientific</td><td>118430010</td><td></td></tr><tr><td>Glycogène</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G1767</td><td></td></tr><tr><td>2-propanol pour biologie moléculaire</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I9516</td><td></td></tr><tr><td>Inhibiteur recombinant de la RNase</td><td>USB Corp., Affymetrix</td><td>71571</td><td></td></tr><tr><td>ImProm-II&amp;#8482;Système de transcription inverse</td><td>Promega Corp.</td><td>A3802</td><td></td></tr><tr><td>Inhibiteur recombinant de RNase</td><td>USB Corp., Affymetrix</td><td>71571</td><td></td></tr><tr><td>RapidRun&amp;#8482; Colorant de charge</td><td>USB Corp., Affymetrix</td><td>77524</td><td></td></tr></tbody></table>

sélection d&#39;aptamères pour amyloïde β-protéine, l&#39;agent causal de la maladie d&#39;alzheimer

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

La maladie d&#39;Alzheimer (MA) est une progressive, dépendant de l&#39;âge, maladie neurodégénérative avec une évolution insidieuse qui rend son diagnostic présymptomatique difficiles 1. AD diagnostic définitif est réalisé l&#39;autopsie seulement, établissant ainsi présymptomatique, le diagnostic précoce de la MA est crucial pour développer et administrer des traitements efficaces 2,3. Amyloïde β-protéine (Aß) est au centre de la pathogenèse AD. Soluble, oligomérique assemblées Aßi auraient des effets sur la neurotoxicité dysfonction sous-jacente synaptique et la perte de neurones dans l&#39;AD 4,5. Diverses formes de Aß solubles assemblées ont été décrits, cependant, leurs interrelations et de la pertinence de l&#39;étiologie et la pathogenèse AD sont complexes et mal comprises 6. Des outils spécifiques de reconnaissance moléculaire peut démêler les relations entre les assemblées Aßi et de faciliter la détection et la caractérisation de ces assemblées au début de l&#39;évolution de la maladie avant que les symptômes apparaissent. La reconnaissance moléculaire s&#39;appuie souvent sur des anticorps. Cependant, une autre classe d&#39;outils de reconnaissance moléculaire, des aptamères, offre des avantages importants par rapport aux anticorps 7,8. Les aptamères sont des oligonucléotides générés par la sélection in vitro: l&#39;évolution systématique des ligands par enrichissement exponentiel (SELEX) 9,10. SELEX est un processus itératif qui, semblable à l&#39;évolution darwinienne, permet la sélection, d&#39;amplification, d&#39;enrichissement, et la perpétuation d&#39;une propriété, par exemple, avide, ligand spécifique, contraignant (aptamères) ou de l&#39;activité catalytique (ribozymes et ADNzymes). Malgré l&#39;émergence d&#39;aptamères comme outils de la biotechnologie moderne et la médecine 11, ils ont été sous-utilisés dans le domaine de l&#39;amyloïde. Peu ou ARN aptamères ADNss ont été sélectionnés contre les différentes formes de protéines du prion (PrP) 12-16. Un aptamère ARN générés contre la PrP recombinante bovine a été montré à reconnaître la PrP bovine β-17, une forme soluble, oligomérique, β-feuille riche en variantes de conformation de la PrP pleine longueur qui forme des fibrilles amyloïdes 18. Les aptamères générés en utilisant les formes monomériques et plusieurs de β 2-microglobuline fibrillaire (β 2 m) ont été trouvés pour lier les fibrilles de certaines autres protéines amyloïdogéniques dehors β 2 m 19 fibrilles. Ylera et al. décrit aptamères d&#39;ARN sélectionnés contre immobilisé monomère Aß40 20. De façon inattendue, ces aptamères liés fibrillaire Aß40. Au total, ces données soulèvent plusieurs questions importantes. Pourquoi aptamères sélectionnés contre des protéines monomériques reconnaître leurs formes polymères? Pourriez aptamères contre les formes monomères et / ou oligomères de protéines amyloïdogéniques être obtenus? Pour répondre à ces questions, nous avons tenté de sélectionner des aptamères pour covalente stabilisée oligomères Aß40 21 généré en utilisant la photo-induite de réticulation des protéines non modifiées (PICUP) 22,23. Similaires aux constatations antérieures 17,19,20, ces aptamères ont réagi avec des fibrilles de Aß et de plusieurs autres protéines amyloïdogéniques susceptible de reconnaître une substance amyloïde potentiellement communes structurelles aptatope 21. Ici, nous présentons la méthodologie utilisée dans la production SELEX de ces aptamères 21.

