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Zebrafish Rheotaxis Assay: A Method for Measuring Orientation Behavior in Response to Different Water Flow Rates

Essai de rhéotaxie du poisson-zèbre : une méthode pour mesurer le comportement d’orientation en réponse à différents débits d’eau

Protocol
3,559 Views
02:48 min
April 30, 2023
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Transcript

- Tout d’abord, transférez soigneusement le poisson dans le tunnel de nage et allumez la pompe à eau. Laissez le poisson s’acclimater pendant une heure pour réduire son niveau de stress. Les poissons ont tendance à présenter une rhéotaxie positive ou à s’orienter vers l’amont dans l’eau courante. À l’aide d’une analyse vidéo et d’un logiciel de modélisation, suivez le temps et le mouvement du poisson en marquant la position de son œil à chaque virage en amont à l’aide d’un point, et à chaque virage en aval à en amont avec un point d’une couleur différente. Augmentez le débit d’eau et répétez l’essai. On peut calculer un indice rhéotactique en comparant le temps passé face à l'amont au total, quantifiant ainsi le comportement d'orientation du poisson. L’exemple de protocole fait partie d’une expérience visant à séparer les influences de l’écoulement de l’eau et des champs magnétiques sur le comportement d’orientation des poissons.

- Pour configurer un champ magnétique avec une manipulation unidimensionnelle du champ magnétique, laissez le tunnel ouvert et allumez l’unité d’alimentation et le magnétomètre. Placez une sonde magnétique connectée à un compteur de gaz Tesla à l’intérieur du tunnel et vérifiez la tension nécessaire pour obtenir la valeur de champ magnétique choisie le long du grand axe du tunnel. Débranchez ensuite la sonde et connectez le tunnel d’écoulement à l’appareil de nage. Pour configurer un champ magnétique avec manipulation du champ magnétique tridimensionnel, allumez l’ordinateur, le convertisseur numérique-analogique et les pilotes de bobine et réglez le champ magnétique choisi sur les axes xy et z, puis placez le tunnel au centre de l’ensemble de paires de Helmholtz. Et le champ magnétique de choix a été mis en place, sélectionnez un à cinq poissons pour le test rhéotactique. Transférez le poisson dans le tunnel, réglez le débit dans le tunnel à 4,5 litres par minute et allumez la pompe.

- Assurez-vous de fermer la vanne de sortie avant de remplir le tunnel d’eau, puis transférez le poisson et ouvrez-le avant de régler le débit.

- Une fois que les animaux se sont acclimatés dans le tunnel de nage pendant une heure, commencez à enregistrer le comportement des poissons à l’intérieur du tunnel et commencez l’augmentation progressive du débit selon le protocole expérimental choisi.

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