Test de préférence lumière-obscurité : une méthode pour étudier le comportement lié à l’anxiété chez le poisson-zèbre

0 vues4:45 min • April 30th, 2023

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- Tout d’abord, créez un enclos à trois côtés autour de la zone d’essai pour minimiser les stimuli externes qui peuvent affecter le comportement des poissons. Mettez en place un éclairage zénithal diffus pour éviter les reflets à la surface de l’eau. Ensuite, remplissez l’aréna, qui est divisé en zones sombres et claires, avec de l’eau d’habitat maintenue à 28 degrés Celsius.

Placez l’arène dans l’enclos. Gardez le réservoir d’habitat - contenant les poissons à tester - à l’extérieur de l’enclos. Laissez les poissons s’acclimater pour réduire leur stress.

Maintenant, filetez doucement un poisson de l’aquarium d’habitat et placez-le dans le réservoir d’essai. Positionnez le poisson perpendiculairement aux côtés longs de l’arène pour éviter tout biais vers l’une ou l’autre zone. Observez le comportement des poissons à l’aide d’un logiciel d’enregistrement et répétez le test pour le reste des poissons. Mesurez le temps moyen passé par chaque poisson dans les zones claires et sombres.

Les poissons-zèbres ont tendance à passer plus de temps dans la zone sombre lorsqu’ils sont anxieux. Dans l’exemple de protocole, nous allons effectuer un test clair-obscur pour observer l’effet de l’exposition à l’éthanol sur le comportement du poisson-zèbre.

- Obtenez une arène claire-sombre de 9 centimètres et demi de large sur 55 centimètres de long et 9 centimètres et demi de profondeur avec un sol imperméable blanc. Fixez du papier imperméable et non réfléchissant blanc et noir sur les murs intérieurs de l’arène à l’aide de velcro, avec la moitié de l’arène recouverte de blanc et l’autre moitié recouverte de noir. Remplissez l’arène à une profondeur de 5 centimètres avec de l’eau d’habitat à une température de 25 à 28 degrés Celsius. Maintenez cette température tout au long du test.

Minimisez les stimuli visuels externes en construisant une enceinte blanche à trois côtés pour que l’arène soit placée. Assurez-vous que la zone d’essai dispose d’un éclairage aérien diffus qui ne provoque pas de reflets à la surface de l’eau, mais qui est suffisamment lumineux pour le logiciel de suivi des mouvements ou la quantification manuelle a posteriori à partir d’images vidéo. Définissez ensuite les paramètres d’enregistrement et d’analyse des mouvements du logiciel de suivi du comportement avec une durée d’essai de 5 à 15 minutes, selon la question de recherche.

Transportez le groupe de poissons à tester dans la zone de recherche dans l’aquarium d’habitat et placez-les à l’extérieur de l’enceinte de l’aréna. Laissez le poisson s’acclimater pendant 10 minutes. Pêchez délicatement un poisson du groupe approprié et placez-le au centre de l’arène claire-sombre, en relâchant chaque poisson lorsqu’il est positionné parallèlement à l’axe long de l’arène pour éviter de biaiser le poisson vers la zone claire ou sombre.

Commencez à enregistrer le comportement immédiatement après que l’animal est relâché. Surveillez tout problème logiciel avec le suivi du poisson ou pour le saut ou la congélation du poisson. Une fois l’essai terminé, pêchez doucement au filet et retirez le poisson de l’arène dans un réservoir de rétention ou un réservoir d’habitat. Faites pivoter l’arène de 180 degrés après que la moitié des sujets ont été testés pour éviter toute confusion due à des biais résultant de l’extrémité de l’arène orientée vers l’extrémité ouverte de l’enceinte.

Commencez l’analyse en examinant le temps passé dans les zones claires par rapport aux zones sombres. Pour chaque groupe et pour chaque poisson, obtenir le temps relatif passé dans les zones claires et sombres et analyser à l’aide d’un test t d’un échantillon pour déterminer si les groupes préfèrent significativement une zone à l’autre. Pour comparer les préférences, calculez un indice de préférence en soustrayant le temps passé dans la zone claire du temps passé dans la zone sombre et comparez les différences entre les groupes à l’aide de tests t. Comparez plusieurs groupes à l'aide d'une analyse de variance à un facteur, en utilisant le test post-hoc de différence significative honnête de Tukey si nécessaire.

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Dernière mise à jour : 1 août 2026