Les aptamères sont sélectionnés par ribo-/deoxyribo-oligonucleotides courte<em&gt; In-vitro</em&gt; Les méthodes basées sur l&#39;évolution affinité pour une cible spécifique. Les aptamères sont des outils de reconnaissance moléculaire avec polyvalente applications thérapeutiques, diagnostiques et de recherche. Nous démontrons méthodes de sélection des aptamères pour amyloïde β-protéine, l&#39;agent causal de la maladie d&#39;Alzheimer.

Sélection d&#39;aptamères pour amyloïde β-protéine, l&#39;agent causal de la maladie d&#39;Alzheimer

La maladie d'Alzheimer (MA) est un trouble neurodégénératif progressif, dépendant de l'âge, dont l'évolution insidieuse rend son diagnostic présymptomatique...

L'objectif général des expériences de sélection est de sélectionner des molécules d'ARN qui se lient spécifiquement et fortement à une protéine cible dans les sélections d'ARN. Cela est réalisé par une transcription in vitro d'ARN à partir d'une bibliothèque d'oligonucléotides d'ADN aléatoires, suivie d'une incubation du pool d'ARN transcrit avec la protéine cible. Une filtration par liaison est ensuite utilisée comme deuxième étape.Cela sépare les molécules d'ARN cibles liantes du pool d'ARN non lié. Ensuite, les molécules d'ARN cibles liantes sont éludées, transcrits inversement en ADN, amplifiés par PCR et retranscrits en ARN.Ce pool d'ARN, désormais enrichi en aptamères ayant une certaine affinité de liaison, est utilisé pour la liaison à la cible lors du prochain cycle de sélection. Généralement, après huit à vingt cycles, des aptamères spécifiques de la cible et présentant une forte avidité sont sélectionnés et caractérisés. Bonjour, je suis Gal Bean du Département de neurologie à l'UCLA, aujourd'hui Far Rahimi.Un postdoctorant expérimenté de mon laboratoire va démontrer un procédé appelé cellex. Nous avons utilisé ce procédé dans le laboratoire pour sélectionner des abers di

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Nous décrivons une technique pour la préparation de clarifier humaine homogénats corticaux, la séparation des protéines par SDS-PAGE, la récupération d'antigène et immunoblot avec un anticorps dirigé contre le peptide Aß. En utilisant ce protocole, nous avons constamment de détecter Aßi monomère et multimère dans le tissu cortical des humains à la pathologie d'Alzheimer.

Détection SDS-PAGE/Immunoblot de multimères de Aßi tissu cortical humain homogénats utilisant l&#39;antigène démas

En utilisant la microscopie à force atomique en combinaison avec la technologie de biopanning, nous avons créé un système de biopanning négatif et positif pour acquérir des anticorps contre les variantes de protéines spécifiques à la maladie présentes dans n’importe quel matériel biologique, même à de faibles concentrations.  Nous avons réussi à obtenir des anticorps dirigés contre des variantes de la protéine TDP-43 impliquées dans la sclérose latérale amyotrophique.

Roman microscopie à force atomique Based biopanning pour l&#39;isolement de la morphologie réactifs spécifiques contre TDP-43 variantes dans la sclérose latérale amyotrophique

Bien que le transport des protéines de la surface cellulaire est relativement facilement étudiée en visualisant le trafic des protéines intracellulaires est beaucoup plus difficile. Ici, nous utilisons des constructions incorporant GFP photoactivable et démontrons une méthode pour suivre avec précision la protéine précurseur de l'amyloïde à partir de l'appareil de Golgi à compartiments en aval et de suivre son jeu.

