Injection orthotopique dans le coussinet adipeux mammaire : établissement du cancer du sein chez la souris

Tout d’abord, établissez la lignée cellulaire de cancer du sein souhaitée en culture. La veille de l’opération, rasez l’abdomen de la souris et utilisez une crème dépilatoire pour enlever le pelage et exposer les mamelons inguinaux. Le jour de l’opération, prélevez les cellules, anesthésiez la souris et confirmez une absence de réponse au pincement de l’orteil. À l’aide d’une pince à épiler, pincez la peau autour du mamelon pour créer un tunnel surélevé.

Ensuite, avec la seringue de cellules collectées, percez la peau. L’aiguille doit suivre le tunnel jusqu’à ce que la pointe se rapproche du mamelon. Déplacez doucement la pointe de l’aiguille vers le haut dans le coussinet adipeux mammaire, juste en dessous du mamelon. Retirez la pince à épiler pour former une tente cutanée avec l’aiguille, puis injectez lentement les cellules.

Enfin, rétractez la seringue en prenant soin de ne pas déranger la bosse ronde entourant le mamelon. Les cellules injectées et les tumeurs qui en résultent expriment la luciférase et peuvent être suivies à l’aide de l’imagerie bioluminescente. Dans l’exemple de protocole, nous montrerons l’établissement d’un cancer du sein orthotopique murin. La veille de l’op