Essai de réponse photomotrice : une méthode pour mesurer la réponse comportementale des larves de poisson-zèbre à un changement soudain des conditions d’éclairage

- Pour commencer, transférez 10 embryons de poisson-zèbre, à l’aide d’une pipette de transfert, dans un bécher rempli de 20 millilitres d’eau. Maintenant, cultivez les embryons à 28 degrés Celsius, sous le cycle d’obscurité et de lumière approprié requis pour une expérience. Ensuite, transférez les larves dans des plaques de puits. Assurez-vous que chaque puits contient une larve pour donner suffisamment d’espace pour nager.

Maintenant, remplissez complètement chaque puits avec de l’eau. Placez la plaque de puits dans la chambre d’enregistrement comportemental et suivez le mouvement des larves à l’aide d’un logiciel de suivi vidéo. Les larves présentent un mouvement accru dans l’obscurité et un mouvement diminué dans la lumière lorsqu’elles sont exposées à un cycle anormal de lumière et d’obscurité en raison de niveaux de stress accrus. Le calcul de la différence entre la distance moyenne parcourue pendant la dernière minute d’une période initiale et la première minute de la période suivante nous renseigne sur la réponse photomotrice du poisson.

Dans ce protocole, nous examinerons la réponse photomotrice chez les larves de poisson-zèbre et de tête-de-boule exposées à la caféine. Tout d’abord, placez la plaque de puits contenant le poisson expérimental dans la chambre d’enregistrement comportemental. Ensuite, ouvrez le protocole de suivi précédemment développé. Dans la visionneuse de suivi vidéo, assurez-vous que toutes les larves sont visibles, qu’une seule larve est présente dans chaque puits et que les puits sont alignés avec les zones d’observation définies.

Ensuite, cliquez sur Expérimenter et exécuter. Spécifiez le nom et l’emplacement d’enregistrement des données et cliquez sur l’icône Plusieurs images en direct pour mettre en évidence toutes les zones d’affichage prédéfinies. Enfin, fermez le panneau de la chambre d’enregistrement et cliquez sur Arrière-plan suivi de Démarrer sur l’écran de l’ordinateur.