Imagerie du trafic intracellulaire de l&#39;APP avec la GFP photoactivable

Pour étudier les effets d’Aβo in vivo, nous avons développé un modèle basé sur des perfusions répétées d’Aβo soluble dans l’hippocampe couplées à une perfusion continue d’anticorps Aβo (6E10) dans l’hippocampe à l’aide de pompes osmotiques pour contrer l’effet neurotoxique d’Aβo.

Neurodégénérescence dans un modèle animal de chronique bêta-amyloïde Oligomère Infusion est contrecarré par Antibody traitement Infused avec les pompes osmotiques

Nous rapportons ici un protocole de purification par HPLC sur mesure qui produit de haute pureté bêta-amyloïde 42 (Aß42) et de bêta-amyloïde 40 (Aß40) peptides, capable de former des oligomères. Bêta-amyloïde est un peptide hydrophobe fortement l'agrégation prédisposé impliquée dans la maladie d'Alzheimer. La nature amyloïdogène du peptide rend sa purification un défi.

Un protocole Purification Tailored HPLC que les rendements de haute pureté amyloïde bêta 42 et bêta-amyloïde 40 Peptides, capable de former Oligomère

Un protocole de fractionnement abrégée pour l’enrichissement des agrégats de protéine insoluble dans le détergent du cerveau post-mortem humain est décrite.

Enrichissement des agrégats de protéine insoluble dans le détergent du cerveau post-mortem humain

Ce protocole décrit comment préparer des oligomères bêta-amyloïdes d’un peptide synthétique in vitro et d’évaluer les quantités relatives des oligomères bêta-amyloïdes par une dot blot analyse.

A11-positif β-amyloïde oligomère préparation et évaluation à l’aide de Dot Blot Analysis

Imagerie moléculaire avec laser assistée par matrice désorption/ionisation-basée d’imagerie spectrométrie de masse (MALDI-IMS) permet la cartographie simultanée de plusieurs analytes dans des échantillons biologiques. Nous présentons ici un protocole pour la détection et la visualisation de la protéine β-amyloïde sur les tissus cérébraux de la maladie d’Alzheimer et d’angiopathie amyloïde échantillons à l’aide de MALDI-IMS.

Visualisation des dépôts β-amyloïde dans le cerveau humain avec Laser assistée par matrice désorption-ionisation d’imagerie de la spectrométrie de masse

Le présent protocole décrit et compare la procédure permettant d’effectuer une analyse complète de région ou de sous-région d’intérêt de sections cérébrales de souris sagittales afin de quantifier la charge bêta-amyloïde dans le modèle murin transgénique APP/PS1 de la maladie d’Alzheimer.

Quantification complète ou sous-régionale de la charge bêta-amyloïde sur les sections cérébrales de souris

Cette méthode de purification biochimique avec analyse protéomique basée sur la spectrométrie de masse facilite la caractérisation robuste des noyaux de fibrilles amyloïdes, ce qui peut accélérer l’identification de cibles pour la prévention de la maladie d’Alzheimer.

Purification biochimique et caractérisation protéomique des noyaux de fibrilles amyloïdes du cerveau

Nous décrivons ici un système de levure reconstituant la γ-sécrétase humaine. Ce système permet d’identifier et d’étudier les mutations affectant l’activité et de cribler les inhibiteurs de la γ-sécrétase (GSI). En utilisant les propriétés de perte de fonction des mutants familiaux de la maladie d’Alzheimer, il est possible de dépister les modulateurs de la γ-sécrétase (GSM).

Saccharomyces cerevisiae Modèles de la maladie d’Alzheimer pour cribler les gènes, les mutations et les produits chimiques affectant la production de bêta-amyloïde par la γ-sécrétase

Découvrez la sélection d'aptamères ARN ciblant la protéine bêta-amyloïde impliquée dans la maladie d'Alzheimer. Cette méthode in vitro utilise transcription, liaison sur filtre et amplification pour isoler des molécules spécifiques.

Sélection d'aptamères pour amyloïde β-protéine, l'agent causal de la maladie d'Alzheimer

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